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当前位置:教育论文中心首页--博士论文--玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及高通量定性、定量检测技术的研究
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玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及高通量定性、定量检测技术的研究
 
     论文目录
 
摘要第6-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 绪论第18-32页
    1. 真菌毒素严重威胁着食品和饲料安全第18-20页
        1.1 真菌毒素污染事件时有发生第18-19页
        1.2 研究真菌毒素的重要性第19-20页
    2. 真菌毒素在食品饲料中的分布和毒性分析第20-22页
        2.1 重要真菌毒素的主要毒性第21页
        2.2 重要真菌毒素污染分布第21-22页
    3. 构建食品安全保障体系第22页
    4. 真菌毒素检测方法研究进展第22-31页
        4.1 色谱法第23-24页
        4.2 免疫分析方法第24-31页
    5. 本项目的研究目的和意义第31-32页
第二章 抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备与竞争ELISA检测方法的建立第32-62页
    1. 材料与方法第32-41页
        1.1 主要试剂第32-33页
        1.2 主要仪器第33-34页
        1.3 实验动物和细胞第34页
        1.4 玉米赤霉烯酮偶联物完全抗原的制备与鉴定第34-35页
            1.4.1 玉米赤霉烯酮偶联物完全抗原的制备第34-35页
            1.4.2 玉米赤霉烯酮偶联物完全抗原的鉴定第35页
        1.5 单克隆抗体的制备第35-38页
        1.6 单克隆抗体相关特性的测定第38-39页
            1.6.1 单克隆抗体效价的测定第38页
            1.6.2 单克隆抗体灵敏度的测定第38-39页
            1.6.3 单克隆抗体亚型的鉴定第39页
        1.7 检测ZEN的间接竞争ELISA方法的建立与优化第39-41页
        1.8 加标样品检测第41页
        1.9 ELISA与试剂盒的比较第41页
    2. 结果第41-56页
        2.1 ZEN完全抗原偶联物的鉴定第41-44页
        2.2 小鼠免疫第44-45页
        2.3 杂交瘤细胞株的筛选第45页
        2.4 杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性测定第45-46页
        2.5 单克隆抗体相关特性的研究第46-48页
        2.6 检测ZEN的间接竞争ELISA方法的建立第48-53页
        2.7 基质影响的消除第53-54页
        2.8 样品检测与回收率测定第54-55页
        2.9 与试剂盒的比较第55-56页
    3. 讨论第56-62页
        3.1 ZEN完全抗原的合成第56-57页
        3.2 单克隆抗体的制备第57-60页
        3.3 ELISA方法的建立第60-62页
第三章 双重定性胶体金试纸条检测谷物与饲料中的玉米赤霉烯酮和伏马毒素B1第62-94页
    1. 材料与方法第62-73页
        1.1 主要试剂第62-63页
        1.2 主要仪器第63-64页
        1.3 胶体金的制备与鉴定第64页
        1.4 胶体金与单克隆抗体最佳结合pH第64页
        1.5 最佳抗体结合量的测定第64-65页
        1.6 免疫胶体金的制备与鉴定第65-66页
        1.7 对金标抗体相关缓冲液的优化第66-67页
        1.8 对试纸条材料和前处理溶液的优化第67-69页
        1.9 对金标抗体和包被抗原浓度的优化第69-70页
        1.10 试纸条的点样及组装第70-71页
        1.11 单一胶体金试纸条检测方法的建立第71-72页
        1.12 双重胶体金试纸条检测方法的建立第72页
        1.13 样品萃取与加标实验第72页
        1.14 天然样本两种检测方法的比较第72-73页
    2. 结果第73-91页
        2.1 胶体金溶液的鉴定第73-75页
        2.2 胶体金与单克隆抗体最佳结合pH的优化第75页
        2.3 胶体金标记抗体的最佳抗体结合量第75-77页
        2.4 免疫胶体金的鉴定第77页
        2.5 金标抗体相关缓冲液的确定第77-78页
        2.6 包被抗原缓冲液的确定第78页
        2.7 试纸条材料和前处理溶液的确定第78-81页
        2.9 包被抗原选择第81-83页
        2.10 金标抗体和包被抗原浓度的确定第83-85页
        2.1 1胶体金试纸条检测特异性的测定第85-86页
        2.12 单一胶体金试纸条对ZEN或FB1检测限的确定第86-87页
        2.13 双重胶体金试纸条对加标样品的检测第87-88页
        2.14 天然样品两种检测方法的比较第88-91页
    3. 讨论第91-94页
        3.1 胶体金试纸条制备第91-92页
        3.2 胶体金方法的优势第92-93页
        3.3 双重胶体金试纸条检测方法的优势第93-94页
第四章 双重定量胶体金试纸条检测谷物与饲料中的玉米赤霉烯酮和伏马毒素B1第94-111页
    1. 材料与方法第94-101页
