| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表（Abbreviation） | 第9-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 米根霉 | 第12页 |
| 1.2 脂肪酶简介 | 第12-14页 |
| 1.2.1 细菌及真菌脂肪酶 | 第12-13页 |
| 1.2.2 脂肪酶的催化机理及活性部位 | 第13-14页 |
| 1.3 米根霉脂肪酶的外源表达 | 第14-15页 |
| 1.4 脂肪酶的应用 | 第15-17页 |
| 1.4.1 脂肪与油类的酯交换 | 第15页 |
| 1.4.2 手性化合物拆分 | 第15-16页 |
| 1.4.3 生物柴油合成 | 第16页 |
| 1.4.4 功能性低聚糖制备 | 第16-17页 |
| 1.5 大肠杆菌表达系统研究进展 | 第17-18页 |
| 1.6 巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展 | 第18-21页 |
| 1.6.1 巴斯德毕赤酵母 | 第18页 |
| 1.6.2 巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第18-19页 |
| 1.6.3 影响外源蛋白表达的因素 | 第19-20页 |
| 1.6.4 巴斯德毕赤酵母表达系统的应用前景 | 第20-21页 |
| 1.7 本课题的研究意义及主要内容 | 第21-22页 |
| 1.7.1 选题的目的及意义 | 第21页 |
| 1.7.2 主要研究内容 | 第21-22页 |
| 第2章 材料和方法 | 第22-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第22页 |
| 2.1.3 试剂、试剂盒以及酶和引物 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要培养基及主要溶液 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 由AOX1启动子驱动的脂肪酶基因工程菌株的构建 | 第24-27页 |
| 2.2.2 重组酵母工程菌株的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.3 重组酵母工程菌株的诱导表达分析 | 第28-29页 |
| 2.2.4 多拷贝重组质粒的构建及诱导表达 | 第29-30页 |
| 2.2.5 脂肪酶基因ROL的密码子优化 | 第30页 |
| 2.2.6 脂肪酶基因ROL的理性设计及表达量分析 | 第30-31页 |
| 2.2.7 优化后脂肪酶基因ROL的多拷贝构建及表达量分析 | 第31页 |
| 2.2.8 优化后脂肪酶基因ROL在发酵罐条件下的表达水平评估 | 第31-33页 |
| 第3章 结果与分析 | 第33-42页 |
| 3.1 脂肪酶ROL重组子的构建及诱导表达 | 第33-34页 |
| 3.2 脂肪酶基因ROL的理性设计及表达量分析 | 第34-37页 |
| 3.3 优化后脂肪酶基因ROL的多拷贝构建及表达量分析 | 第37-39页 |
| 3.4 优化后脂肪酶基因ROL在发酵罐条件下的表达水平评估 | 第39-42页 |
| 第4章 结论与展望 | 第42-45页 |
| 4.1 结论 | 第42-43页 |
| 4.2 展望 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第56页 |
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