缩略词表 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第12-17页 |
材料与方法 | 第17-29页 |
1 材料及来源 | 第17-20页 |
1.1 质粒及CRISPR /Cas9引导序列 | 第17页 |
1.2 细胞、病毒、菌株 | 第17页 |
1.3 常用试剂 | 第17-19页 |
1.4 主要仪器设备 | 第19页 |
1.5 常用溶液配方 | 第19-20页 |
2 实验方法 | 第20-29页 |
2.1 细胞培养 | 第20页 |
2.2 免疫沉淀 | 第20-21页 |
2.3 Western Blot | 第21页 |
2.4 CRISPR/Cas9构建基因敲除细胞 | 第21-22页 |
2.5 核酸类分子刺激细胞 | 第22页 |
2.6 实时荧光定量PCR(Q-PCR) | 第22-24页 |
2.7 cGAMP检测 | 第24-25页 |
2.8 DNA结合实验 | 第25-26页 |
2.9 HSV病毒扩增及滴度测定 | 第26页 |
2.10 数据处理 | 第26-29页 |
实验结果 | 第29-45页 |
1 cGAS相互作用蛋白质的鉴定 | 第29页 |
2 G3BP1与cGAS发生相互作用 | 第29-31页 |
3 G3BP1稳定敲除细胞系的构建 | 第31页 |
4 G3BP1缺失特异性抑制胞浆DNA诱导的I型干扰素产生 | 第31-39页 |
4.1 G3BP1缺失抑制胞浆DNA诱导的I型干扰素表达 | 第32页 |
4.2 G3BP1缺失抑制胞浆DNA诱导的I型干扰素转录 | 第32-34页 |
4.3 G3BP1缺失抑制胞浆DNA诱导的干扰素通路激活 | 第34-37页 |
4.4 G3BP1缺失不影响cGAMP诱导的干扰素信号通路激活 | 第37-38页 |
4.5 G3BP1缺失抑制cGAS酶活性 | 第38-39页 |
5 G3BP1调控cGAS与胞浆DNA的结合 | 第39-41页 |
5.1 G3BP1缺失影响cGAS与胞浆DNA的结合能力 | 第39-41页 |
5.2 G3BP1缺失降低细胞对胞浆DNA刺激的敏感性 | 第41页 |
6 G3BP1增强细胞对DNA病毒的免疫能力 | 第41-45页 |
6.1 G3BP1缺失抑制DNA病毒HSV1诱导的I型干扰素产生 | 第41-42页 |
6.2 G3BP1缺失促进HSV1的复制和分泌 | 第42-45页 |
讨论 | 第45-47页 |
结论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附表 | 第53-57页 |
个人简历 | 第57-59页 |
致谢 | 第59页 |