        1.1 主要试剂第94-95页
        1.2 主要仪器第95-96页
        1.3 ZEN、FB1完全抗原的制备第96页
        1.4 25 nm胶体金的制备与鉴定第96页
        1.5 免疫胶体金的制备第96页
        1.6 定量胶体金试纸条的制备与组装第96-98页
        1.7 胶体金试纸条的优化第98-99页
        1.8 加标实验第99页
        1.9 检测步骤第99-100页
        1.10天然样本两种检测方法的比较第100-101页
    2. 结果第101-108页
        2.1 定量胶体金试纸方法的制备和优化第101-102页
        2.2 定量胶体金试纸条方法的标准曲线第102-104页
        2.3 加标实验与回收率测定第104-106页
        2.4 天然样品两种检测方法的比较第106-108页
    3. 讨论第108-111页
        3.1 双重定量试纸条中基质影响的消除第108页
        3.2 金标抗体稀释度的优化第108页
        3.3 胶体金试纸条制备中缓冲液与添加物的优化第108-109页
        3.4 双重定量胶体金试纸条的优势第109-111页
第五章 电化学免疫方法检测谷物类食品中的玉米赤霉烯酮第111-132页
    1. 材料和方法第112-118页
        1.1 材料第112-113页
        1.2 主要仪器第113页
        1.3 对硝基苯磷酸与对硝基苯酚在玻碳电极上的电化学行为第113-114页
        1.4 间接竞争ELISA检测方法的建立第114-115页
        1.5 电化学检测方法的建立第115-116页
        1.6 电化学检测方法的优化第116页
        1.7 加标样品前处理第116-117页
        1.8 检测步骤第117-118页
        1.9 天然样本两种方法检测比较第118页
    2. 结果第118-128页
        2.1 对硝基苯磷酸与对硝基苯酚在玻碳电极上的电化学行为第118-120页
        2.2 间接竞争ELISA检测方法的建立第120-121页
        2.3 电化学检测方法的建立第121-123页
        2.4 电化学免疫方法检测ZEN的标准曲线第123-125页
        2.5 加标实验第125-128页
        2.6 两种方法的检测比较第128页
    3. 讨论第128-132页
        3.1 高灵敏检测的实际需求第128-129页
        3.2 与其他检测ZEN的免疫方法的比较第129-132页
第六章 多种化学发光免疫方法检测谷物类食品中的玉米赤霉烯酮第132-156页
    1. 材料与方法第132-138页
        1.1 主要试剂第132-133页
        1.2 主要仪器第133页
        1.3 ZEN偶联物的合成第133-134页
        1.4 生物素化ZEN-OVA第134页
        1.5 制备链霉亲和素-辣根过氧化物酶标记纳米金第134-135页
        1.6 直接竞争化学发光免疫方法的建立第135-136页
        1.7 化学发光免疫方法的优化第136-137页
        1.8 交叉反应性测定第137页
        1.9 样品前处理和回收率测定第137页
        1.10两种检测方法的比较第137-138页
    2. 结果第138-153页
        2.1 ZEN-HRP和ZEN-OVA-biotin的鉴定第138页
        2.2 纳米金标记链霉亲和素-辣根过氧化物酶的鉴定第138页
        2.3 化学发光免疫方法的优化结果第138-148页
        2.4 三种化学发光免疫方法的比较第148-150页
        2.5 交叉反应性测定第150页
        2.6 加标实验第150-152页
        2.7 两种检测方法的比较第152-153页
    3. 讨论第153-156页
        3.1 直接竞争ELISA中信号放大策略的使用第153-154页
        3.2 与其他高灵敏方法的比较第154-156页
第七章 液相芯片免疫方法检测谷物和饲料中的多种真菌毒素第156-176页
    1. 材料与方法第156-162页
        1.1 主要试剂第156-157页
        1.2 主要仪器第157-158页
        1.3 生物素标记真菌毒素偶联物与抗体包被微球第158页
        1.4 单一毒素液相芯片检测方法的建立与优化第158-159页
        1.5 多重芯片检测方法的建立与优化第159-161页
        1.6 交叉反应性检测第161页
        1.7 加标样品检测第161-162页
        1.8 天然样品检测第162页
        1.9 两种检测方法的比较第162页
    2. 结果第162-173页
        2.1 单一真菌毒素液相芯片检测方法的优化第162-167页
        2.2 多重液相芯片检测方法的优化第167-168页
        2.3 单一真菌毒素液相芯片检测与多重真菌毒素液相芯片检测的比较第168-169页
        2.4 四种真菌毒素同时检测时的标准曲线第169-170页
        2.5 加标检测结果第170-172页
        2.6 两种检测方法的比较第172-173页
    3. 讨论第173-176页
        3.1 液相芯片检测方法的优势第173-174页
        3.2 本研究建立的多种方法的比较第174-176页
第八章 全文总结第176-177页
参考文献第177-184页
附录 主要溶液配方第184-186页
致谢第186-187页
攻读博士学位期间已发表的论文第187-188页

 
 
论文编号BS3195861,这篇论文共188
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