| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第15-21页 |
| 1.1 乳酸菌概述 | 第15-16页 |
| 1.2 乳酸菌作为抗原蛋白递送活载体的研究 | 第16-18页 |
| 1.2.1 乳酸菌表达外源蛋白的形式 | 第16-17页 |
| 1.2.2 乳酸菌递送外源蛋白的策略 | 第17页 |
| 1.2.3 重组乳酸菌诱导机体免疫应答的机制 | 第17-18页 |
| 1.3 禽类免疫系统 | 第18-19页 |
| 1.3.1 禽类的主要免疫器官及作用 | 第18-19页 |
| 1.3.2 禽黏膜相关淋巴组织 | 第19页 |
| 1.3.3 乳酸菌与禽黏膜相关淋巴组织 | 第19页 |
| 1.4 禽传染性法氏囊病活载体疫苗的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5 目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 L.Lactis-VP2-PagN和L.Lactis-PagN-VP2的构建及免疫效果评价 | 第21-36页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 主要实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 主要实验 | 第21-22页 |
| 2.2 方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 引物的设计与合成 | 第22页 |
| 2.2.2 目的基因片段的扩增 | 第22-24页 |
| 2.2.3 目的基因PCR产物的纯化回收 | 第24页 |
| 2.2.4 NZ3900菌株感受态细胞的制备 | 第24页 |
| 2.2.5 pNZ8149质粒的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.6 pNZ8149质粒的酶切与回收 | 第25页 |
| 2.2.7 重组载体pNZ-11 和pNZ-13 构建 | 第25-26页 |
| 2.2.8 电转化重组质粒构建重组乳酸菌L.Lactis-11 和L.Lactis-13 | 第26-27页 |
| 2.2.9 重组菌株的筛选与鉴定 | 第27页 |
| 2.2.10 重组乳酸乳球菌的诱导 | 第27-28页 |
| 2.2.11 融合蛋白稳定性检测 | 第28页 |
| 2.2.12 融合蛋白体外黏附性检测 | 第28页 |
| 2.2.13 动物实验设计 | 第28-29页 |
| 2.2.14 血清抗体滴度的检测 | 第29页 |
| 2.2.15 血清中和抗体的检测 | 第29-30页 |
| 2.2.16 黏膜s IgA抗体滴度的检测 | 第30页 |
| 2.2.17 攻毒保护率 | 第30页 |
| 2.2.18 统计分析 | 第30页 |
| 2.3 结果 | 第30-34页 |
| 2.3.1 目的基因片段的扩增 | 第30-31页 |
| 2.3.2 重组菌株的筛选与鉴定 | 第31页 |
| 2.3.3 重组菌株的诱导表达 | 第31-32页 |
| 2.3.4 融合蛋白的稳定性检测 | 第32页 |
| 2.3.5 融合蛋白的体外黏附能力的检测 | 第32-33页 |
| 2.3.6 血清ELISA抗体和中和抗体滴度的检测结果 | 第33页 |
| 2.3.7 黏膜s IgA抗体滴度的检测结果 | 第33页 |
| 2.3.8 攻毒保护率 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 L.Lactis-VP2-Omp的构建及免疫效果的评价 | 第36-51页 |
| 3.1 材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 主要实验材料 | 第36页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第36页 |
| 3.1.3 主要实验试剂 | 第36-37页 |
| 3.2 方法 | 第37-43页 |
| 3.2.1 引物的设计与合成 | 第37页 |
| 3.2.2 目的片段的扩增 | 第37-38页 |
| 3.2.3 pNZ8149质粒的线性化PCR扩增 | 第38-40页 |
| 3.2.4 重组质粒载体pNZ-vo的构建 | 第40页 |
| 3.2.5 电转化重组质粒构建重组乳酸乳球菌L.Lactis-VO | 第40页 |
| 3.2.6 重组乳酸乳球菌L.Lactis-VO的筛选与鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2.7 重组乳酸乳球菌L.Lactis-VO的诱导表达 | 第41页 |
| 3.2.8 融合蛋白表达含量的测定 | 第41页 |
| 3.2.9 融合蛋白稳定性的测定 | 第41-42页 |
| 3.2.10 动物实验设计 | 第42页 |
| 3.2.11 血清抗体滴度的检测 | 第42页 |
| 3.2.12 血清中和抗体滴度的检测 | 第42-43页 |
| 3.2.13 黏膜s IgA抗体滴度的检测 | 第43页 |
| 3.2.14 囊体比和法氏囊指数的统计 | 第43页 |
| 3.2.15 统计分析 | 第43页 |
| 3.3 结果 | 第43-49页 |
| 3.3.1 目的基因和线性化pNZ8149质粒的扩增 | 第43-44页 |
| 3.3.2 重组乳酸乳球菌L.Lactis-VO的筛选与鉴定 | 第44页 |
| 3.3.3 重组乳酸乳球菌L.Lactis-VO的诱导表达 | 第44页 |
| 3.3.4 融合蛋白表达含量的检测 | 第44-45页 |
| 3.3.5 融合蛋白稳定性检测 | 第45页 |
| 3.3.6 血清ELISA抗体滴度检测 | 第45-46页 |
| 3.3.7 血清中和抗体滴度检测 | 第46-47页 |
| 3.3.8 黏膜s IgA抗体滴度检测 | 第47-48页 |
| 3.3.9 攻毒保护率 | 第48页 |
| 3.3.10 囊体比和法氏囊指数统计 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60页 |
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