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当前位置:教育论文中心首页--博士论文--代谢工程改造枯草芽孢杆菌/谷氨酸棒杆菌高产手性2,3-丁二醇和乙偶姻
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代谢工程改造枯草芽孢杆菌/谷氨酸棒杆菌高产手性2,3-丁二醇和乙偶姻
 
     论文目录
 
中文摘要第4-5页
abstract第5-6页
第一章 文献综述第11-34页
    1.1 2,3-丁二醇的概述第11-21页
        1.1.1 2,3-丁二醇的理化性质、用途和生产工艺第11-13页
        1.1.2 2,3-丁二醇的生产菌株及其改造第13-15页
        1.1.3 以糖类为底物的 2,3-丁二醇的发酵生产策略第15-20页
        1.1.4 下游分离纯化工艺第20-21页
    1.2 乙偶姻的概述第21-29页
        1.2.1 乙偶姻的理化性质、用途和生产工艺第21-22页
        1.2.2 乙偶姻的生产菌株及其改造第22-23页
        1.2.3 以糖类为底物生产乙偶姻的发酵生产策略第23-27页
        1.2.4 以 2,3-丁二醇或双乙酰为底物的发酵生产策略第27-28页
        1.2.5 下游分离纯化工艺第28-29页
    1.3 使用枯草芽孢杆菌和谷氨酸棒杆菌作为工程菌株的优势第29-30页
        1.3.1 使用枯草芽孢杆菌的优势第29页
        1.3.2 使用谷氨酸棒杆菌的优势第29-30页
    1.4 使用可再生碳源和廉价氮源生产 2,3-丁二醇和乙偶姻发酵的优势第30-32页
        1.4.1 使用戊糖和己糖的一种或多种的混合物作为底物碳源第30-31页
        1.4.2 使用甘油作为底物碳源第31-32页
        1.4.3 使用廉价氮源提高生产强度第32页
    1.5 本文的选题背景和主要研究内容第32-34页
        1.5.1 选题背景第32-33页
        1.5.2 研究内容第33-34页
第二章 改造枯草芽孢杆菌高产手性D-(-)-2,3-丁二醇第34-88页
    2.1 实验材料第34-43页
        2.1.1 菌种和质粒第34-36页
        2.1.2 主要仪器第36-37页
        2.1.3 主要试剂第37-39页
        2.1.4 主要溶液第39-41页
        2.1.5 培养基第41-43页
    2.2 实验方法第43-54页
        2.2.1 引物的设计合成和基因测序第43页
        2.2.2 CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞第43-44页
        2.2.3 Tss法制备大肠杆菌感受态细胞第44-45页
        2.2.4 质粒DNA的提取第45页
        2.2.5 DNA片段的纯化第45-46页
        2.2.6 酶切与去磷酸化体系第46页
        2.2.7 连接体系第46-47页
        2.2.8 PCR第47-49页
        2.2.9 琼脂糖凝胶电泳第49页
        2.2.10 枯草芽孢杆菌的Spizizen转化第49-50页
        2.2.11 改良型枯草芽孢杆菌转化方法第50页
        2.2.12 基于两次单交换的无抗性标记基因敲除或过表达第50-51页
        2.2.13 枯草芽孢杆菌基因组DNA的提取第51页
        2.2.14 菌体生长特性的考察和摇瓶发酵条件第51页
        2.2.15 发酵液残糖的测定第51-52页
        2.2.16 蛋白质含量的测定第52页
        2.2.17 生物量的测定第52页
        2.2.18 乙偶姻还原酶/2,3-丁二醇脱氢酶酶活的测定第52-53页
        2.2.19 微生物胞内还原力的测定第53-54页
        2.2.20 微生物代谢产物和底物的测定第54页
    2.3 结果与分析第54-86页
        2.3.1 野生型枯草芽孢杆菌168生产 2,3-丁二醇的构型分析及证据第54-56页
