| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-29页 |
| 1.1 宫颈癌和人乳头瘤病毒 | 第13-20页 |
| 1.1.1 E6和E7蛋白与宫颈癌的发生 | 第15-16页 |
| 1.1.2 HPV的检测 | 第16-20页 |
| 1.1.2.1 细胞学检测 | 第16-17页 |
| 1.1.2.2 HPV DNA检测 | 第17-19页 |
| 1.1.2.3 HPV mRNA的检测 | 第19-20页 |
| 1.2 依赖核酸序列扩增技术 | 第20-22页 |
| 1.2.1 NASBA概述 | 第20页 |
| 1.2.2 NASBA的基本原理 | 第20-21页 |
| 1.2.3 NASBA的应用 | 第21-22页 |
| 1.3 p53和癌症 | 第22-25页 |
| 1.4 滚环扩增技术 | 第25-27页 |
| 1.4.1 RCA概述 | 第26页 |
| 1.4.2 RCA的基本原理 | 第26页 |
| 1.4.3 RCA的应用 | 第26-27页 |
| 1.5 本论文的立题内容和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 比较三种不同的核酸扩增技术联合芯片毛细管电泳用于HPV16E6/E7 mRNA的检测 | 第29-50页 |
| 2.1 前言 | 第29页 |
| 2.2 实验部分 | 第29-36页 |
| 2.2.1 宫颈癌细胞的选择和培养 | 第29-30页 |
| 2.2.2 宫颈癌细胞总RNA提取 | 第30-31页 |
| 2.2.3 依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)扩增HPV16 E6/E7 mRNA | 第31-33页 |
| 2.2.4 RNA反转录实验 | 第33页 |
| 2.2.5 RT-PCR用于HPV16型E6XE7相关mRNA反转录和扩增 | 第33-35页 |
| 2.2.6 实验所需试剂及仪器 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第36-49页 |
| 2.3.1 芯片毛细管电泳(MCE)分离缓冲液的配制 | 第37-39页 |
| 2.3.2 总RNA提取质量分析 | 第39-40页 |
| 2.3.3 依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)条件优化 | 第40-42页 |
| 2.3.4 依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)联合芯片毛细管电泳(MCE)检测E6/E7 mRNA特异性和灵敏度 | 第42-44页 |
| 2.3.5 两步法RT-PCR联合芯片毛细管电泳(MCE)检测E6/E7 mRNA | 第44-46页 |
| 2.3.6 一步法RT-PCR联合芯片毛细管电泳(MCE)检测E6/E7 mRNA | 第46-47页 |
| 2.3.7 RT-PCR联合芯片毛细管电泳(MCE)检测HPV18型E6/E7 mRNA | 第47-49页 |
| 2.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 第三章 基于滚换扩增技术和血晶素/G-四联体体系双官能团比色检测P53蛋白 | 第50-59页 |
| 3.1 前言 | 第50-51页 |
| 3.2 实验部分 | 第51-54页 |
| 3.2.1 芯片制备和修饰 | 第51-53页 |
| 3.2.2 probe-primer-circle-template制备 | 第53页 |
| 3.2.3 滚环扩增(RCA)和p53蛋白检测 | 第53-54页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第54-58页 |
| 3.3.1 probe-primer-circle-template制备 | 第54页 |
| 3.3.2 滚环扩增(RCA)和P53蛋白检测 | 第54-58页 |
| 3.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 第四章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第70-71页 |
| 作者与导师简介 | 第71-72页 |
| 附件 | 第72-73页 |
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