| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-29页 |
| 1.1 马铃薯甲虫概述 | 第15-17页 |
| 1.1.1 马铃薯甲虫的发生与危害 | 第15-16页 |
| 1.1.2 马铃薯甲虫的防治 | 第16-17页 |
| 1.2 昆虫黑色素合成基因的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2.1 果蝇黑色素合成途径基因的研究 | 第18-19页 |
| 1.2.2 家蚕黑色素合成途径基因的研究 | 第19页 |
| 1.2.3 赤拟谷盗黑色素合成途径基因的研究 | 第19-20页 |
| 1.2.4 其他昆虫黑色素合成途径基因的研究 | 第20页 |
| 1.3 昆虫激素的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3.1 保幼激素在昆虫生活史中的影响 | 第21页 |
| 1.3.2 蜕皮激素在昆虫生活史中的影响 | 第21-22页 |
| 1.3.3 保幼激素和蜕皮激素协同调控马铃薯甲虫的生活史 | 第22页 |
| 1.4 RNA干扰的研究进展 | 第22-26页 |
| 1.4.1 RNAi的应用前景 | 第23页 |
| 1.4.2 RNAi的作用机制 | 第23页 |
| 1.4.3 马铃薯甲虫RNAi技术的研究方法 | 第23-26页 |
| 1.4.4 系统性RNAi | 第26页 |
| 1.5 基于昆虫黑色素合成途径的JH/RNAi和MH/RNAi的交叉对话 | 第26-27页 |
| 1.6 本研究的立题背景及意义 | 第27-29页 |
| 第2章 马铃薯甲虫NBAD水解酶基因的克隆及对保幼激素和蜕皮激素的响应 | 第29-44页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-38页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.1.3 马铃薯甲虫NBAD水解酶tan基因的获取 | 第30页 |
| 2.1.4 马铃薯甲虫总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.1.5 cDNA第一链的合成 | 第31-32页 |
| 2.1.6 引物设计和dsRNA原核表达系统的构建 | 第32页 |
| 2.1.7 PCR反应体系及条件 | 第32-33页 |
| 2.1.8 PCR产物的回收纯化 | 第33-34页 |
| 2.1.9 连接和转化实验 | 第34-35页 |
| 2.1.10 测序分析 | 第35页 |
| 2.1.11 生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 2.1.12 喂食dsRNA菌液的制备 | 第36页 |
| 2.1.13 喂食dsRNA的室内生物测定 | 第36页 |
| 2.1.14 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第36-38页 |
| 2.1.15 统计分析 | 第38页 |
| 2.2 结果与分析 | 第38-43页 |
| 2.2.1 马铃薯甲虫NBAD水解酶的多序列比对及进化分析 | 第38-39页 |
| 2.2.2 马铃薯甲虫发育过程中tan基因的时空表达 | 第39-40页 |
| 2.2.3 dstan对马铃薯甲虫生长发育的影响 | 第40-42页 |
| 2.2.4 干涉保幼激素和蜕皮激素合成和信号传导基因对Ldtan表达的影响 | 第42-43页 |
| 2.3 结论与讨论 | 第43-44页 |
| 第3章 马铃薯甲虫黄体基因Yellow家族的克隆及功能验证 | 第44-58页 |
| 3.1 材料及方法 | 第44-48页 |
| 3.1.1 马铃薯甲虫的饲养及实验材料处理 | 第44页 |
| 3.1.2 目标基因的获取 | 第44-45页 |
| 3.1.3 RACE-PCR反应体系及条件 | 第45-46页 |
| 3.1.4 分子克隆和dsRNA合成 | 第46-47页 |
| 3.1.5 qPCR | 第47页 |
| 3.1.6 室内RNAi试验 | 第47-48页 |
| 3.1.7 统计分析 | 第48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-57页 |
| 3.2.1 马铃薯甲虫黄体基因家族的的多序列比对及进化分析 | 第48-52页 |
| 3.2.2 马铃薯甲虫发育过程中黄体家族基因的时空表达模式 | 第52-57页 |
| 3.3 结论与讨论 | 第57-58页 |
| 第4章 马铃薯黑檀体基因克隆与保幼激素蜕皮激素的响应及分子进化的研究 | 第58-71页 |
| 4.1 材料及方法 | 第58-61页 |
| 4.1.1 马铃薯甲虫的饲养及实验材料处理 | 第58页 |
| 4.1.2 目标基因的获取 | 第58页 |
| 4.1.3 分子克隆和dsRNA合成 | 第58-59页 |
| 4.1.4 室内生物测定 | 第59-60页 |
| 4.1.5 qPCR | 第60页 |
| 4.1.6 统计分析 | 第60页 |
| 4.1.7 生物信息学分析 | 第60-61页 |
| 4.2 结果与分析 | 第61-68页 |
| 4.2.1 马铃薯甲虫NBAD合成酶(黑檀体基因)的多重序列比对及系统发育分析 | 第61-63页 |
| 4.2.2 马铃薯甲虫发育过程中NBAD合成酶(黑檀体基因)的时空表达 | 第63-64页 |
| 4.2.3 NBAD合成酶对马铃薯甲虫生长发育的影响 | 第64-65页 |
| 4.2.4 干扰保幼激素和蜕皮激素合成和信号转导基因对黑檀体基因表达的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.5 马铃薯甲虫黑檀体基因的进化分析 | 第66-67页 |
| 4.2.6 马铃薯甲虫黑檀体基因的大田盆栽试验 | 第67-68页 |
| 4.3 结论与讨论 | 第68-71页 |
| 第5章 全文总结与展望 | 第71-73页 |
| 5.1 全文总结 | 第71页 |
| 5.2 展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简介 | 第84页 |
| 攻读硕士学位期间参加的学术会议 | 第84页 |
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