摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略表 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
1.1 Emaravirus属病毒的分子和生物学特性 | 第10-12页 |
1.2 昆虫传播特性 | 第12页 |
1.3 布尼亚病毒目病毒的复制 | 第12-14页 |
1.4 Emaravirus属病毒的进化 | 第14页 |
1.5 缺陷型RNA | 第14-15页 |
1.6 小RNA测序在病毒研究中的作用 | 第15页 |
1.7 研究目的与意义 | 第15-17页 |
第二章 PCLSaV基因组序列测定及分析 | 第17-38页 |
2.1 研究材料 | 第17页 |
2.1.1 样品来源 | 第17页 |
2.1.2 所用的主要试剂 | 第17页 |
2.2 研究方法 | 第17-21页 |
2.2.1 小RNA数据分析及RNA seq测序分析 | 第17-18页 |
2.2.2 引物设计 | 第18页 |
2.2.3 梨叶片总RNA的提取 | 第18-19页 |
2.2.4 RT-PCR | 第19页 |
2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
2.2.6 PCR扩增产物的回收 | 第19-20页 |
2.2.7 DNA片段的连接 | 第20页 |
2.2.8 热击转化 | 第20页 |
2.2.9 阳性质粒鉴定与序列测定 | 第20页 |
2.2.10 序列分析所用软件 | 第20-21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-36页 |
2.3.1 小RNA测序及RNA seq测序结果分析 | 第21-22页 |
2.3.2 PCLSaV基因组序列扩增 | 第22-25页 |
2.3.3 PCLSaV的基因组结构 | 第25-29页 |
2.3.4 Emaravirus属病毒 3’与 5’端非编码区的特征 | 第29页 |
2.3.5 系统进化分析 | 第29-32页 |
2.3.6 小RNA分析结果 | 第32页 |
2.3.7 小RNA在PCLSa V基因组上的分布及其碱基偏好性 | 第32-35页 |
2.3.8 病毒粒子的形态观察 | 第35-36页 |
2.4 小结与讨论 | 第36-38页 |
第三章 PCLSaV分子检测及生物学特性研究 | 第38-45页 |
3.1 研究材料及方法 | 第38-39页 |
3.1.1 样品来源 | 第38页 |
3.1.2 检测病毒所用的引物 | 第38页 |
3.1.3 RT-PCR检测PCLSa V | 第38-39页 |
3.1.4 巢式多重RT-PCR检测ASGV、ASPV和AC LSV | 第39页 |
3.1.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第39页 |
3.2 结果与分析 | 第39-44页 |
3.2.1 PCLSaV的RT-PCR检测及CP基因多样性分析 | 第39-42页 |
3.2.2 田间症状调查 | 第42-44页 |
3.3 结果与讨论 | 第44-45页 |
第四章 全文总结与展望 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
附表 RT-PCR方法检测PCLSa V及三种梨潜隐病毒的结果统计感受态的制作 | 第52-59页 |
硕士期间发表的文章 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |