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乙烯依赖和非乙烯依赖的花器官脱落途径调控AtDOF4.7的研究
 
     论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
缩略词第10-11页
第一章 文献综述第11-31页
   ·花器官脱落的研究进展第11-21页
     ·离区形成及其发育相关基因第11-12页
       ·水稻离区发育基因第11-12页
       ·番茄离区发育基因第12页
       ·拟南芥离区发育基因第12页
     ·影响脱落的因素第12-15页
       ·衰老和环境因素第12-14页
         ·衰老第12-13页
         ·光照第13页
         ·温度第13页
         ·水分第13页
         ·病虫害侵袭第13-14页
         ·矿质营养第14页
         ·臭氧第14页
       ·激素对脱落的影响第14-15页
         ·乙烯第14页
         ·生长素第14-15页
         ·脱落酸第15页
         ·其他激素第15页
     ·与脱落相关的细胞壁酶类第15-16页
       ·纤维素酶第15-16页
       ·果胶酶第16页
     ·拟南芥花器官脱落的研究进展第16-21页
       ·乙烯依赖的花器官脱落途径相关基因第18页
       ·非乙烯依赖的花器官脱落途径相关基因第18-21页
         ·短肽配体-受体类蛋白激酶相关基因第18-19页
         ·膜运输相关基因第19-21页
       ·其他脱落相关基因第21页
   ·DOF类转录因子的研究进展第21-26页
     ·DOF蛋白的结构和分类第21-23页
     ·DOF蛋白与DNA结合第23-24页
     ·DOF蛋白与其他蛋白的相互作用第24页
     ·DOF蛋白调节的生物学功能第24-26页
   ·MAPK级联反应途径第26-29页
     ·MAPK级联信号系统及其特征第26-27页
     ·拟南芥MAPK级联反应途径第27-29页
   ·本研究的目的和意义第29-31页
第二章 材料与方法第31-55页
   ·实验材料第31-32页
     ·植物材料第31页
     ·菌株第31页
     ·质粒载体第31-32页
     ·工具酶、试剂盒和常用试剂第32页
   ·主要实验仪器第32-33页
   ·常用溶液及培养基的配制第33-38页
     ·常用溶液的配制第33-37页
     ·常用培养基的配制第37-38页
   ·实验方法第38-55页
     ·拟南芥杂交实验第38页
     ·新型植物基因组DNA提取试剂盒提取拟南芥基因组DNA第38页
     ·RNeasy Plant Mini Kit试剂盒提取拟南芥总RNA第38-39页
     ·反转录RT-PCR实验第39-40页
     ·荧光实时定量PCR(Real-time PCR)第40页
     ·回收琼脂糖凝胶中的DNA第40页
     ·DNA片段与T载体或表达载体的连接反应第40-41页
     ·大肠杆菌感受态的热激法转化第41页
       ·用于连接T载体的转化的方法第41页
       ·用于连接一般表达载体的转化方法第41页
     ·大肠杆菌质粒DNA的小量提取第41-42页
     ·大肠杆菌质粒DNA的大量提取与纯化第42-43页
     ·农杆菌感受态的制备第43页
     ·农杆菌感受态的化学法转化第43页
     ·农杆菌转化拟南芥第43-44页
     ·GUS染色及其观察第44页
     ·酵母双杂交实验第44-45页
       ·酵母感受态细胞的制备第44页
       ·LiAc介导的酵母转化第44-45页
     ·拟南芥原生质体转化和荧光双分子互补(BiFC)实验第45页
     ·乙烯处理拟南芥第45-46页
       ·ACC筛选乙烯不敏感表型第45页
       ·乙烯气体处理转基因植株第45-46页
     ·Brandford方法测定样品蛋白浓度第46页
     ·SDS-PAGE电泳第46页
     ·Western免疫印迹实验第46页
     ·多种标签融合蛋白的原核表达及纯化实验第46-48页
       ·MBP标签融合蛋白的原核表达及纯化第47页
       ·His标签融合蛋白的原核表达及纯化第47-48页
       ·Flag标签融合蛋白的原核表达及纯化第48页
     ·体外磷酸化实验第48-50页
     ·DEX处理拟南芥方法第50页
       ·DEX溶液喷洒处理拟南芥角果第50页
       ·DEX溶液浸泡处理拟南芥离体叶片或角果第50页
     ·酵母单杂交实验第50-51页
       ·诱饵质粒的构建第50-51页
       ·诱饵质粒整合进酵母Y1H Gold菌株基因组第51页
       ·目的载体转入诱饵菌株第51页
     ·RNAi载体操作流程第51-52页
     ·电泳迁移率实验(Electrophoretic mobility shift assay, EMSA)第52-55页
第三章 实验结果第55-75页
   ·引言第55页
   ·AtDOF4.7在乙烯不敏感突变体内的表达模式分析第55-59页
     ·乙烯提前了AtDOF4.7在角果离区中的表达时间第55-56页
     ·AtDOF4.7在乙烯不敏感突变体内角果离区的时间表达延迟第56-59页
   ·35S:AtDOF4.7导致乙烯超敏突变体ctrl-1花器官的脱落延迟第59页
   ·AtDOF4.7在非乙烯依赖的脱落缺失突变体内的表达模式分析第59-61页
     ·AtDOF4.7在ida-2突变体内角果离区的时间表达并未改变第59-61页
     ·AtDOF4.7的表达量在ida-2突变体内上升第61页
   ·AtDOF4.7和IDA上下游关系的遗传学分析第61-63页
     ·AtDOF4.7是IDA信号途径下游的成员第61-63页
   ·AtDOF4.7蛋白与MAPK相互作用的分析第63-65页
     ·AtDOF4.7与MPK3/MPK6在酵母细胞中相互作用第63页
     ·AtDOF4.7和MPK3/MPK6在拟南芥原生质体中相:互作用第63-65页
   ·AtDOF4.7体外磷酸化分析第65-66页
     ·AtDOF4.7氨基酸序列上磷酸化位点预测分析第65页
     ·AtDOF4.7被MPK3/MPK6磷酸化修饰第65-66页
   ·MKK5DD部分恢复S107的花器官脱落第66-67页
   ·S107/MKK5DD植株内AtDOF4.7的蛋白水平降低第67-68页
   ·AtDOF4.7对脱落途径下游的细胞壁降解酶类基因调控作用的初探第68-75页
     ·S107植株数字化表达谱的数据分析第68-70页
     ·差异表达基因的GO分类第70-75页
第四章 讨论第75-81页
   ·AtDOF4.7的表达时间与乙烯的关系第75-76页
   ·AtDOF4.7的表达强度由与IDA的关系第76-77页
   ·AtDOF4.7对下游基因的调控第77-78页
   ·AtDOF4.7在脱落途径中的角色第78-81页
第五章 结论与展望第81-83页
   ·结论第81页
   ·展望第81-83页
附录第83-97页
 附录1:AtDOF4.7调控花器官的花器官脱落的机理第83页
 附录2:拟南芥DOF家族成员基因气孔保卫细胞特异表达的筛选第83-89页
  附录2.1 气孔特异表达基因AtMYB60启动子与DOF家族成员一对一杂交第85-87页
  附录2.2 AtDOF3.6在体外与AtMYB60启动子的保卫细胞特异性序列结合第87-88页
  附录2.3 结论第88-89页
 附录3:本研究中所用的引物列表第89-96页
 附录4:AtDOF4.7基因上游启动子序列含有被EIN3识别的顺式作用元件第96-97页
参考文献第97-109页
致谢第109-111页
作者简介第111页

 
 
论文编号BS2356226,这篇论文共111
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