目录 | 第1-7页 |
Contents | 第7-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
前言 | 第14-26页 |
1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其分子生物学研究 | 第14-22页 |
·对虾白斑综合症病毒的研究概况 | 第14-16页 |
·对虾白斑综合症病毒的发现及其命名 | 第14页 |
·对虾白斑综合症病毒的形态结构 | 第14-15页 |
·对虾白斑综合症病毒的感染宿主及替代宿主 | 第15-16页 |
·对虾白斑综合症病毒的分离纯化 | 第16页 |
·对虾白斑综合症病毒的检测技术简介 | 第16-17页 |
·对虾白斑综合症病毒的基因组学研究 | 第17-18页 |
·对虾白斑综合症病毒的蛋白质组学研究 | 第18-22页 |
2 蛋白质相互作用的检测方法 | 第22-24页 |
3 病毒的冷冻保存简介 | 第24-25页 |
4 本论文研究的内容、目的和意义 | 第25-26页 |
第一部分 WSSV 膜蛋白 VP26 与核衣壳蛋白 VP51 相互作用位点的鉴定 | 第26-67页 |
1 前言 | 第26页 |
2 材料与方法 | 第26-32页 |
·材料 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-32页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
·PCR 模板的碱变性 | 第27页 |
·目的基因片段 PCR | 第27-28页 |
·DNA 纯化 | 第28页 |
·酶切反应 | 第28-29页 |
·连接反应 | 第29页 |
·质粒转化 | 第29页 |
·质粒的小量提取 | 第29-30页 |
·目的蛋白的表达 | 第30页 |
·免疫共沉淀(Co-Ip) | 第30页 |
·SDS-PAGE | 第30-31页 |
·Western blotting 分析 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-64页 |
·VP26 突变体的构建 | 第32-33页 |
·VP51 突变体的构建 | 第33-34页 |
·初步鉴定 VP51 上与 VP26 相互作用的位点 | 第34-40页 |
·进一步鉴定 VP51(1-240)上与 VP26(135-204)相互作用的位点 | 第40-44页 |
·进一步鉴定 VP51(351-466)上与 VP26(135-204)相互作用的位点 | 第44-46页 |
·进一步鉴定 VP51(241-350)上与 VP26(135-204)相互作用的位点 | 第46-48页 |
·进一步鉴定 VP51(241-350)与 VP26(36-135)相互作用的位点 | 第48-51页 |
·鉴定 VP26 上与 VP51 相互作用的位点 | 第51-59页 |
·进一步鉴定 VP26 上与 VP51 上第 141 位至 180 位氨基酸相互作用的位点 | 第51-54页 |
·进一步鉴定 VP26(156-204)与 VP51 突变体的相互作用 | 第54-59页 |
·VP51 的蛋白二级结构预测 | 第59-63页 |
·VP51 蛋白的亲水性分析 | 第59-60页 |
·VP51 蛋白的二级结构预测 | 第60-63页 |
·分析 VP26 上与 VP51 发生相互作用位点的空间分布 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-67页 |
第二部分 低温保存 WSSV 病毒粒子方法的建立 | 第67-77页 |
1 前言 | 第67页 |
2 材料与方法 | 第67-70页 |
·材料 | 第67-68页 |
·方法 | 第68-70页 |
·完整病毒粒子的制备 | 第68页 |
·低温保存 WSSV 病毒粒子 | 第68页 |
·利用透射电镜观察病毒粒子 | 第68-69页 |
·冻存后病毒感染活力检测 | 第69页 |
·感染后螯虾肌肉组织总 DNA 的提取 | 第69页 |
·利用实时荧光定量 PCR 检测病毒增殖速度 | 第69-70页 |
3 结果 | 第70-75页 |
·冻存后病毒完整性的观察 | 第70-73页 |
·冻存后病毒感染力的检测 | 第73-75页 |
4 讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
致谢 | 第85页 |