| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-44页 |
| 1.1 非水相酶催化 | 第15-21页 |
| 1.1.1 非水相酶催化及其特点 | 第15页 |
| 1.1.2 非水相酶催化的影响因素 | 第15-17页 |
| 1.1.3 脂肪酶在非水相催化中的应用 | 第17-21页 |
| 1.2 酵母细胞表面展示技术 | 第21-27页 |
| 1.2.1 酵母表面展示技术的发展 | 第21-23页 |
| 1.2.2 酵母表面展示技术的应用 | 第23-26页 |
| 1.2.3 酵母表面展示脂肪酶的应用 | 第26-27页 |
| 1.3 南极假丝酵母脂肪酶A和B | 第27-34页 |
| 1.3.1 南极假丝酵母脂肪酶A和B结构与性质比较 | 第28-30页 |
| 1.3.2 南极假丝酵母脂肪酶A和B的应用 | 第30-32页 |
| 1.3.3 南极假丝酵母脂肪酶A和B的酶分子改造 | 第32-34页 |
| 1.4 酵母展示体系的改造 | 第34-39页 |
| 1.4.1 酵母展示体系的构成元件改造 | 第34-38页 |
| 1.4.2 酵母展示体系的其它改造方法 | 第38-39页 |
| 1.5 本课题的研究意义及主要研究内容 | 第39-44页 |
| 1.5.1 本课题的研究意义 | 第39-41页 |
| 1.5.2 本课题的主要研究内容 | 第41-44页 |
| 第二章 毕赤酵母展示CALB催化酯化柑橘精油增香 | 第44-58页 |
| 2.1 引言 | 第44-45页 |
| 2.2 材料与设备 | 第45-46页 |
| 2.2.1 材料 | 第45页 |
| 2.2.2 主要仪器与设备 | 第45页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第45-46页 |
| 2.3 实验方法 | 第46-47页 |
| 2.3.1 酶催化柑橘精油 | 第46页 |
| 2.3.2 GC-MS检测柑橘精油的成分 | 第46-47页 |
| 2.3.3 柑橘精油数据统计分析 | 第47页 |
| 2.3.4 柑橘精油的抑菌性质测定 | 第47页 |
| 2.3.5 柑橘精油的甲酯化 | 第47页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第47-56页 |
| 2.4.1 毕赤酵母表面展示CALB酶催化柑橘精油增香体系构建 | 第47-50页 |
| 2.4.2 不同精油对毕赤酵母表面展示CALB酶催化体系的影响 | 第50-53页 |
| 2.4.3 毕赤酵母表面展示CALB催化柑橘精油的感官分析 | 第53-54页 |
| 2.4.4 毕赤酵母表面展示CALB催化柑橘精油的抑菌性质分析 | 第54-55页 |
| 2.4.5 柑橘精油中新增酯的酰基供体来源研究 | 第55-56页 |
| 2.5 本章小结 | 第56-58页 |
| 第三章 毕赤酵母展示CALB催化转酯化体系及萜烯醇芳香酯合成 | 第58-70页 |
| 3.1 引言 | 第58页 |
| 3.2 材料与设备 | 第58-59页 |
| 3.3 实验方法 | 第59-61页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第61-68页 |
| 3.5 本章小结 | 第68-70页 |
| 第四章 毕赤酵母表面展示CALB转酯化动力学拆分仲醇的立体选择特性 | 第70-82页 |
| 4.1 引言 | 第70页 |
| 4.2 材料与设备 | 第70-72页 |
| 4.2.1 菌株 | 第70-71页 |
| 4.2.2 主要仪器与设备 | 第71页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第71-72页 |
| 4.3 实验方法 | 第72-73页 |
| 4.3.1 毕赤酵母表面展示CALB动力学拆分仲醇 | 第72页 |
| 4.3.2 毕赤酵母表面展示CALB拆分仲辛醇的重复利用 | 第72页 |
| 4.3.3 GC检测分析 | 第72-73页 |
| 4.3.4 毕赤酵母表面展示CALB无溶剂体系中拆分仲醇 | 第73页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第73-81页 |
| 4.4.1 毕赤酵母表面展示CALB催化转酯化动力学拆分仲醇催化体系构建 | 第73-76页 |
| 4.4.2 不同底物对毕赤酵母表面展示CALB转酯化动力学拆分仲醇的影响 | 第76-78页 |
| 4.4.3 毕赤酵母表面展示CALB有机溶剂中催化仲辛醇拆分的重复使用稳定性 | 第78页 |
| 4.4.4 毕赤酵母表面展示CALB无溶剂体系中催化仲醇拆分 | 第78-81页 |
| 4.5 本章小结 | 第81-82页 |
| 第五章 连接肽提高毕赤酵母展示CALB的催化活力 | 第82-104页 |
| 5.1 引言 | 第82-83页 |
| 5.2 材料与设备 | 第83-86页 |
| 5.2.1 菌株、质粒和引物 | 第83页 |
| 5.2.2 主要仪器与设备 | 第83-84页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第84-85页 |
| 5.2.4 培养基与溶液 | 第85-86页 |
| 5.3 实验方法 | 第86-96页 |
| 5.3.1 连接肽的选择及PCR扩增 | 第86-88页 |
| 5.3.2 插入连接肽的重组菌株的构建及发酵 | 第88-92页 |
| 5.3.3 插入连接肽的毕赤酵母重组菌株分析 | 第92-96页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第96-103页 |
| 5.4.1 三种连接肽对毕赤酵母表面展示CALB水解活力的影响 | 第96-98页 |
| 5.4.2 插入PA连接肽重组菌株的底物特异性 | 第98-99页 |
| 5.4.3 插入连接肽的重组菌在非水相中的催化特性 | 第99-101页 |
| 5.4.4 插入连接肽重组菌株载酶量测定 | 第101-103页 |
| 5.5 本章小结 | 第103-104页 |
| 第六章 毕赤酵母表面展示CALA的构建及其非水相转酯化特性 | 第104-119页 |
| 6.1 引言 | 第104页 |
| 6.2 材料与设备 | 第104-106页 |
| 6.2.1 菌株、质粒和引物 | 第104-106页 |
| 6.2.2 主要仪器与设备 | 第106页 |
| 6.2.3 主要试剂 | 第106页 |
| 6.2.4 培养基与溶液 | 第106页 |
| 6.3 实验方法 | 第106-109页 |
| 6.3.1 GS115/pK-CALA-GCW51菌株构建及发酵 | 第106-107页 |
| 6.3.2 毕赤酵母表面展示CALA流式细胞仪检测 | 第107页 |
| 6.3.3 毕赤酵母表面展示CALA非水相催化转酯化特性 | 第107-108页 |
| 6.3.5 CALA突变菌株构建 | 第108-109页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第109-117页 |
| 6.4.1 毕赤酵母表面展示CALA的发酵及酶蛋白测定 | 第109-110页 |
| 6.4.3 毕赤酵母表面展示CALA非水相催化转酯化特性 | 第110-114页 |
| 6.4.5 毕赤酵母表面展示CALA突变株构建及发酵 | 第114-116页 |
| 6.4.6 毕赤酵母表面展示CALA突变株非水相催化转酯化特性 | 第116-117页 |
| 6.5 本章小结 | 第117-119页 |
| 结论与展望 | 第119-124页 |
| 本论文的创新点 | 第122-123页 |
| 展望 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-141页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第141-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
| 附件 | 第144页 |
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