| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.动物肠道菌群的概述 | 第11-12页 |
| ·肠道菌群简介 | 第11页 |
| ·肠道菌群分类 | 第11页 |
| ·肠道菌群在肠道中分布 | 第11-12页 |
| ·肠道菌群的作用 | 第12页 |
| 2.乳杆菌群的概述 | 第12-15页 |
| ·乳杆菌群的功能 | 第13-14页 |
| ·营养作用及生物活性 | 第13页 |
| ·治疗保健作用 | 第13页 |
| ·影响机体免疫力 | 第13-14页 |
| ·乳杆菌群作用机理 | 第14-15页 |
| ·肠道定植抗力与生态保护 | 第14-15页 |
| ·产生活性物质 | 第15页 |
| 3.研究乳杆菌菌群的方法 | 第15-20页 |
| ·经典的传统方法 | 第15-16页 |
| ·研究乳杆菌菌群的新方法 | 第16-19页 |
| ·以16S rDNA为分析对象的分子标记方法 | 第16-18页 |
| ·16S rRNA基因的限制性片段长度多态性(RFLP) | 第17页 |
| ·随机扩增多态性技术 | 第17页 |
| ·16S rDNA克隆文库法 | 第17-18页 |
| ·荧光原位杂交技术 | 第18页 |
| ·肠杆菌基因间的重复共有序列(ERIC-PCR) | 第18-19页 |
| ·变性梯度凝胶电泳 | 第19-20页 |
| 4.课题研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 PCR-DGGE技术分析乳杆菌多样性方法的建立 | 第21-35页 |
| 1.材料 | 第21-22页 |
| ·菌种 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·试验仪器和主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.方法 | 第22-28页 |
| ·菌种的活化 | 第22页 |
| ·纯菌DNA模板的提取 | 第22-23页 |
| ·DNA试剂配制 | 第22页 |
| ·DNA提取 | 第22-23页 |
| ·引物的设计 | 第23页 |
| ·引物特异性试验 | 第23-25页 |
| ·引物特异性比对 | 第23-25页 |
| ·PCR验证 | 第25页 |
| ·16S rDNA序列的测定 | 第25页 |
| ·乳杆菌16S rDNA巢式PCR反应条件优化 | 第25-26页 |
| ·DGGE条件优化 | 第26-28页 |
| ·DGGE变性胶配制 | 第26页 |
| ·DGGE电泳胶的灌制 | 第26-27页 |
| ·电泳 | 第27页 |
| ·染色 | 第27-28页 |
| 3.结果与分析 | 第28-32页 |
| ·引物特异性比对结果 | 第28-29页 |
| ·PCR验证结果 | 第29-31页 |
| ·纯菌落DNA提取结果 | 第29-30页 |
| ·引物特异性PCR结果 | 第30页 |
| ·16S rDNA序列的测定 | 第30-31页 |
| ·巢式PCR的优化 | 第31-32页 |
| ·第一轮PCR扩增优化 | 第31页 |
| ·第二轮PCR扩增温度优化 | 第31-32页 |
| ·DGGE优化结果 | 第32页 |
| 4.讨论 | 第32-35页 |
| ·引物特异性比对结果 | 第32-33页 |
| ·PCR验证性试验 | 第33页 |
| ·该方法的在动物肠道内的应用 | 第33页 |
| ·PCR的优化 | 第33页 |
| ·DGGE图谱优化 | 第33-35页 |
| 第三章 应用巢式PCR-DGGE技术分析治疗犬与攻毒犬乳杆菌多样性 | 第35-47页 |
| 1.材料 | 第35页 |
| 2.试验方法 | 第35-37页 |
| ·治疗犬与攻毒犬模型的建立 | 第35-36页 |
| ·试验动物的准备与分组 | 第35-36页 |
| ·试验动物的攻毒与治疗 | 第36页 |
| ·粪样DNA模板的提取 | 第36-37页 |
| ·样品PCR产物的准备 | 第37页 |
| 3.结果与分析 | 第37-45页 |
| ·犬粪样总DNA提取结果 | 第37-38页 |
| ·样品巢式PCR结果 | 第38页 |
| ·攻毒犬与治疗犬模型的建立结果 | 第38-39页 |
| ·各组样品PCR-DGGE图谱分析 | 第39-45页 |
| ·试验0d各组犬肠道乳杆菌菌群结构及多样性结果与分析 | 第39-40页 |
| ·试验3d各组犬肠道乳杆菌菌群结构及条带多样性结果与分析 | 第40-41页 |
| ·试验6d各组犬肠道乳杆菌菌群结构及多样性结果与分析 | 第41-43页 |
| ·试验9d各组犬肠道乳杆菌菌群结构及多样性结果与分析 | 第43-44页 |
| ·试验9d各组犬肠道图谱多样性性指数结果 | 第44-45页 |
| 4.讨论 | 第45-46页 |
| ·总DNA的提取 | 第45页 |
| ·样品DGGE图谱分析 | 第45-46页 |
| 5.全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
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