| 前言 | 第1-11页 |
| 第一部分 近端肾小管上皮细胞分泌包含microRNA-21的微囊泡促进肾小管上皮细胞表型转化的研究 | 第11-49页 |
| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 材料方法 | 第15-21页 |
| 动物模型 | 第15页 |
| 细胞培养和处理 | 第15-16页 |
| 微囊泡的提取和观察 | 第16-17页 |
| miRNA的微阵列检测 | 第17页 |
| miRNA的原位杂交(in situ hybridization,ISH) | 第17页 |
| miRNA的实时定量PCR(Q-PCR) | 第17-18页 |
| 蛋白免疫印迹 | 第18-19页 |
| 间接免疫荧光 | 第19-20页 |
| 免疫组化 | 第20页 |
| 肾组织形态学 | 第20页 |
| 尿液总RNA的提取 | 第20页 |
| 数据分析 | 第20-21页 |
| 结果 | 第21-27页 |
| TGF-β1处理供体肾小管上皮细胞产生的条件培养液诱导受体肾小管上皮细胞发生表型转化 | 第21-22页 |
| 条件培养液诱导的肾小管上皮细胞表型转化不依赖于TGF-β1和MMPs | 第22页 |
| 条件培养液中的微囊泡诱导肾小管上皮细胞发生表型转化 | 第22-23页 |
| miR-21在纤维化的肾小管中表达增加伴尿液中排泄增加 | 第23-24页 |
| 损伤的肾小管上皮细胞分泌的微囊泡中包含miR-21 | 第24页 |
| 微囊泡中包含的外源性的miR-21诱导肾小管上皮细胞发生表型转化 | 第24-25页 |
| miR-21通过抑制靶蛋白PTEN而增强Akt信号诱导肾小管上皮细胞表型转化 | 第25-26页 |
| 包含外源性miR-21的微囊泡通过抑制受体肾小管上皮细胞的靶蛋白PTEN而增强Akt信号诱导肾小管上皮细胞表型转化 | 第26-27页 |
| 讨论 | 第27-32页 |
| 参考文献 | 第32-38页 |
| 图和说明 | 第38-49页 |
| 第二部分 肾间质成纤维细胞分泌包含miR-34a的微囊泡诱导近端肾小管上皮细胞凋亡的研究 | 第49-84页 |
| 摘要 | 第49-50页 |
| Abstract | 第50-51页 |
| 引言 | 第51-53页 |
| 材料方法 | 第53-59页 |
| 动物模型 | 第53页 |
| 细胞培养和处理 | 第53-54页 |
| 微囊泡的提取和观察 | 第54页 |
| miRNA的原位杂交(in situ hybridization,ISH) | 第54-55页 |
| miRNA和mRNA的实时定量PCR(Q-PCR) | 第55-56页 |
| 蛋白免疫印迹 | 第56-57页 |
| 间接免疫荧光 | 第57页 |
| 肾组织形态学 | 第57页 |
| 尿液总RNA的提取 | 第57-58页 |
| TUNEL染色检测细胞凋亡 | 第58页 |
| Annexin V-FITC染色检测细胞凋亡 | 第58页 |
| 数据分析 | 第58-59页 |
| 结果 | 第59-65页 |
| 梗阻肾组织及其微囊泡中miR-34a的表达增加 | 第59-60页 |
| TGF-β1诱导肾间质成纤维细胞而非近端肾小管上皮细胞中miR-34a的表达增高 | 第60页 |
| 肾间质成纤维细胞的微囊泡能够进入近端肾小管上皮细胞 | 第60-61页 |
| 肾间质成纤维细胞分泌的包含miR-34a的微囊泡诱导近端肾小管上皮细胞凋亡 | 第61-62页 |
| miR-34a调节近端肾小管上皮细胞凋亡 | 第62页 |
| miR-34a调节近端肾小管上皮细胞中Bcl-2的表达 | 第62-63页 |
| 下调Bcl-2诱导近端肾小管上皮细胞凋亡 | 第63页 |
| miR-34a通过抑制靶蛋白Bcl-2调控近端肾小管上皮细胞凋亡 | 第63-64页 |
| 外源性的包含miR-34a的微囊泡能促进近端肾小管上皮细胞凋亡 | 第64-65页 |
| 讨论 | 第65-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 图和说明 | 第73-84页 |
| 第三部分 促红细胞生成素上调血清微囊泡中microRNA-144的含量保护肾小管基底膜完整性的研究 | 第84-114页 |
| 摘要 | 第84-85页 |
| Abstract | 第85-86页 |
| 引言 | 第86-88页 |
| 材料方法 | 第88-93页 |
| 动物模型 | 第88页 |
| 细胞培养和处理 | 第88-89页 |
| 血清总RNA的提取 | 第89页 |
| 微囊泡的提取和注射 | 第89页 |
| miRNA和mRNA的实时定量PCR(Q-PCR) | 第89-90页 |
| 蛋白免疫印迹 | 第90-91页 |
| 明胶酶谱分析 | 第91-92页 |
| 间接免疫荧光 | 第92页 |
| 数据分析 | 第92-93页 |
| 结果 | 第93-97页 |
| EPO减轻梗阻肾小管基底膜完整性的破坏 | 第93页 |
| EPO上调血清微囊泡中miR-144的含量 | 第93页 |
| EPO小鼠血清的微囊泡调节肾间质成纤维细胞中tPA的表达和MMP-9的活性 | 第93-94页 |
| EPO小鼠血清的微囊泡抑制TGF-β1诱导的间质成纤维细胞中tPA的表达增高和MMP-9的活化 | 第94页 |
| EPO小鼠血清的微囊泡减轻梗阻肾小管基底膜完整性的破坏 | 第94页 |
| 过表达miR-144下调肾间质成纤维细胞中tPA的表达和MMP-9的活性 | 第94-95页 |
| 抑制miR-144上调肾间质成纤维细胞中tPA的表达和MMP-9的活性 | 第95页 |
| 过表达miR-144抑制TGF-β1诱导的间质成纤维细胞中tPA的表达增高和MMP-9的活化 | 第95页 |
| 抑制miR-144加重TGF-β1诱导的间质成纤维细胞中tPA的表达增高和MMP-9的活化 | 第95-97页 |
| 讨论 | 第97-102页 |
| 参考文献 | 第102-106页 |
| 图和说明 | 第106-114页 |
| 总结 | 第114-116页 |
| 文献综述微囊泡介导的细胞间通讯在疾病中的作用 | 第116-148页 |
| 参考文献 | 第132-148页 |
| 缩略词 | 第148-150页 |
| 攻读博士学位期间发表的期刊论文 | 第150-152页 |
| 攻读博士学位期间参加学术会议的论文 | 第152-153页 |
| 攻读博士学位期间的科研成果获奖 | 第153-154页 |
| 攻读博士学位期间承担的科研项目 | 第154-155页 |
| 致谢 | 第155页 |
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