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宏基因组文库筛选猪场土壤氟苯尼考抗性基因
 
     论文目录
 
摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略词第9-10页
1 前言第10-26页
   ·抗生素简介第10-16页
     ·抗生素种类及作用机理第10-11页
     ·抗生素使用情况介绍第11-12页
     ·抗生素的环境影响第12-15页
     ·氟苯尼考简介第15-16页
   ·抗性基因研究背景第16-20页
     ·细菌耐药机制第16-18页
     ·ARGs及其在环境中的传播第18-19页
     ·环境中ARGs的筛选方法第19-20页
       ·可培养方法第19页
       ·非培养方法第19-20页
   ·宏基因组学概述第20-25页
     ·宏基因组学研究策略第21-24页
       ·环境样品的采集及富集第21-22页
       ·DNA的提取和纯化第22页
       ·宏基因组文库的构建第22-23页
       ·宏基因组文库的筛选第23-24页
     ·宏基因组学在土壤活性物质开发中的应用第24-25页
   ·本研究的目的和意义第25-26页
2 材料与方法第26-37页
   ·实验材料第26-31页
     ·土壤样品来源第26页
     ·菌种与质粒第26页
     ·主要试剂第26-27页
       ·酶制剂和抗生素第26-27页
       ·PCR试剂及酶切、酶连试剂第27页
       ·试剂盒第27页
     ·培养基第27-28页
     ·仪器第28页
     ·常用溶液第28-31页
       ·土壤基因组DNA提取溶液第28-29页
       ·质粒提取溶液第29页
       ·感受态细胞制备溶液第29-30页
       ·抗生素及其他贮存溶液第30-31页
   ·试验方法第31-37页
     ·土壤宏基因组文库的构建第31-35页
       ·土壤基因组DNA的提取第31-32页
       ·土壤总DNA的纯化第32页
       ·DNA酶切及酶切片段回收第32页
       ·CaCl_2诱导感受态细胞的制备第32页
       ·钙转化第32-33页
       ·质粒的制备第33页
       ·质粒的酶切及酶切片段回收第33-34页
       ·质粒的自连检测第34页
       ·酶切片段与载体的连接及转化第34页
       ·文库的收集第34页
       ·质粒酶切分析第34-35页
     ·氟苯尼考抗性基因的筛选与鉴定第35-37页
       ·宏基因组文库的氟苯尼考抗性功能筛选第35页
       ·菌种保存第35页
       ·质粒抗性验证第35页
       ·连接片段大小验证第35页
       ·DNA测序第35-36页
       ·插入片段的生物信息学分析第36-37页
3 结果与分析第37-49页
   ·土壤宏基因组文库的构建第37-42页
     ·DNA的提取和纯化第37页
     ·基因组DNA的双酶切第37-38页
     ·质粒的制备与酶切第38-39页
     ·质粒自连实验第39-40页
     ·文库的构建第40-41页
     ·文库的质粒验证第41-42页
   ·氟苯尼考抗性基因的筛选与鉴定第42-49页
     ·文库的抗性筛选第42-43页
     ·质粒的抗性验证第43-44页
     ·连接片段大小验证第44-45页
     ·插入片段的生物信息学分析第45-49页
       ·2号克隆菌株的插入片段序列分析第46-47页
       ·3号克隆菌株的插入片段序列分析第47-49页
4 讨论第49-52页
   ·土壤宏基因组文库的构建第49页
   ·克隆文库的筛选第49-51页
   ·本研究创新点第51页
   ·研究展望第51-52页
参考文献第52-57页
致谢第57-58页
附录第58-60页

 
 
论文编号BS2217127,这篇论文共60
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