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miR-155-5p调控骨髓间质干细胞向胃癌间质干细胞转分化的作用及机制研究
 
     论文目录
 
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 绪论第16-25页
    1.1 MSC与肿瘤微环境第16-19页
        1.1.1 肿瘤微环境的组成第16页
        1.1.2 MSC参与肿瘤微环境的形成第16-18页
        1.1.3 MSC与癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast, CAF)第18-19页
    1.2 miRNA与肿瘤微环境第19-21页
        1.2.1 miRNA与肿瘤微环境第19-20页
        1.2.2 miR1555p与肿瘤微环境第20-21页
    1.3 研究目的、方法、技术路线及意义第21-25页
        1.3.1 研究目的第21页
        1.3.2 研究方法第21页
        1.3.3 实验方案第21-23页
        1.3.4 预期结果及研究意义第23-25页
第二章 GC-MSC与BM-MSC表型和功能差异第25-37页
    2.1 材料第25-28页
        2.1.1 标本的采集第25页
        2.1.2 主要试剂第25-27页
        2.1.3 主要仪器及相关耗材第27页
        2.1.4 细胞株第27-28页
        2.1.5 实验动物第28页
    2.2 方法第28-33页
        2.2.1 BM-MSC的分离培养第28页
        2.2.2 GC-MSC与GCN-MSC的分离培养第28页
        2.2.3 MSC表面标记鉴定第28-29页
        2.2.4 成骨细胞诱导第29页
        2.2.5 成脂细胞诱导第29页
        2.2.6 细胞培养第29页
        2.2.7 MSC上清的制备第29-30页
        2.2.8 免疫荧光第30页
        2.2.9 mRNA的提取第30页
        2.2.10 mRNA逆转录第30-31页
        2.2.11 mRNA荧光实时定量PCR第31页
        2.2.12 克隆形成实验第31页
        2.2.13 transwell迁移实验第31-32页
        2.2.14 transwell侵袭实验第32页
        2.2.15 裸鼠皮下致瘤模型第32页
        2.2.16 统计学分析第32-33页
    2.3 结果第33-35页
        2.3.1 BM-MSC、GC-MSC与GCN-MSC的鉴定第33-34页
        2.3.2 BM-MSC与GC-MSC表型的差异第34页
        2.3.3 BM-MSC与GC-MSC功能的差异第34-35页
    2.4 讨论第35-37页
第三章 miR1555p的下调促进BM-MSC向GC-MSC转分化第37-45页
    3.1 材料第37页
        3.1.1 主要试剂第37页
    3.2 方法第37-40页
        3.2.1 寡核苷酸片段配置第38页
        3.2.2 细胞转染第38页
        3.2.3 miRNA的提取第38-39页
        3.2.4 miRNA逆转录第39页
        3.2.5 miRNA荧光实时定量PCR第39-40页
    3.3 结果第40-43页
        3.3.1 miR1555p在GC-MSC中表达下调第40页
        3.3.2 miR1555p的下调促进BM-MSC获得GC-MSC样表型第40-41页
        3.3.3 miR1555p的下调促进BM-MSC获得GC-MSC样功能第41-43页
    3.4 讨论第43-45页
第四章 miR1555p的下调靶向激活NF-κB p65促进BM-MSC向GC-MSC转分化第45-61页
    4.1 材料第45-46页
        4.1.1 主要试剂第45-46页
        4.1.2 主要仪器及相关耗材第46页
        4.1.3 细胞株第46页
    4.2 方法第46-51页
        4.2.1 靶基因预测第46页
        4.2.2 靶基因报告基因载体的构建第46-49页
        4.2.3 报告基因载体转染第49页
        4.2.4 启动子报告基因载体的构建与转染第49页
        4.2.5 报告基因检测第49页
        4.2.6 细胞蛋白提取第49-50页
        4.2.7 Western blot第50页
        4.2.8 si-RNA的转染第50页
        4.2.9 PDTC的配制第50-51页
        4.2.10 统计学分析第51页
    4.3 结果第51-59页
        4.3.1 miR1555p靶向调控NF-κB p65第51-52页
        4.3.2 si-NF-κB p65对BM-MSC转分化作用的影响第52-54页
        4.3.3 miR1555p的下调促进NF-κBp65的活化第54-55页
        4.3.4 PDTC对BM-MSC转分化作用的影响第55-56页
        4.3.5 miR1555p靶向调控IKBKE第56-57页
        4.3.6 si-IKBKE对BM-MSC转分化作用的影响第57-59页
    4.4 讨论第59-61页
第五章 GC-MSC表型和功能的维持依赖于NF-κB p65的持续活化第61-71页
    5.1 材料第61-62页
        5.1.1 主要试剂第61-62页
        5.1.2 主要仪器及相关耗材第62页
        5.1.3 细胞株第62页
    5.2 方法第62-63页
        5.2.1 免疫组织化学第62-63页
        5.2.2 si-RNA转染第63页
    5.3 结果第63-69页
        5.3.1 胃癌标本中IKBKE、NF-κB p65、phospho-NF-κB p65的表达第63-65页
        5.3.2 PDTC对GC-MSC的作用第65-67页
        5.3.3 NF-κB p65下游通路的活化对GC-MSC的作用第67-69页
    5.4 讨论第69-71页
第六章 结论和展望第71-73页
    6.1 结论第71页
    6.2 展望第71-73页
参考文献第73-80页
致谢第80-81页
攻读硕士学位期间发表的学术论文及参加会议第81页

 
 
论文编号BS2728270,这篇论文共81
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