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产蛋白酶霉菌的分离鉴定、蛋白酶基因cDNA克隆及产酶条件优化

论文目录

摘要	第1-8页
Abstract	第8-9页
前言	第9-10页
第一章文献综述	第10-19页
1 蛋白酶	第10页
2 微生物蛋白酶	第10-12页
·微生物蛋白酶来源	第10-11页
·微生物蛋白酶的特点	第11页
·真菌蛋白酶特点	第11页
·细菌蛋白酶特点	第11页
·病毒蛋白酶特点	第11页
·微生物蛋白酶分类	第11-12页
3 瘤胃真菌研究进展	第12-14页
·瘤胃真菌特点	第12页
·瘤胃真菌作用	第12-13页
·对蛋白质和淀粉的降解	第12-13页
·对纤维素的降解	第13页
·瘤胃真菌应用前景	第13-14页
·优质真菌蛋白源	第13页
·处理秸秆	第13-14页
·遗传修饰	第14页
·转基因	第14页
4 米曲霉研究进展	第14-17页
·米曲霉特性	第14页
·米曲霉的应用	第14-17页
·用于饲料加工	第14-15页
·用于食品加工	第15-17页
·发酵曲酸	第17页
·用于酿酒	第17页
5 响应面分析法	第17-19页
第二章产蛋白酶菌的分离、鉴定	第19-35页
1 引言	第19页
2 材料与方法	第19-26页
·材料	第19-21页
·样品来源	第19页
·培养基	第19-20页
·主要试剂与试剂盒	第20页
·仪器与设备	第20-21页
·方法	第21-26页
·菌株的分离纯化	第21页
·初筛	第21页
·复筛	第21页
·酶活力测定	第21-23页
·菌株鉴定	第23页
·形态鉴定	第23页
·18S rDNA 鉴定	第23-26页
3 结果与分析	第26-33页
·产蛋白酶菌的分离	第26页
·初筛	第26-27页
·复筛及酶活测定	第27-28页
·形态鉴定	第28-29页
·分子鉴定	第29-33页
·基因组电泳结果	第29页
·18S rDNA PCR 扩增	第29-30页
·PCR 片段胶回收	第30页
·菌液 PCR 验证	第30-31页
·序列分析	第31-33页
4 讨论	第33-34页
·菌株的分离、鉴定	第33-34页
·菌株基因组 DNA 提取	第34页
5 小结	第34-35页
第三章蛋白酶基因的 cDNA 克隆	第35-46页
1 引言	第35页
2 材料与方法	第35-38页
·材料	第35页
·样品	第35页
·仪器与设备	第35页
·试剂	第35页
·培养基	第35页
·方法	第35-38页
·引物设计	第35-36页
·提取总 RNA	第36页
·cDNA 第一链合成	第36-37页
·cDNA 片段扩增	第37页
·PCR 片段回收	第37页
·目的片段的连接与转化	第37页
·菌液 PCR 检验	第37页
·基因序列分析及蛋白质结构预测	第37-38页
3 结果分析	第38-44页
·RNA 的提取	第38页
·cDNA 片段扩增	第38-39页
·PCR 胶回收片段	第39页
·菌液 PCR 鉴定	第39页
·基因序列分析及蛋白质预测	第39-44页
·Npi 基因序列及氨基酸分析	第39-42页
·Alp 基因序列分析及氨基酸预测	第42-44页
4 讨论	第44-45页
5 小结	第45-46页
第四章产酶条件优化	第46-57页
1 引言	第46页
2 材料与方法	第46-47页
·材料	第46-47页
·主要实验试剂	第46页
·实验仪器	第46-47页
·方法	第47页
·单因素试验	第47页
·响应面法优化设计试验	第47页
·数据分析	第47页
3 结果与分析	第47-55页
·单因素试验	第47-49页
·接种量对菌株 A18 产蛋白酶活性的影响	第47-48页
·温度对菌株 A18 产蛋白酶活性的影响	第48-49页
·时间对菌株 A18 产蛋白酶活性的影响	第49页
·响应面试验分析	第49-55页
·试验设计结果	第49-51页
·两因素对蛋白酶活性的响应面分析	第51-55页
·验证试验	第55页
4 讨论	第55-56页
·单因素试验	第55-56页
·响应面试验	第56页
5 小结	第56-57页
全文总结	第57-58页
展望	第58页
本文的创新点	第58-59页
参考文献	第59-66页
致谢	第66页

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