摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-13页 |
第一章 绪论 | 第13-31页 |
·立题背景和意义 | 第13-14页 |
·脂肪酶结构和功能研究进展 | 第14-18页 |
·脂肪酶简介 | 第14页 |
·脂肪酶的底物特异性 | 第14-15页 |
·脂肪酶的结构 | 第15-16页 |
·脂肪酶结构和专一性的关系 | 第16-18页 |
·底物结合部位 | 第17页 |
·盖子 | 第17-18页 |
·壳聚糖的酶法降解研究进展 | 第18-21页 |
·壳聚糖的专一性酶法降解研究进展 | 第18-19页 |
·壳聚糖的非专一性酶法降解研究进展 | 第19-21页 |
·纤维素酶 | 第19-20页 |
·果胶酶 | 第20页 |
·蛋白酶 | 第20页 |
·脂肪酶 | 第20-21页 |
·非专一性酶降解壳聚糖机理研究进展 | 第21-22页 |
·课题的研究目的和内容 | 第22-24页 |
·课题研究目的 | 第22-23页 |
·课题的研究内容 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-31页 |
第二章 脂肪酶降解壳聚糖的特性研究 | 第31-46页 |
·前言 | 第31页 |
·材料与试剂 | 第31-32页 |
·实验材料 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-34页 |
·壳聚糖脱乙酰度(DD)的测定 | 第32页 |
·壳聚糖酶粘均分子量的测定 | 第32页 |
·pH 值对各种脂肪酶水解壳聚糖的的活力影响 | 第32-33页 |
·温度对各种脂肪酶水解壳聚糖的活力的影响 | 第33页 |
·pH 值对脂肪酶水解不同DD 壳聚糖活力的影响 | 第33页 |
·温度对脂肪酶水解不同DD 壳聚糖活力的影响 | 第33页 |
·脂肪酶与不同DD 值壳聚糖的结合能力研究 | 第33页 |
·脂肪酶降解壳聚糖产物研究 | 第33-34页 |
·水解产物的红外光谱分析 | 第33页 |
·水解产物的薄层层析(TLC) 分析 | 第33-34页 |
·壳聚糖酶活力的测定 | 第34页 |
·结果与讨论 | 第34-43页 |
·脂肪酶的壳聚糖酶活力 | 第34-36页 |
·pH 值对各种脂肪酶水解壳聚糖活力的影响 | 第34-35页 |
·温度对各种脂肪酶水解壳聚糖的活力的影响 | 第35-36页 |
·pH 值对脂肪酶降解不同DD 值壳聚糖活力的影响 | 第36-37页 |
·温度对脂肪酶降解不同DD 值壳聚糖活力的影响 | 第37-38页 |
·脂肪酶与不同DD 值壳聚糖的结合能力 | 第38-39页 |
·壳聚糖水解过程中还原糖含量的变化 | 第39-40页 |
·壳聚糖水解过程中的粘度变化 | 第40-41页 |
·脂肪酶水解壳聚糖产物分析 | 第41-43页 |
·壳聚糖水解产物的红外光谱分析 | 第41-42页 |
·壳聚糖水解产物的TLC 分析 | 第42-43页 |
·本章小结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
第三章 脂肪酶中具有壳聚糖酶活成分的分离纯化和纯度鉴定 | 第46-59页 |
·前言 | 第46页 |
·材料与试剂 | 第46-47页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-50页 |
·脂肪酶中壳聚糖降解活力组分的分离纯化 | 第47-48页 |
·提取缓冲液的选择 | 第47页 |
·超滤 | 第47页 |
·阴离子交换层析 | 第47页 |
·疏水相互作用层析 | 第47-48页 |
·凝胶过滤层析 | 第48页 |
·纯化酶的纯度鉴定 | 第48-49页 |
·纯化酶的分子量测定 | 第49页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第49页 |
·非还原SDS-PAGE | 第49页 |
·壳聚糖酶活力测定方法 | 第49页 |
·脂肪酶活力测定方法 | 第49-50页 |
·蛋白质含量测定 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-58页 |
