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地衣芽胞杆菌CodY转录因子对地衣素生物合成的影响
 
     论文目录
 
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-23页
    1.1 地衣素的研究现状及进展第11-15页
        1.1.1 地衣素的结构与性质第11-13页
        1.1.2 地衣素的生物合成与调控机制第13-15页
        1.1.3 地衣素的应用第15页
    1.2 全局性调控蛋白CodY的研究进展第15-19页
        1.2.1 CodY的结构第16页
        1.2.2 CodY的效应分子第16-17页
        1.2.3 CodY的调控机制第17-19页
    1.3 地衣素的增产策略第19-22页
        1.3.1 地衣素高产菌株的选育第19-20页
        1.3.2 地衣素发酵的氨基酸补料研究第20-21页
        1.3.3 其它策略第21-22页
    1.4 研究目的与意义第22-23页
2 材料和方法第23-39页
    2.1 实验材料第23-29页
        2.1.1 菌株和质粒第23-24页
        2.1.2 PCR引物第24-27页
        2.1.3 培养基、培养温度和抗生素浓度第27页
        2.1.4 工具酶及试剂第27页
        2.1.5 抽提液和缓冲液第27-28页
        2.1.6 主要实验仪器第28-29页
    2.2 实验方法第29-39页
        2.2.1 分子水平操作第29-31页
        2.2.2 重组质粒的构建第31-32页
        2.2.3 地衣芽胞杆菌重组质粒转化第32-33页
        2.2.4 地衣芽胞杆菌基因缺失菌株的构建第33-34页
        2.2.5 地衣芽胞杆菌基因游离表达菌株的构建第34页
        2.2.6 地衣素摇瓶发酵培养条件第34页
        2.2.7 前体氨基酸添加发酵策略优化实验第34-35页
        2.2.8 胞外胞内前体氨基酸的提取及检测第35-36页
        2.2.9 RNA的提取及反转录PCR第36-37页
        2.2.10 实时荧光定量PCR第37页
        2.2.11 分析方法第37-39页
3 结果与分析第39-64页
    3.1 WX02-Psrflch菌株地衣素发酵过程中前体氨基酸的变化规律第39-41页
        3.1.1 地衣芽胞杆菌地衣素发酵过程曲线第39-40页
        3.1.2 胞内胞外游离前体氨基酸的变化第40-41页
    3.2 前体氨基酸的添加对WX02-Psrflch地衣素发酵的影响第41-43页
        3.2.1 前体氨基酸的单一添加对地衣素产量的影响第41-42页
        3.2.2 前体氨基酸的混合添加对地衣素发酵的影响第42-43页
    3.3 前体氨基酸的添加对codY差异表达工程菌株地衣素发酵的影响第43-54页
        3.3.1 地衣芽胞杆菌codY缺失工程菌的构建第44-46页
        3.3.2 地衣芽胞杆菌WX02-Psrflch的codY基因游离表达菌株的构建第46-51页
        3.3.3 前体氨基酸的添加对codY缺失菌株地衣素发酵的影响第51-53页
        3.3.4 codY的差异表达对地衣芽胞杆菌地衣素发酵水平的影响第53-54页
    3.4 在添加前体氨基酸条件下codY缺失菌株的发酵特性第54-60页
        3.4.1 codY缺失菌株地衣素发酵的过程曲线第54-55页
        3.4.2 codY缺失菌株地衣素发酵过程中溢流代谢产物的变化第55-57页
        3.4.3 codY缺失株地衣素发酵过程中胞外胞内游离前体氨基酸的变化第57-60页
    3.5 codY缺失对地衣素合成相关基因表达的影响第60-64页
        3.5.1 总RNA的提取第60-61页
        3.5.2 codY缺失对地衣素前体氨基酸合成相关基因转录水平的影响第61-62页
        3.5.3 codY缺失对地衣素合成相关调控基因转录水平的影响第62-63页
        3.5.4 codY缺失对主要溢流代谢相关基因转录水平的影响第63-64页
4 讨论与展望第64-68页
    4.1 讨论第64-66页
    4.2 展望第66-68页
参考文献第68-75页
致谢第75-76页
在读期间发表论文第76页

 
 
论文编号BS4056425,这篇论文共76
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