摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-20页 |
1.1 研究背景 | 第11-19页 |
1.1.1 稻米品质改良的研究进展 | 第11-15页 |
1.1.2 淀粉合成途径关键基因概述 | 第15-18页 |
1.1.3 基因编辑技术 | 第18-19页 |
1.2 立题依据及研究内容 | 第19-20页 |
1.2.1 立题依据 | 第19页 |
1.2.2 研究内容 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-34页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 工程菌株 | 第20页 |
2.1.3 实验试剂 | 第20-21页 |
2.2 实验仪器 | 第21页 |
2.3 主要缓冲液和培养基 | 第21-22页 |
2.4 实验方法 | 第22-34页 |
2.4.1 水稻CRISPR-Cas9定向修饰骨架载体 | 第22页 |
2.4.2 水稻CRISPR-Cas9单基因定向敲除载体构建 | 第22-29页 |
2.4.3 根癌农杆菌介导的水稻稳定转化 | 第29-30页 |
2.4.4 水稻再生植株转基因阳性鉴定 | 第30-31页 |
2.4.5 水稻基因组目标位点定向修饰突变体鉴定 | 第31-33页 |
2.4.6 转基因突变植株T_1种子性状分析 | 第33页 |
2.4.7 T_1代植株突变鉴定与非转基因筛选 | 第33-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-55页 |
3.1 水稻支链淀粉合成途径基因CRISPR-Cas9 定向突变表达载体构建 | 第34-36页 |
3.2 转基因水稻再生植株的获得及转基因阳性植株鉴定 | 第36-38页 |
3.3 水稻支链淀粉合成途径基因定向修饰突变体材料鉴定 | 第38-45页 |
3.3.1 目标基因定向突变体T_0植株大片段删除筛选 | 第38-40页 |
3.3.2 目标基因定向突变体T_0植株单位点突变鉴定 | 第40-42页 |
3.3.3 目标基因定向突变体T_1籽粒性状分析 | 第42-45页 |
3.4 水稻支链淀粉合成途径基因定向突变体T_1植株突变鉴定 | 第45-55页 |
3.4.1 OsSBEI基因定向突变体T_1植株突变体鉴定 | 第45-46页 |
3.4.2 OsSBEIIa基因定向突变体T_1植株突变体鉴定 | 第46-48页 |
3.4.3 OsSSI基因定向突变体T_1植株突变体鉴定 | 第48-50页 |
3.4.4 OsPUL基因定向突变体T_1植株突变体鉴定 | 第50-53页 |
3.4.5 T_1代突变体植株不含载体的筛选 | 第53-55页 |
第四章 讨论 | 第55-58页 |
第五章 结论 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
攻硕期间取得的研究成果 | 第67-68页 |
附录 | 第68-76页 |
附录1 引物序列 | 第68-70页 |
附录2 支链淀粉合成途径部分基因T0植株突变鉴定图 | 第70-76页 |