| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 高果糖浆的概述 | 第9-12页 |
| 1.1.1 高果糖浆的简介 | 第9页 |
| 1.1.2 高果糖浆的分类 | 第9-10页 |
| 1.1.3 高果糖浆的应用 | 第10-11页 |
| 1.1.4 高果糖浆的生产 | 第11-12页 |
| 1.2 葡萄糖异构酶概述 | 第12-16页 |
| 1.2.1 葡萄糖异构酶简述 | 第12-13页 |
| 1.2.2 葡萄糖异构酶的结构 | 第13页 |
| 1.2.3 葡萄糖异构酶的性质 | 第13-15页 |
| 1.2.4 葡萄糖异构酶的应用 | 第15页 |
| 1.2.5 葡萄糖异构酶筛选与研究方向 | 第15-16页 |
| 1.2.6 葡萄糖异构酶的分子改造 | 第16页 |
| 1.3 本研究的意义及主要内容 | 第16-17页 |
| 第二章 Alicyclobacillus sp.A4与Caldicellulosiruptor bescii葡萄糖异构酶基因的克隆表达与纯化 | 第17-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第17页 |
| 2.1.3 主要生化试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 引物序列及名称 | 第17-18页 |
| 2.1.5 培养基及主要试剂配置 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-25页 |
| 2.2.1 葡萄糖异构酶A4GI与CbGI基因克隆 | 第19-21页 |
| 2.2.2 葡萄糖异构酶A4GI与CbGI基因的表达 | 第21-24页 |
| 2.2.3 重组A4GI与CbGI蛋白的纯化 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-28页 |
| 2.3.1 A4GI与CbGI基因扩增与载体构建 | 第25-27页 |
| 2.3.2 A4GI与CbGI序列分析 | 第27页 |
| 2.3.3 A4GI与CbGI蛋白表达与纯化 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.5 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 Alicyclobacillus sp.A4和Caldicellulosiruptor bescii葡萄糖异构酶酶学性质测定 | 第30-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 研究对象 | 第30页 |
| 3.1.2 仪器及试剂 | 第30页 |
| 3.1.3 培养基及主要试剂配置 | 第30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-32页 |
| 3.2.1 A4GI与CbGI蛋白定量 | 第30-31页 |
| 3.2.2 酶活的测定 | 第31页 |
| 3.2.3 果糖标准曲线的绘制 | 第31页 |
| 3.2.4 A4GI与CbGI最适反应条件及稳定性测定 | 第31-32页 |
| 3.2.5 不同金属离子及化学试剂对A4GI与CbGI酶活的影响 | 第32页 |
| 3.2.6 A4GI与CbGI动力学参数测定 | 第32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-36页 |
| 3.3.1 A4GI与CbGI蛋白浓度 | 第32-33页 |
| 3.3.2 果糖标准曲线 | 第33页 |
| 3.3.3 A4GI与CbGI最适反应条件及稳定性 | 第33-34页 |
| 3.3.4 不同金属离子及化学试剂对A4GI与CbGI酶活的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.5 A4GI与CbGI动力力学参数 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 3.5 本章小结 | 第38-39页 |
| 第四章 Alicyclobacillus sp.A4和Caldicellulosiruptor bescii葡萄糖异构酶转化率研究 | 第39-44页 |
| 4.1 实验材料 | 第39页 |
| 4.1.1 实验菌株 | 第39页 |
| 4.1.2 实仪器及试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 培养基及试剂配置 | 第39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 4.2.1 A4GI与CbGI酶液的浓缩与酶活的标定 | 第39页 |
| 4.2.2 葡萄糖含水量的测定 | 第39页 |
| 4.2.3 转化体系中酶量的确定 | 第39-40页 |
| 4.2.4 反应温度对CbGI转化率的影响 | 第40页 |
| 4.2.5 CbGI与A4GI在不同葡萄糖浓度下的转化率 | 第40-41页 |
| 4.3 结果与分析 | 第41-43页 |
| 4.3.1 A4GI与CbGI酶活标定以及葡萄糖含水量 | 第41页 |
| 4.3.2 不同单位的酶活对CbGI转化率的影响 | 第41页 |
| 4.3.3 CbGI在不同温度下的转化率 | 第41-42页 |
| 4.3.4 A4GI与CbGI在不同葡萄糖浓度时的转化率 | 第42-43页 |
| 4.4 讨论 | 第43页 |
| 4.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 第五章 Alicyclobacillus sp.A4葡萄糖异构酶热稳定性分子改造 | 第44-51页 |
| 5.1 实验材料 | 第44页 |
| 5.1.1 菌株及质粒 | 第44页 |
| 5.1.2 实验仪器与设备 | 第44页 |
| 5.1.3 培养基与主要试剂 | 第44页 |
| 5.2 实验方法 | 第44-46页 |
| 5.2.1 序列比对 | 第44页 |
| 5.2.2 A4GI同源建模与模型评估 | 第44页 |
| 5.2.3 动力学模拟 | 第44-45页 |
| 5.2.4 突变体载体构建、表达与纯化 | 第45-46页 |
| 5.2.5 突变体热稳定性测定 | 第46页 |
| 5.3 结果与分析 | 第46-49页 |
| 5.3.1 序列比对 | 第46页 |
| 5.3.2 同源建模与模型评估 | 第46-47页 |
| 5.3.3 动力学模拟 | 第47-48页 |
| 5.3.4 突变体构建、表达与纯化 | 第48页 |
| 5.3.5 突变体蛋白热稳定性测定 | 第48-49页 |
| 5.4 讨论 | 第49-50页 |
| 5.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 第六章 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60页 |
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