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棕色固氮菌突变种(UW45、DJ54和DJ35)的缺失FeMoco钼铁蛋白的纯化、特性鉴定及结晶研究
 
     论文目录
 
中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
第一章 引言第9-15页
 一、 固氮酶生物化学,分子生物学及结构生物学研究第9-13页
  1 固氮酶的基本组成结构与基因编码第9-10页
  2 固氮酶MoFe蛋白及其与Fe蛋白的固氮酶复合物晶体的结构第10-12页
  3 突变种固氮酶的结构与功能研究第12-13页
 二、 固氮酶生物多样性研究第13-15页
第二章 材料与方法第15-23页
 一、 试剂配制第15-17页
  1 修改的Burk's培养基第15页
  2 奈氏试剂第15页
  3 除氧溶液第15页
  4 Tris-HCl缓冲液及不同离子强度的厌氧Tris-HCl缓冲液第15-16页
  5 测蛋白浓度所用的试剂第16页
  6 ATP发生系统第16页
  7 蛋白质晶体生长所需的试剂第16-17页
 二、 实验材料及样品制备第17-20页
  1 棕色固氮菌及其突变种的培养第17页
  2 酶的分离纯化第17-20页
   2.1 突变种UW_(45)固氮酶nifB~- MoFe蛋白和nifB~- Fe蛋白的分离纯化第17-19页
   2.2 突变种DJ_(54)固氮酶△nifH MoFe 蛋白的分离纯化第19-20页
 三、 实验方法第20-23页
  1 蛋白质浓度测定第20-21页
  2 固氮酶及与异源固氮酶两组分互补的C_2H_2及H~+还原活性的测定第21页
  3 电泳分析第21页
  4 蛋白质结晶方法第21-23页
第三章 试验结果与讨论第23-45页
 1 突变种nifB~- MoFe蛋白蛋白的分离纯化、特性鉴定与结晶研究第23-31页
  1.1 棕色固氮菌突变种UW_(45)培养第23-24页
  1.2 突变种nifB~- MoFe蛋白MoFe蛋白的分离纯化第24页
  1.3 nifo~- MoFe蛋白的特性鉴定第24-26页
  1.4 nifB~- MoFe蛋白结晶研究第26-31页
   1.4.1 Hepes缓冲液的浓度第27页
   1.4.2 PEG 8000的浓度第27-29页
   1.4.3 MgCl_2和NaCl的浓度第29-30页
   1.4.4 结晶方法及其实验操作的影响第30-31页
 2 突变种△nifH MoFe蛋白和△nifE MoFe蛋白的分离纯化与结晶研究第31-34页
  2.1 △nifH MoFe蛋白的分离纯化和特性鉴定第31-32页
  2.2 △nifH MoFe蛋白的初步结晶研究第32-33页
  2.3 △nifE MoFe蛋白的初步结晶研究第33-34页
 3 新型固氮酶MnFe蛋白和CrFe蛋白的研究第34-45页
  3.1 新型固氮酶MnFe蛋白和CrFe蛋白特性研究进展第34-37页
   3.1.1 MnFe蛋白和CrFe蛋白的亚基组成第34-35页
   3.1.2 MnFe蛋白和CrFe蛋白的底物还原活性第35-37页
  3.2 新型固氮酶MnFe蛋白和CrFe蛋白的晶体生长进展第37-45页
   3.2.1 结晶溶液系统的选择第37-38页
   3.2.2 PEG 8000、MgCl_2和NaCl最适浓度组成的筛选第38-42页
    (i) PEG 8000第38-40页
    (ii) MgCl_2第40-42页
    (iii) NaCl第42页
   3.2.3 最适的结晶方法第42-45页
第四章 结论第45-46页
参考文献第46-52页
缩略语表第52-53页
攻读硕士学位期间已发表的的研究论文第53-54页
致谢第54-55页

 
 
论文编号BS858075,这篇论文共55
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