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无乳链球菌嵌合裂解酶的构建及其杀菌活性研究 |
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论文目录 |
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摘要 | 第4-5页 | ABSTRACT | 第5页 | 缩略语表 | 第8-9页 | 1 绪论 | 第9-21页 | 1.1 无乳链球菌 | 第9-10页 | 1.1.1 无乳链球菌简介 | 第9页 | 1.1.2 无乳链球菌感染的危害 | 第9页 | 1.1.3 无乳链球菌的控制策略 | 第9-10页 | 1.2 噬菌体与噬菌体治疗 | 第10-15页 | 1.2.1 噬菌体的发现与分类 | 第10-12页 | 1.2.2 噬菌体治疗在国内外的应用 | 第12-13页 | 1.2.3 噬菌体治疗的优势与面临的问题 | 第13-15页 | 1.3 噬菌体裂解酶 | 第15-20页 | 1.3.1 噬菌体裂解酶的结构 | 第15-16页 | 1.3.2 噬菌体裂解酶的作用机制 | 第16-17页 | 1.3.3 噬菌体裂解酶的应用研究 | 第17-20页 | 1.3.4 无乳链球菌裂解酶的研究进展 | 第20页 | 1.4 本研究的目的与意义 | 第20-21页 | 2 无乳链球菌嵌合裂解酶的构建及其杀菌活性研究 | 第21-45页 | 2.1 材料 | 第21-26页 | 2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第21-22页 | 2.1.2 主要试剂与耗材 | 第22-23页 | 2.1.3 主要培养基及溶液的配制 | 第23-25页 | 2.1.4 主要仪器 | 第25-26页 | 2.2 技术路线 | 第26-28页 | 2.3 方法 | 第28-33页 | 2.3.1 大肠杆菌质粒抽提 | 第28页 | 2.3.2 目的基因片段的PCR扩增 | 第28页 | 2.3.3 质粒或PCR产物的酶切 | 第28页 | 2.3.4 酶切产物的切胶回收 | 第28-29页 | 2.3.5 酶连反应 | 第29页 | 2.3.6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 | 2.3.7 大肠杆菌质粒的转化 | 第29页 | 2.3.8 PCR筛选阳性克隆子 | 第29-30页 | 2.3.9 蛋白诱导表达 | 第30页 | 2.3.10 蛋白纯化与浓度测定 | 第30-31页 | 2.3.11 裂解动力学 | 第31页 | 2.3.12 剂量依赖性的稀释平板计数 | 第31页 | 2.3.13 剂量依赖性的浊度实验 | 第31页 | 2.3.14 透射电镜观察裂解过程 | 第31页 | 2.3.15 抑菌圈实验 | 第31-32页 | 2.3.16 酶学性质表征 | 第32页 | 2.3.17 蛋白热力学测试 | 第32-33页 | 2.3.18 小鼠感染治疗模型 | 第33页 | 2.4 结果与分析 | 第33-42页 | 2.4.1 嵌合裂解酶ClyV的构建 | 第33-34页 | 2.4.2 ClyV的表达纯化与浓度依赖性杀菌活性 | 第34-35页 | 2.4.3 透射电镜观察ClyV的杀菌过程 | 第35-36页 | 2.4.4 ClyV的理化性质分析 | 第36-37页 | 2.4.5 ClyV的热稳定性测试 | 第37-39页 | 2.4.6 Cly V与 GBS180 的抑菌作用 | 第39页 | 2.4.7 Cly V与 GBS180 的裂解动力学 | 第39-40页 | 2.4.8 ClyV在小鼠菌血症模型中的保护效果 | 第40-42页 | 2.5 结论与展望 | 第42-45页 | 参考文献 | 第45-51页 | 致谢 | 第51-52页 |
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