摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第12-19页 |
1.1 茅苍术简介 | 第12-13页 |
1.1.1 生物学特性及资源分布 | 第12页 |
1.1.2 苍术药材活性成分及药用价值 | 第12-13页 |
1.1.2.1 挥发油主要成分分析 | 第12-13页 |
1.1.2.2 苍术药材的主要功效 | 第13页 |
1.2 植物内生真菌研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 进化和分布 | 第13-14页 |
1.2.2 内生真菌与植物相互作用 | 第14页 |
1.2.3 内生真菌与宿主植株建立拮抗平衡共生关系的研究 | 第14-15页 |
1.3 内生真菌影响宿主植株合成积累次级代谢产物的研究 | 第15-19页 |
1.3.1 内生真菌对宿主植株生态适应性的影响 | 第15-16页 |
1.3.2 多种信号分子介导内生菌侵染诱发宿主积累活性代谢产物 | 第16-17页 |
1.3.2.1 NO | 第16-17页 |
1.3.2.2 SA | 第17页 |
1.3.2.3 H202 | 第17页 |
1.3.3 开发与利用内生真菌对人工种植中药材品质的影响 | 第17-19页 |
第2章 茅苍术挥发油对三种内生真菌及七种外源真菌的抑菌活性 | 第19-28页 |
2.1 材料与试剂 | 第19-20页 |
2.2 研究方法 | 第20-21页 |
2.2.1 挥发油的提取 | 第20页 |
2.2.2 菌种活化及菌悬液的制备 | 第20页 |
2.2.3 含菌平板的制备 | 第20页 |
2.2.4 挥发油抑菌活性测定 | 第20页 |
2.2.5 最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)的测定 | 第20-21页 |
2.2.6 挥发油对内生真菌菌丝形态的影响试验 | 第21页 |
2.2.7 内生真菌对挥发油的分解代谢及挥发油主要成分含量的测定 | 第21页 |
2.2.8 气相色谱条件 | 第21页 |
2.2.9 统计分析 | 第21页 |
2.3 结果 | 第21-27页 |
2.3.1 茅苍术挥发油对各供试菌的抑菌效果 | 第22-23页 |
2.3.2 茅苍术挥发油对各供试菌种的最低抑菌浓度(MIC) | 第23-24页 |
2.3.3 茅苍术挥发油对3种内生真菌菌丝形态的影响 | 第24-26页 |
2.3.4 内生真菌对茅苍术挥发油主要成分的影响 | 第26-27页 |
2.4 讨论 | 第27-28页 |
第3章 内生真菌AL12及其诱导子对茅苍术组培苗防御代谢反应的影响 | 第28-41页 |
3.1 材料与方法 | 第29-31页 |
3.1.1 无菌苗的建立及分化培养 | 第29页 |
3.1.2 内生真菌的培养及诱导子的制备 | 第29页 |
3.1.3 内生真菌AL12接种及外源诱导子施加 | 第29页 |
3.1.4 内生真菌AL12侵染宿主植株的验证 | 第29-30页 |
3.1.5 酶活性测定 | 第30-31页 |
3.1.5.1 PAL酶活性测定 | 第30页 |
3.1.5.2 POD酶活性测定 | 第30页 |
3.1.5.3 PPO酶活性测定 | 第30页 |
3.1.5.4 几丁质酶活性测定 | 第30页 |
3.1.5.5 β-1,3葡聚糖酶活性测定 | 第30-31页 |
3.1.6 可溶性蛋白含量测定 | 第31页 |
3.1.7 茅苍术组培苗光合特性的测定 | 第31页 |
3.1.8 茅苍术植株挥发油提取及GC分析 | 第31页 |
3.1.9 统计分析 | 第31页 |
3.2 结果 | 第31-38页 |
3.2.1 接种内生真菌及施加外源诱导子对茅苍术组培苗生长态势的影响 | 第31-32页 |
3.2.2 内生真菌AL12侵染宿主后的定殖生长模式及重分离试验 | 第32页 |
3.2.3 接种内生真菌及施加外源诱导子对茅苍术组培苗防御相关酶系PAL、PPO及POD酶活性的影响 | 第32-34页 |
3.2.4 茅苍术组培苗中防御水解酶系的变化情况 | 第34-36页 |
3.2.5 接种内生真菌及施加外源诱导子对茅苍术组培苗光合特性的影响 | 第36-37页 |
3.2.6 接种内生真菌及施加外源诱导子对茅苍术组培苗积累挥发油的影响 | 第37-38页 |
3.3 讨论 | 第38-41页 |
3.3.1 接种内生真菌及外源诱导子处理对苍术组培苗生长态势的影响 | 第38-39页 |
3.3.2 真菌侵染及外源诱导子处理对苍术组培苗防御反应的影响 | 第39-40页 |
3.3.3 接种内生真菌及外源诱导子处理对宿主植株积累次级代谢产物的影响 | 第40-41页 |
第4章 NO、SA和H_2O_2介导内生真菌促进茅苍术组培苗中挥发油的积累 | 第41-51页 |
4.1 材料和方法 | 第41-43页 |
4.1.1 植物材料及其分化培养 | 第41-42页 |
4.1.2 内生真菌培养及其植体外接种 | 第42页 |
4.1.3 植株组织内源性NO和H_2O_2含量的测定 | 第42页 |
4.1.4 植株组织内源性SA的提取及HPLC测定 | 第42页 |
4.1.4.1 SA的提取 | 第42页 |
4.1.4.2 SA含量的测定 | 第42页 |
4.1.5 外源信号分子NO,SA,H_2O_2及其合成抑制剂的添加 | 第42-43页 |
4.1.6 苍术组培苗挥发油的提取及气相色谱(GC)分析 | 第43页 |
4.1.7 统计分析 | 第43页 |
4.2 结果 | 第43-48页 |
4.2.1 内生真菌侵染诱发植体内源性NO、SA及H_2O_2迸发 | 第43-44页 |
4.2.2 内生真菌侵染激发三种潜在的信号传导途径 | 第44-47页 |
4.2.3 NO、H_2O_2和SA介导内生真菌诱发茅苍术组培苗挥发油积累 | 第47-48页 |
4.3 讨论 | 第48-51页 |
全文小结与展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-64页 |
附录A:硕士在读期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
附录B:硕士在读期间所获荣誉 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |