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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--茯苓转化条件的优化和Smk基因的研究
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茯苓转化条件的优化和Smk基因的研究
 
     论文目录
 
摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1 绪论第11-21页
    1.1 茯苓的药用价值第11-12页
    1.2 茯苓的栽培现状第12页
    1.3 真菌遗传转化第12-15页
    1.4 MAPK蛋白家族的研究进展第15-16页
    1.5 基于新一代高通量测序技术的转录组测序第16-17页
    1.6 RNA干扰技术第17-18页
    1.7 实时荧光定量PCR技术第18-19页
    1.8 立题依据和意义第19-21页
2 PEG介导的茯苓原生质体转化条件的优化第21-48页
    2.1 实验材料与仪器第21-24页
        2.1.1 实验材料第21页
        2.1.2 实验仪器第21-22页
        2.1.3 培养基第22页
        2.1.4 试剂第22-24页
        2.1.5 酶制剂第24页
    2.2 实验方法第24-28页
        2.2.1 菌丝形态的研究第24页
        2.2.2 固体生长曲线的测定第24页
        2.2.3 液体生长曲线的测定第24-25页
        2.2.4 菌龄对原生质体制备的影响第25页
        2.2.5 茯苓原生质体的制备第25页
        2.2.6 茯苓原生质体计数第25页
        2.2.7 茯苓原生质体的再生第25-26页
        2.2.8 原生质体产量和再生率的计算第26页
        2.2.9 原生质体的转化第26页
        2.2.10 转化子PCR检测第26-28页
        2.2.11 转化效率的计算第28页
    2.3 结果与分析第28-45页
        2.3.1 菌丝形态第28页
        2.3.2 固体生长曲线第28-29页
        2.3.3 液体生长曲线第29-30页
        2.3.4 菌龄对原生质体产量的影响第30-32页
        2.3.5 酶种类及浓度对原生质体产量和再生率的影响第32-33页
        2.3.6 酶解时间对原生质体产量和再生率的影响第33-35页
        2.3.7 酶解温度对原生质体产量和再生率的影响第35-37页
        2.3.8 酶液pH对原生质体产量和再生率的影响第37-38页
        2.3.9 酶解形式对原生质体产量的影响第38页
        2.3.10 再生培养基的成分对原生质体再生率的影响第38-39页
        2.3.11 原生质体涂布方法对原生质体再生率的影响第39页
        2.3.12 摇菌时间对PEG介导的原生质体转化的影响第39-40页
        2.3.13 原生质体浓度对PEG介导的原生质体转化的影响第40-41页
        2.3.14 外源载体浓度对PEG介导的原生质体转化的影响第41页
        2.3.15 转化介质Ca2+浓度对PEG介导的原生质体转化的影响第41-42页
        2.3.16 PEG种类对PEG介导的原生质体转化的影响第42-43页
        2.3.17 PEG浓度对PEG介导的原生质体转化的影响第43-44页
        2.3.18 转化子检测第44-45页
    2.4 讨论第45-48页
3 茯苓Smk基因的研究第48-69页
    3.1 实验材料与仪器第48-49页
        3.1.1 实验材料第48页
        3.1.2 实验仪器第48页
        3.1.3 实验试剂第48-49页
    3.2 实验方法第49-59页
        3.2.1 菌丝培养第49页
        3.2.2 茯苓RNA提取以及检测第49页
        3.2.3 cDNA的获得第49-50页
        3.2.4 茯苓MAPK相关基因的筛选第50页
        3.2.5 Smk沉默设计第50-51页
        3.2.6 引物设计第51-52页
        3.2.7 Smk上游片段与下游片段的克隆第52-55页
        3.2.8 Smk基因沉默载体的构建第55-56页
        3.2.9 Smk基因沉默转化子的转化第56-57页
        3.2.10 荧光定量方法的建立第57-58页
        3.2.11 Smk基因沉默转化子的荧光定量第58-59页
        3.2.12 Smk基因沉默转化子生长特性研究第59页
    3.3 结果与分析第59-67页
        3.3.1 RNA质量和浓度第59-60页
        3.3.2 茯苓Smk基因第60-61页
        3.3.3 Smk-up与Smk-down片段第61-62页
        3.3.4 Smk基因沉默载体构建第62-63页
        3.3.5 荧光定量方法的建立第63-65页
        3.3.6 Smk基因沉默转化子的表达量第65-66页
        3.3.7 Smk基因沉默转化子生长特性第66-67页
    3.4 讨论第67-69页
4 结论与创新点第69-71页
参考文献第71-79页
致谢第79-80页
附录第80-81页
攻读学位期间的研究成果第81页

 
 
论文编号BS2450026,这篇论文共81
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