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宏基因组文库筛选猪场土壤氟苯尼考抗性基因 |
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论文目录 |
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摘要 | 第1-8页 | ABSTRACT | 第8-9页 | 缩略词 | 第9-10页 | 1 前言 | 第10-26页 | ·抗生素简介 | 第10-16页 | ·抗生素种类及作用机理 | 第10-11页 | ·抗生素使用情况介绍 | 第11-12页 | ·抗生素的环境影响 | 第12-15页 | ·氟苯尼考简介 | 第15-16页 | ·抗性基因研究背景 | 第16-20页 | ·细菌耐药机制 | 第16-18页 | ·ARGs及其在环境中的传播 | 第18-19页 | ·环境中ARGs的筛选方法 | 第19-20页 | ·可培养方法 | 第19页 | ·非培养方法 | 第19-20页 | ·宏基因组学概述 | 第20-25页 | ·宏基因组学研究策略 | 第21-24页 | ·环境样品的采集及富集 | 第21-22页 | ·DNA的提取和纯化 | 第22页 | ·宏基因组文库的构建 | 第22-23页 | ·宏基因组文库的筛选 | 第23-24页 | ·宏基因组学在土壤活性物质开发中的应用 | 第24-25页 | ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 | 2 材料与方法 | 第26-37页 | ·实验材料 | 第26-31页 | ·土壤样品来源 | 第26页 | ·菌种与质粒 | 第26页 | ·主要试剂 | 第26-27页 | ·酶制剂和抗生素 | 第26-27页 | ·PCR试剂及酶切、酶连试剂 | 第27页 | ·试剂盒 | 第27页 | ·培养基 | 第27-28页 | ·仪器 | 第28页 | ·常用溶液 | 第28-31页 | ·土壤基因组DNA提取溶液 | 第28-29页 | ·质粒提取溶液 | 第29页 | ·感受态细胞制备溶液 | 第29-30页 | ·抗生素及其他贮存溶液 | 第30-31页 | ·试验方法 | 第31-37页 | ·土壤宏基因组文库的构建 | 第31-35页 | ·土壤基因组DNA的提取 | 第31-32页 | ·土壤总DNA的纯化 | 第32页 | ·DNA酶切及酶切片段回收 | 第32页 | ·CaCl_2诱导感受态细胞的制备 | 第32页 | ·钙转化 | 第32-33页 | ·质粒的制备 | 第33页 | ·质粒的酶切及酶切片段回收 | 第33-34页 | ·质粒的自连检测 | 第34页 | ·酶切片段与载体的连接及转化 | 第34页 | ·文库的收集 | 第34页 | ·质粒酶切分析 | 第34-35页 | ·氟苯尼考抗性基因的筛选与鉴定 | 第35-37页 | ·宏基因组文库的氟苯尼考抗性功能筛选 | 第35页 | ·菌种保存 | 第35页 | ·质粒抗性验证 | 第35页 | ·连接片段大小验证 | 第35页 | ·DNA测序 | 第35-36页 | ·插入片段的生物信息学分析 | 第36-37页 | 3 结果与分析 | 第37-49页 | ·土壤宏基因组文库的构建 | 第37-42页 | ·DNA的提取和纯化 | 第37页 | ·基因组DNA的双酶切 | 第37-38页 | ·质粒的制备与酶切 | 第38-39页 | ·质粒自连实验 | 第39-40页 | ·文库的构建 | 第40-41页 | ·文库的质粒验证 | 第41-42页 | ·氟苯尼考抗性基因的筛选与鉴定 | 第42-49页 | ·文库的抗性筛选 | 第42-43页 | ·质粒的抗性验证 | 第43-44页 | ·连接片段大小验证 | 第44-45页 | ·插入片段的生物信息学分析 | 第45-49页 | ·2号克隆菌株的插入片段序列分析 | 第46-47页 | ·3号克隆菌株的插入片段序列分析 | 第47-49页 | 4 讨论 | 第49-52页 | ·土壤宏基因组文库的构建 | 第49页 | ·克隆文库的筛选 | 第49-51页 | ·本研究创新点 | 第51页 | ·研究展望 | 第51-52页 | 参考文献 | 第52-57页 | 致谢 | 第57-58页 | 附录 | 第58-60页 |
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