·提取缓冲液的选择 | 第50-52页 |
·超滤 | 第52-53页 |
·脂肪酶中具有壳聚糖降解活力组分的纯化 | 第53-55页 |
·阴离子交换层析 | 第53页 |
·疏水相互作用层析 | 第53-54页 |
·凝胶过滤层析 | 第54-55页 |
·HPLC 鉴定纯化酶的纯度 | 第55-56页 |
·纯化酶的纯度鉴定和相对分子质量的测定 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-59页 |
第四章 脂肪酶中具有壳聚糖降解活力酶组分的结构与活性部位研究 | 第59-74页 |
·前言 | 第59页 |
·材料与试剂 | 第59-60页 |
·实验材料 | 第59页 |
·主要试剂 | 第59-60页 |
·实验方法 | 第60-62页 |
·纯化酶的氨基酸组成分析 | 第60页 |
·纯化酶N-末端氨基酸列的测定 | 第60页 |
·组氨酸的修饰 | 第60页 |
·DEPC 浓度的测定 | 第60页 |
·DEPC 修饰 | 第60页 |
·羟胺对修饰酶活力的恢复作用 | 第60页 |
·色氨酸的修饰 | 第60-61页 |
·甲硫氨酸的修饰 | 第61页 |
·羧基氨基酸的修饰 | 第61页 |
·羟基的修饰 | 第61页 |
·精氨酸的修饰 | 第61-62页 |
·酪氨酸的修饰 | 第62页 |
·巯基的修饰 | 第62页 |
·二硫键的修饰 | 第62页 |
·壳聚糖酶活测定 | 第62页 |
·蛋白质含量测定 | 第62页 |
·结果与讨论 | 第62-71页 |
·氨基酸组成分析 | 第62-63页 |
·N-末端氨基酸序列测定 | 第63-64页 |
·组氨酸的化学修饰 | 第64-67页 |
·色氨酸的化学修饰 | 第67-68页 |
·甲硫氨酸的化学修饰 | 第68-69页 |
·羧基的化学修饰 | 第69页 |
·羟基、精氨酸、酪氨酸和二硫键的修饰 | 第69-70页 |
·巯基的修饰 | 第70-71页 |
·本章小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-74页 |
第五章 具有壳聚糖酶活力组分的酶学性质及作用模式研究 | 第74-92页 |
·前言 | 第74页 |
·材料与试剂 | 第74-75页 |
·实验材料 | 第74页 |
·主要试剂 | 第74-75页 |
·实验方法 | 第75-76页 |
·pH 值对纯化酶活性的影响 | 第75页 |
·pH 值对纯化酶稳定性的影响 | 第75页 |
·温度对纯化酶活力的影响 | 第75页 |
·温度对纯化酶稳定性的影响 | 第75页 |
·纯化酶水解壳聚糖动力学研究 | 第75-76页 |
·底物专一性测定 | 第76页 |
·金属离子对酶活力的影响 | 第76页 |
·纯化酶水解氨基葡萄糖低聚糖和乙酰氨基葡萄糖低聚糖 | 第76页 |
·TLC 法分析壳聚糖酶水解产物 | 第76页 |
·HPLC 法分析酶水解产物 | 第76页 |
·壳聚糖酶活力测定 | 第76页 |
·结果与讨论 | 第76-88页 |
·pH 值对酶活力的影响 | 第76-77页 |
·pH 值对酶稳定性的影响 | 第77-78页 |
·温度对酶活力的影响 | 第78-79页 |
·温度对酶稳定性的影响 | 第79页 |
·底物专一性测定 | 第79-80页 |
·纯化酶水解壳聚糖的动力学 | 第80页 |
·金属离子对酶活力的影响 | 第80-81页 |
·TLC 法分析纯化酶水解甲壳低聚糖产物 | 第81-83页 |
·HPLC 法分析纯化酶水解甲壳低聚糖产物 | 第83-85页 |
·TLC 法分析纯化酶水解乙酰甲壳低聚糖产物 | 第85-86页 |
·HPLC 法分析纯化酶水解乙酰甲壳低聚糖产物 | 第86-88页 |
·本章小结 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-92页 |
主要结论 | 第92-94页 |
论文创新点 | 第94-95页 |
附录 | 第95-103页 |
作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第103-104页 |
致谢 | 第104页 |