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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--来源于Alicyclobacillus sp.A4的GH1家族β-葡萄糖苷酶的克隆表达及葡萄糖耐受性分子改造
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来源于Alicyclobacillus sp.A4的GH1家族β-葡萄糖苷酶的克隆表达及葡萄糖耐受性分子改造
 
     论文目录
 
摘要第6-7页
abstract第7页
第一章 引言第14-23页
    1.1 纤维素及其酶解机制第14-15页
    1.2 β-葡萄糖苷酶第15-20页
        1.2.1 β-葡萄糖苷酶的应用第15-17页
        1.2.2 β-葡萄糖苷酶的分类第17-18页
        1.2.3 β-葡萄糖苷酶的理化性质第18-19页
        1.2.4 β-葡萄糖苷酶的催化机制第19-20页
    1.3 葡萄糖耐受性研究第20-22页
        1.3.1 β-葡萄糖苷酶的葡萄糖耐受性第20-21页
        1.3.2 β-葡萄糖苷酶葡萄糖耐受性研究进展第21-22页
    1.4 酶的分子改造第22页
    1.5 本研究的目的与意义第22-23页
第二章 Alicyclobacillus sp.A4 β-葡萄糖苷酶基因的克隆表达第23-32页
    2.1 实验材料第23-24页
        2.1.1 菌株、质粒及引物第23页
        2.1.2 实验仪器、商业酶、试剂盒及其它生化试剂第23页
        2.1.3 培养基及溶剂配制第23-24页
    2.2 实验方法第24-28页
        2.2.1 Alicyclobacillus sp.A4基因组的提取第24页
        2.2.2 β-葡萄糖苷酶基因Asbg1的克隆第24-26页
        2.2.3 原核表达菌株Asbg1-pET30a(+)-BL21的构建第26-27页
        2.2.4 Asbg1基因的原核表达及蛋白纯化第27-28页
    2.3 结果与分析第28-31页
        2.3.1 β-葡萄糖苷酶序列的分析第28-29页
        2.3.2 重组表达质粒Asbg1-pET30a(+)的构建第29-30页
        2.3.3 重组 β-葡萄糖苷酶AsBG1的异源表达及纯化第30-31页
    2.4 讨论第31页
    本章小结第31-32页
第三章 GH1家族 β-葡萄糖苷酶AsBG1性质的测定第32-43页
    3.1 实验材料第32-33页
        3.1.1 研究对象第32页
        3.1.2 实验仪器、商业酶、试剂盒及其它生化试剂第32页
        3.1.3 培养基及溶剂配制第32-33页
    3.2 实验方法第33-35页
        3.2.1 不同底物时的酶活测定方法第33页
        3.2.2 标准曲线的绘制第33-34页
        3.2.3 AsBG1的最适反应条件第34页
        3.2.4 不同金属离子及化学试剂对酶活的影响第34-35页
        3.2.5 AsBG1底物特异性和动力学参数的测定第35页
        3.2.6 AsBG1的单糖耐受性第35页
    3.3 实验结果第35-41页
        3.3.1 标准曲线的绘制第35-37页
        3.3.2 β-葡萄糖苷酶AsBG1的最适反应条件第37-38页
        3.3.3 金属离子及化学试剂对AsBG1酶活性的影响第38-39页
        3.3.4 底物特异性及动力学参数第39-40页
        3.3.5 AsBG1的单糖耐受性第40-41页
    3.4 讨论第41-42页
    本章小结第42-43页
第四章 葡萄糖耐受性分子改造及降解大豆异黄酮应用第43-56页
    4.1 实验材料第43页
        4.1.1 菌株、质粒及引物第43页
        4.1.2 实验仪器、商业酶、试剂盒及其它生化试剂第43页
        4.1.3 培养基及溶剂配制第43页
    4.2 实验方法第43-46页
        4.2.1 AsBG1的耐受性测定第43页
        4.2.2 同源模建第43-44页
        4.2.3 分子对接及结构分析第44页
        4.2.4 多序列比对第44页
        4.2.5 突变体的构建、表达及蛋白纯化第44-46页
        4.2.6 AsBG1及其突变体葡萄糖耐受性及酶学性质测定第46页
    4.3 实验结果第46-54页
        4.3.1 AsBG1的耐受性测定第46-47页
        4.3.2 同源建模第47-49页
        4.3.3 分子对接及结构分析第49-50页
        4.3.4 多序列比对第50-51页
        4.3.5 突变体的构建、表达及蛋白纯化第51页
        4.3.6 AsBG1突变体的性质测定第51-52页
        4.3.7 H315饱和突变体的性质测定第52-53页
        4.3.8 突变体水解大豆苷时的葡萄糖耐受性第53-54页
    4.4 讨论第54-55页
    本章小结第55-56页
第五章 全文结论第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

 
 
论文编号BS3125916,这篇论文共64
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