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河南PCV2株的分离鉴定及增殖敏感PK15细胞系的克隆与筛选 |
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| 论文目录 |
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| 致谢 | 第1-9页 | | 摘要 | 第9-10页 | | 文献综述 | 第10-21页 | | 1 病原学 | 第10-11页 | | 2 流行病学 | 第11页 | | ·地理分布 | 第11页 | | ·易感物种 | 第11页 | | ·PCV2感染途径 | 第11页 | | ·排放途径 | 第11页 | | 3 发病机理 | 第11-13页 | | 4 临床症状及病变 | 第13-15页 | | ·断奶仔猪多系统衰弱综合征(PMWS) | 第13页 | | ·猪皮炎和肾病综合征(PDNS) | 第13-14页 | | ·PCV2相关的肺炎 | 第14页 | | ·PCV2相关的繁殖疾病 | 第14页 | | ·PCV2相关的肠炎 | 第14-15页 | | ·PCV2相关的神经疾病 | 第15页 | | ·PCV2亚临床感染 | 第15页 | | 5 PCV2检测方法 | 第15-18页 | | ·病毒的检测 | 第15-18页 | | ·病毒抗原检测 | 第15-16页 | | ·基因组检测 | 第16-18页 | | ·病毒抗体检测 | 第18页 | | ·间接免疫荧光试验(Immunofluorescence assay,IFA) | 第18页 | | ·免疫过氧化物酶单层细胞试验(Immunoperoxidase monolayer assay,IPMA) | 第18页 | | ·酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) | 第18页 | | 6 目前商业PCV2疫苗 | 第18-21页 | | ·试验感染模式中疫苗的效果 | 第18-19页 | | ·接种方案 | 第19-21页 | | ·疫苗在垂直传播上的功效 | 第19页 | | ·母猪的接种 | 第19-20页 | | ·生长猪的免疫 | 第20-21页 | | 引言 | 第21-23页 | | 试验一 PCV2河南株的分离鉴定及全基因组序列分析 | 第23-30页 | | 1 材料和方法 | 第23-24页 | | ·试验材料 | 第23页 | | ·引物设计 | 第23页 | | ·病料处理 | 第23页 | | ·病料PCV2的检测 | 第23-24页 | | ·病毒的分离与培养 | 第24页 | | ·PCV2的间接免疫荧光鉴定 | 第24页 | | ·PCV2全基因组的PCR扩增 | 第24页 | | ·PCV2全基因组序列的测定与分析 | 第24页 | | 2 结果与分析 | 第24-28页 | | ·样品PCR检测结果 | 第24-25页 | | ·PCV2的细胞培养结果 | 第25页 | | ·荧光染色鉴定结果 | 第25-26页 | | ·细胞毒中PCV2基因组扩增结果 | 第26页 | | ·序列的测定及分析 | 第26-28页 | | 3 结论与讨论 | 第28-30页 | | 试验二 PCV2河南分离株增殖条件的优化 | 第30-36页 | | 1 材料与方法 | 第30-31页 | | ·病毒和细胞 | 第30页 | | ·主要试剂 | 第30页 | | ·IFA反应条件的选择 | 第30页 | | ·PCV2抗血清的工作浓度 | 第30页 | | ·兔抗猪IG-g-FITC的工作浓度 | 第30页 | | ·PCV2增殖条件的优化 | 第30-31页 | | ·D-氨基葡萄糖的最佳浓度 | 第30页 | | ·最佳收毒时间的确定 | 第30-31页 | | ·PCV2传代增殖 | 第31页 | | ·TCID50测定 | 第31页 | | 2 结果与分析 | 第31-34页 | | ·IFA反应条件的优化 | 第31页 | | ·PCV2抗血清最佳稀释度 | 第31页 | | ·二抗最佳稀释度 | 第31页 | | ·PCV2增殖条件的优化 | 第31-33页 | | ·D-氨基葡萄糖的最佳刺激浓度 | 第31-33页 | | ·病毒培养最佳时间 | 第33页 | | ·PCV2增殖情况 | 第33-34页 | | ·病毒效价的测定 | 第34页 | | 3 结论与讨论 | 第34-36页 | | 试验三 PCV2增殖敏感PK15细胞的克隆与筛选 | 第36-44页 | | 1 材料与方法 | 第36-38页 | | ·PK15细胞 | 第36页 | | ·PK15细胞克隆 | 第36-37页 | | ·PCV2增值易感PK15克隆细胞筛选 | 第37页 | | ·间接免疫荧光试验(IFA) | 第37页 | | ·克隆细胞PCV1的检测 | 第37页 | | ·PK15细胞的传代、冻存与复苏 | 第37页 | | ·病毒TCID50测定 | 第37-38页 | | ·L8对PCV2增殖稳定性检测 | 第38页 | | 2 结果与分析 | 第38-42页 | | ·细胞克隆与PCV2 IFA检测 | 第38-39页 | | ·PCV1检测结果 | 第39-40页 | | ·L8克隆PK15细胞培养PCV2毒株TCID50测定 | 第40-41页 | | ·克隆细胞传代、冻存与复苏 | 第41页 | | ·L8对PCV2增殖的稳定性 | 第41-42页 | | 3 结论与讨论 | 第42-44页 | | 附录 | 第44-46页 | | 全文总结 | 第46-47页 | | 参考文献 | 第47-60页 | | abstract | 第60-62页 | | 攻读硕士期间发表的论文 | 第62页 |
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