        2.3.2 利用葡萄糖为底物产D-(-)-2,3-丁二醇的工程菌株构建第56-64页
        2.3.3 利用葡萄糖为底物工程菌株胞内还原力水平第64-67页
        2.3.4 利用葡萄糖为底物工程菌株胞内 2,3-丁二醇脱氢酶酶活测定第67-69页
        2.3.5 利用葡萄糖为底物摇瓶发酵实验第69-74页
        2.3.6 利用葡萄糖为底物的分批补料发酵实验第74-75页
        2.3.7 利用葡萄糖、木糖和阿拉伯糖的混合碳源生产D-(-)-2,3-丁二醇第75-85页
        2.3.8 利用基因简化菌发酵生产D-(-)-2,3-丁二醇第85-86页
    2.4 小结第86-88页
第三章 改造枯草芽孢杆菌高产手性meso-丁二醇第88-107页
    3.1 实验材料第88-90页
        3.1.1 菌株和质粒第88-90页
        3.1.2 实验仪器第90页
        3.1.3 实验试剂第90页
        3.1.4 实验溶液第90页
        3.1.5 培养基第90页
    3.2 实验方法第90页
    3.3 结果与分析第90-105页
        3.3.1 meso-2,3-丁二醇工程菌株的构建第90-94页
        3.3.2 利用葡萄糖为底物生产meso-2,3-丁二醇的摇瓶发酵结果第94-98页
        3.3.3 利用葡萄糖为底物工程菌株发酵罐发酵表征第98-102页
        3.3.4 利用葡萄糖、木糖和阿拉伯糖的混合碳源生产meso-2,3-丁二醇第102-104页
        3.3.5 不同物种乙偶姻还原酶/2,3-丁二醇脱氢酶的进化关系第104-105页
    3.4 小结第105-107页
第四章 改造枯草芽孢杆菌高产乙偶姻第107-117页
    4.1 实验材料第107-109页
        4.1.1 菌株与质粒第107-108页
        4.1.2 实验仪器第108页
        4.1.3 实验试剂第108页
        4.1.4 实验溶液第108页
        4.1.5 培养基第108-109页
    4.2 实验方法第109页
    4.3 结果与分析第109-116页
        4.3.1 发酵策略的选择第109页
        4.3.2 工程菌株的构建第109-111页
        4.3.3 发酵条件优化第111-114页
        4.3.4 高浓度糖批式发酵结果第114-116页
    4.4 小结第116-117页
第五章 改造谷氨酸棒杆菌生产D-(-)-2,3-丁二醇第117-128页
    5.1 实验材料第117-119页
        5.1.1 菌株和质粒第117-118页
        5.1.2 实验仪器第118页
        5.1.3 实验试剂第118-119页
        5.1.4 培养基第119页
    5.2 实验方法第119-121页
        5.2.1 谷氨酸棒杆菌电转感受态细胞的制备第120页
        5.2.2 谷氨酸棒杆菌电转感受态细胞的转化第120-121页
    5.3 结果与分析第121-127页
        5.3.1 高产D-(-)-2,3-丁二醇的谷氨酸棒杆菌的优化策略第121-122页
        5.3.2 甘油等副产物生成途径的阻断第122-124页
        5.3.3 D-(-)-2,3-丁二醇生产菌株的构建第124页
        5.3.4 利用葡萄糖高产D-(-)-2,3-丁二醇的发酵实验第124-126页
        5.3.5 共利用葡萄糖和木糖生产D-(-)-2,3-丁二醇的发酵实验第126-127页
    5.4 本章小结第127-128页
第六章 结论与展望第128-132页
    6.1 主要结论第128-129页
    6.2 创新点第129-130页
    6.3 展望第130-132页
参考文献第132-142页
发表论文和科研情况第142-145页
附录第145-147页
致谢第147-148页

 
 
论文编号BS2735612,这篇论文共148
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