第一部分 色氨酸类似物标记法研究蛋白质的结构和功能 | 第1-25页 |
引言 | 第10-13页 |
1. 色氨酸类似物及其特殊的光谱学性质 | 第10-12页 |
2. PGBD蛋白的研究进展 | 第12-13页 |
第一章 色氨酸类似物标记法研究PGBD与IgG片段的相互作用 | 第13-25页 |
1.1 实验方法 | 第13-17页 |
1.2 结果及讨论 | 第17-22页 |
1.2.1 PGBD的基因和蛋白序列 | 第17页 |
1.2.2 PGBD蛋白在M9培养基中的标记和纯化 | 第17-18页 |
1.2.3 标记的PGBD蛋白的光谱学性质 | 第18-20页 |
1.2.4 标记的PGBD蛋白与hFc结合的荧光变化 | 第20-21页 |
1.2.5 利用荧光强度的变化测定解离常数 | 第21页 |
1.2.6 利用荧光各向异性的变化测定解离常数 | 第21-22页 |
1.3 小结 | 第22-23页 |
1.4 参考文献 | 第23-25页 |
第二部分 大肠杆菌硫氧化还原蛋白DsbA和DsbE的氧化还原性质、构象变化和功能关系 | 第25-77页 |
引言 | 第25-29页 |
1. 大肠杆菌周质空间的硫氧化还原蛋白和Thioredoxin结构域 | 第25-26页 |
2. 大肠杆菌周质空间内的硫氧化还原反应 | 第26-27页 |
3. DsbA蛋白的研究进展 | 第27页 |
4. DsbE蛋白和细胞色素c成熟的关系 | 第27-29页 |
第二章 DsbA蛋白的氧化还原性质、构象变化和功能 | 第29-42页 |
2.1 实验方法 | 第29-32页 |
2.2 结果及讨论 | 第32-41页 |
2.2.1 DsbA的基因和蛋白序列 | 第32页 |
2.2.2 DsbA蛋白的表达和纯化 | 第32-33页 |
2.2.3 在M9中的标记表达DsbA蛋白及其纯化 | 第33页 |
2.2.4 天然型DsbA蛋白光谱学性质 | 第33-34页 |
2.2.5 DsbA蛋白的NBS修饰 | 第34-35页 |
2.2.6 DsbA蛋白及W126A突变体氧化态、还原态稳定性差异 | 第35页 |
2.2.7 DsbA蛋白的酸稳定性研究 | 第35-36页 |
2.2.8 DsbA蛋白及W126A突变体的体外活性 | 第36-37页 |
2.2.9 DsbA蛋白色氨酸突变体的光谱学性质 | 第37-38页 |
2.2.10 DsbA蛋白及突变体在色氨酸类似物标记前后的性质 | 第38-40页 |
2.2.11 应用标记研究DsbA蛋白的构象变化和体外功能 | 第40-41页 |
2.3 小结 | 第41-42页 |
第三章 DsbE蛋白的氧化还原性质,构象变化和功能 | 第42-67页 |
3.1 实验方法 | 第42-48页 |
3.2 结果及讨论 | 第48-64页 |
3.2.1 DsbE蛋白的膜结合性质 | 第48-49页 |
3.2.2 DsbEL-蛋白的氧化还原性质和构象变化 | 第49-59页 |
3.2.2.1 DsbEL-蛋白的表达、纯化和基本生化性质 | 第49-53页 |
3.2.2.2 DsbEL-蛋白的氧化还原性质和活性 | 第53-57页 |
3.2.2.3 DsbEL-蛋白的氧化还原构象变化 | 第57-59页 |
3.2.2.4 小结 | 第59页 |
3.2.3 57DsbE蛋白氧化还原性质和构象变化 | 第59-64页 |
3.2.3.1 57DsbE蛋白的表达、纯化和基本生化性质 | 第59-61页 |
3.2.3.2 57DsbE蛋白的氧化还原性质和结构特点 | 第61-63页 |
3.2.3.3 小结 | 第63-64页 |
3.3 参考文献 | 第64-67页 |
第四章 FBP11的FF结构域的结构和功能 | 第67-77页 |
引言 | 第67-68页 |
1. 现代生物学研究中的蛋白质结构域 | 第67页 |
2. FF结构域的研究进展 | 第67-68页 |
4.1 实验方法 | 第68-70页 |
4.2 结果及讨论 | 第70-74页 |
4.2.1 FF结构域的表达、纯化和15N标记 | 第70-72页 |
4.2.1.1 FF结构域的基因和蛋白序列 | 第70-71页 |
4.2.1.2 FF结构域的表达和纯化 | 第71页 |
4.2.1.3 FF结构域的15N标记 | 第71-72页 |
4.2.2 FF结构域和磷酸化丝氨酸的相互作用 | 第72-74页 |
4.2.2.1 FF结构域的生化性质 | 第72-73页 |
4.2.2.2 FF结构域与磷酰丝氨酸的相互作用 | 第73-74页 |
4.3 小结 | 第74-76页 |
4.4 参考文献 | 第76-77页 |
发表文章目录 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |