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包含microRNA的微囊泡介导肾小管间质纤维化的机制研究
 
     论文目录
 
前言第1-11页
第一部分 近端肾小管上皮细胞分泌包含microRNA-21的微囊泡促进肾小管上皮细胞表型转化的研究第11-49页
 摘要第11-12页
 Abstract第12-13页
 引言第13-15页
 材料方法第15-21页
  动物模型第15页
  细胞培养和处理第15-16页
  微囊泡的提取和观察第16-17页
  miRNA的微阵列检测第17页
  miRNA的原位杂交(in situ hybridization,ISH)第17页
  miRNA的实时定量PCR(Q-PCR)第17-18页
  蛋白免疫印迹第18-19页
  间接免疫荧光第19-20页
  免疫组化第20页
  肾组织形态学第20页
  尿液总RNA的提取第20页
  数据分析第20-21页
 结果第21-27页
  TGF-β1处理供体肾小管上皮细胞产生的条件培养液诱导受体肾小管上皮细胞发生表型转化第21-22页
  条件培养液诱导的肾小管上皮细胞表型转化不依赖于TGF-β1和MMPs第22页
  条件培养液中的微囊泡诱导肾小管上皮细胞发生表型转化第22-23页
  miR-21在纤维化的肾小管中表达增加伴尿液中排泄增加第23-24页
  损伤的肾小管上皮细胞分泌的微囊泡中包含miR-21第24页
  微囊泡中包含的外源性的miR-21诱导肾小管上皮细胞发生表型转化第24-25页
  miR-21通过抑制靶蛋白PTEN而增强Akt信号诱导肾小管上皮细胞表型转化第25-26页
  包含外源性miR-21的微囊泡通过抑制受体肾小管上皮细胞的靶蛋白PTEN而增强Akt信号诱导肾小管上皮细胞表型转化第26-27页
 讨论第27-32页
 参考文献第32-38页
 图和说明第38-49页
第二部分 肾间质成纤维细胞分泌包含miR-34a的微囊泡诱导近端肾小管上皮细胞凋亡的研究第49-84页
 摘要第49-50页
 Abstract第50-51页
 引言第51-53页
 材料方法第53-59页
  动物模型第53页
  细胞培养和处理第53-54页
  微囊泡的提取和观察第54页
  miRNA的原位杂交(in situ hybridization,ISH)第54-55页
  miRNA和mRNA的实时定量PCR(Q-PCR)第55-56页
  蛋白免疫印迹第56-57页
  间接免疫荧光第57页
  肾组织形态学第57页
  尿液总RNA的提取第57-58页
  TUNEL染色检测细胞凋亡第58页
  Annexin V-FITC染色检测细胞凋亡第58页
  数据分析第58-59页
 结果第59-65页
  梗阻肾组织及其微囊泡中miR-34a的表达增加第59-60页
  TGF-β1诱导肾间质成纤维细胞而非近端肾小管上皮细胞中miR-34a的表达增高第60页
  肾间质成纤维细胞的微囊泡能够进入近端肾小管上皮细胞第60-61页
  肾间质成纤维细胞分泌的包含miR-34a的微囊泡诱导近端肾小管上皮细胞凋亡第61-62页
  miR-34a调节近端肾小管上皮细胞凋亡第62页
  miR-34a调节近端肾小管上皮细胞中Bcl-2的表达第62-63页
  下调Bcl-2诱导近端肾小管上皮细胞凋亡第63页
  miR-34a通过抑制靶蛋白Bcl-2调控近端肾小管上皮细胞凋亡第63-64页
  外源性的包含miR-34a的微囊泡能促进近端肾小管上皮细胞凋亡第64-65页
 讨论第65-69页
 参考文献第69-73页
 图和说明第73-84页
第三部分 促红细胞生成素上调血清微囊泡中microRNA-144的含量保护肾小管基底膜完整性的研究第84-114页
 摘要第84-85页
 Abstract第85-86页
 引言第86-88页
 材料方法第88-93页
  动物模型第88页
  细胞培养和处理第88-89页
  血清总RNA的提取第89页
  微囊泡的提取和注射第89页
  miRNA和mRNA的实时定量PCR(Q-PCR)第89-90页
  蛋白免疫印迹第90-91页
  明胶酶谱分析第91-92页
  间接免疫荧光第92页
  数据分析第92-93页
 结果第93-97页
  EPO减轻梗阻肾小管基底膜完整性的破坏第93页
  EPO上调血清微囊泡中miR-144的含量第93页
  EPO小鼠血清的微囊泡调节肾间质成纤维细胞中tPA的表达和MMP-9的活性第93-94页
  EPO小鼠血清的微囊泡抑制TGF-β1诱导的间质成纤维细胞中tPA的表达增高和MMP-9的活化第94页
  EPO小鼠血清的微囊泡减轻梗阻肾小管基底膜完整性的破坏第94页
  过表达miR-144下调肾间质成纤维细胞中tPA的表达和MMP-9的活性第94-95页
  抑制miR-144上调肾间质成纤维细胞中tPA的表达和MMP-9的活性第95页
  过表达miR-144抑制TGF-β1诱导的间质成纤维细胞中tPA的表达增高和MMP-9的活化第95页
  抑制miR-144加重TGF-β1诱导的间质成纤维细胞中tPA的表达增高和MMP-9的活化第95-97页
 讨论第97-102页
 参考文献第102-106页
 图和说明第106-114页
总结第114-116页
文献综述微囊泡介导的细胞间通讯在疾病中的作用第116-148页
 参考文献第132-148页
缩略词第148-150页
攻读博士学位期间发表的期刊论文第150-152页
攻读博士学位期间参加学术会议的论文第152-153页
攻读博士学位期间的科研成果获奖第153-154页
攻读博士学位期间承担的科研项目第154-155页
致谢第155页

 
论文编号BS2268927,这篇论文共155
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