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茉莉C病毒侵染性cDNA克隆的构建以及不同分离物CP基因的克隆和序列分析
 
     论文目录
 
摘要第9-12页
ABSTRACT第12-14页
第一章 综述第15-31页
    1.1 茉莉的研究概况第15-19页
        1.1.1 茉莉的植物学特性第15页
        1.1.2 茉莉的病毒病害第15-16页
        1.1.3 侵染茉莉的主要病毒第16-19页
    1.2 香石竹潜引病毒属第19-22页
        1.2.1 香石竹潜隐病毒属病毒的分布及危害第19页
        1.2.2 香石竹潜隐病毒属病毒的基因组结构第19-20页
        1.2.3 香石竹潜隐病毒属病毒编码的蛋白及功能第20-21页
        1.2.4 香石竹潜隐病毒属病毒的寄主及传播途径第21-22页
    1.3 植物病毒侵染性克隆第22-24页
        1.3.1 植物侵染性克隆的类型第22-23页
        1.3.2 侵染性cDNA克隆的应用第23-24页
    1.4 植物病毒检测方法第24-27页
        1.4.1 分子生物学检测法第24-26页
        1.4.2 电子显微镜检测法第26页
        1.4.3 血清学方法第26-27页
        1.4.4 生物学检测法第27页
    1.5 原核表达和多克隆抗体的制备第27-30页
        1.5.1 原核表达系统第28页
        1.5.2 蛋白的纯化第28-29页
        1.5.3 多克隆抗体制备第29-30页
    1.6 研究目的和意义第30-31页
第二章 材料与方法第31-38页
    2.1 实验材料第31页
        2.1.1 植物材料、载体和菌种第31页
        2.1.2 生物试剂第31页
        2.1.3 常用缓冲液和培养基的配制第31页
        2.1.4 常用抗生素的配制第31页
    2.2 方法第31-38页
        2.2.1 植物总RNA的提取第32页
        2.2.2 引物设计第32-33页
        2.2.3 RT-PCR第33-34页
        2.2.4 1.0%的琼脂糖凝胶电泳检测第34页
        2.2.5 DNA的克隆第34-35页
        2.2.6 感受态细胞的制备第35页
        2.2.7 连接产物的转化第35-36页
        2.2.8 菌落PCR鉴定第36页
        2.2.9 质粒提取第36-37页
        2.2.10 序列分析第37-38页
第三章 田间调查第38-42页
    3.1 材料第38页
    3.2 方法第38-39页
        3.2.1 提取总RNA第38-39页
        3.2.2 多重RT-PCR检测第39页
    3.3 结果第39-41页
        3.3.1 田间调查分析第39-40页
        3.3.2 RT-PCR检测结果第40-41页
    3.4 讨论第41-42页
第四章 茉莉C病毒福建分离物(JaVC-FJ) cDNA侵染性克隆的构建第42-52页
    4.1 材料第42页
    4.2 构建JaVC-FJ cDNA全长克隆第42-45页
        4.2.1 JaVC-FJ全基因组的扩增策略第42-43页
        4.2.2 植物总RNA的提取及RT-PCR扩增第43页
        4.2.3 PCR产物琼脂糖凝胶电泳和回收第43页
        4.2.4 连接、重组质粒的转化第43页
        4.2.5 测序及序列分析第43页
        4.2.6 JaVC-FJ cDNA全长侵染性克隆构建策略第43-44页
        4.2.7 JaVC-FJ cDNA全长的克隆以及鉴定第44页
        4.2.8 JaVC-FJ cDNA侵染性克隆转化农杆菌以及侵染烟草第44-45页
        4.2.9 JaVC-FJ侵染性的RT-PCR检测第45页
    4.3 JaVC CP基因的烟草亚细胞定位第45-46页
        4.3.1 构建重组质粒第45-46页
        4.3.2 农杆菌转化与浸润接种第46页
        4.3.3 激光共聚焦扫描显微镜观察第46页
    4.4 结果与分析第46-50页
        4.4.1 JaVC-FJ3个片段的克隆及分析第46-47页
        4.4.2 JaVC-FJ全基因组序列拼接和鉴定第47-48页
        4.4.3 JaVC-FJ cDNA全长的侵染性鉴定第48-49页
        4.4.4 激光共聚焦扫描显微镜观察第49-50页
    4.5 讨论第50-52页
第五章 JaVC CP基因九个省茉莉分离物的克隆和序列分析第52-57页
    5.1 材料第52页
    5.2 方法第52-53页
        5.2.1 九个省茉莉的总RNA提取第52页
        5.2.2 RT-PCR和产物的回收第52页
        5.2.3 连接、转化及鉴定第52-53页
        5.2.4 测序及序列分析第53页
    5.3 结果与分析第53-55页
        5.3.1 JaVC九个省分离物CP基因的克隆第53页
        5.3.2 序列分析第53-55页
    5.4 讨论第55-57页
第六章 JaVC CP基因的原核表达及多克隆抗体的制备第57-62页
    6.1 材料第57页
    6.2 方法第57-58页
        6.2.1 原核表达载体的构建第57页
        6.2.2 CP的表达和可溶性鉴定第57-58页
        6.2.3 表达产物的纯化第58页
        6.2.4 CP抗体的制备第58页
    6.3 结果与分析第58-61页
        6.3.1 CP基因的克隆第59页
        6.3.2 利用原核表达系统表达融合蛋白第59-60页
        6.3.3 CP纯化和抗体的制备第60-61页
    6.4 讨论第61-62页
第七章 总结与讨论第62-64页
    7.1 田间茉莉三种病毒的调查第62页
    7.2 JaVC福建分离物cDNA侵染性克隆的构建第62页
    7.3 CP基因序列分析第62-63页
    7.4 CP的原核表达和抗体的制备第63-64页
参考文献第64-70页
附录A 本研究相关基因GenBank序列号第70-71页
附录B 本实验常用缓冲液及培养基第71-73页
附录C 本研究常用抗生素第73-74页
附录D 本研究所用缩写词和中文对照第74-75页
致谢第75页

 
 
论文编号BS3729324,这篇论文共75
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