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未发育成熟颅骨缺损修补的致畸性研究及颅骨发育机制的研究
 
     论文目录
 
中文摘要第4-7页
Abstract第7-10页
缩略语/符号说明第16-17页
前言第17-20页
    研究现状、成果第17-18页
    研究目的、方法第18-20页
一、建立动物模型探讨金属材料对发育期颅骨生长的限制性研究第20-33页
    1.1 对象和方法第20-25页
        1.1.1 实验材料第20-21页
            1.1.1.1 实验动物第20页
            1.1.1.2 实验器材和仪器第20-21页
        1.1.2 实验方法第21-25页
            1.1.2.1 动物分组和处理第21页
            1.1.2.2 手术方法第21-22页
            1.1.2.3 实验动物行为学观察第22页
            1.1.2.4 实验动物头围的测量第22页
            1.1.2.5 颅骨CT扫描及三维重建第22-23页
            1.1.2.6 实验动物体重的测量第23页
            1.1.2.7 实验动物脑容积和重量的测量第23页
            1.1.2.8 颅骨组织显微镜下观察第23-24页
            1.1.2.9 脑组织显微镜下观察第24-25页
            1.1.2.10 统计学分析第25页
    1.2 结果第25-29页
        1.2.1 实验动物的行为学表现第25-26页
        1.2.2 实验动物头围的变化第26页
        1.2.3 游离钛钉间位置的变化第26-27页
        1.2.4 实验动物体重的变化第27-28页
        1.2.5 实验动物脑组织体积和重量结果第28页
        1.2.6 颅骨多点取材显微镜下观察结果第28-29页
        1.2.7 脑组织显微镜下观察结果第29页
    1.3 讨论第29-32页
        1.3.1 颅骨缺损对小儿的影响及早期修补的意义第29-30页
        1.3.2 修补材料在发育期颅骨内移动方式第30-31页
        1.3.3 小儿颅骨缺损早期修补的前景第31-32页
    1.4 小结第32-33页
二、建立动物模型探讨小儿大骨窗颅骨缺损早期修补的可行性研究第33-50页
    2.1 对象和方法第34-36页
        2.1.1 实验材料第34页
            2.1.1.1 实验动物第34页
            2.1.1.2 实验器材和仪器第34页
        2.1.2 实验方法第34-36页
            2.1.2.1 动物分组第34页
            2.1.2.2 确定动物模型颅骨缺损的面积第34-35页
            2.1.2.3 手术方法第35页
            2.1.2.4 实验动物行为学观察第35页
            2.1.2.5 颅骨CT扫描及三维重建第35-36页
            2.1.2.6 实验动物头围的测量第36页
            2.1.2.7 实验动物体重的测量第36页
            2.1.2.8 缺损区新生骨生长情况第36页
            2.1.2.9 实验动物脑组织体积和重量的测量第36页
            2.1.2.10 实验动物脑组织显微镜下观察第36页
            2.1.2.11 统计学分析第36页
    2.2 结果第36-41页
        2.2.1 实验动物的行为学表现第36-37页
        2.2.2 实验动物头颅CT扫描结果第37页
        2.2.3 实验动物头围的变化第37-39页
        2.2.4 实验动物体重的变化第39页
        2.2.5 实验动物缺损区新生骨生长情况及结构特点第39-40页
        2.2.6 实验动物脑组织体积和重量的结果第40页
        2.2.7 实验动物脑组织显微镜下观察结果第40-41页
    2.3 讨论第41-49页
        2.3.1 小儿颅骨缺损修补的现状第41-43页
        2.3.2 小儿颅骨缺损早期修补致畸的危险因素第43页
        2.3.3 颅骨的自愈现象分析第43-45页
        2.3.4 钛网作为颅骨缺损修补材料的临床应用第45-46页
        2.3.5 小儿颅骨缺损的修补治疗及并发症的预防第46-48页
        2.3.6 颅骨缺损综合征发生因素第48-49页
    2.4 小结第49-50页
三、microRNA-539在颅骨成骨细胞发育过程中的研究第50-75页
    3.1 实验对象第50-52页
        3.1.1 细胞系第50页
        3.1.2 实验仪器和试剂第50-52页
            3.1.2.1 主要实验仪器第50-51页
            3.1.2.2 主要实验试剂第51-52页
    3.2 实验方法第52-65页
        3.2.1 试剂的配制第52-54页
        3.2.2 细胞培养第54页
        3.2.3 RT-PCR第54-58页
            3.2.3.1 提取总RNA第54页
            3.2.3.2 分光光度计测定总RNA浓度第54-55页
            3.2.3.3 琼脂糖凝胶电泳检测总RNA质量第55页
            3.2.3.4 逆转录产生cDNA第55-56页
            3.2.3.5 引物设计第56页
            3.2.3.6 DLx2调控的mRNA测定第56-57页
            3.2.3.7 miRNA-539测定第57-58页
        3.2.4 WesternBlot测定DLx2调控蛋白第58-62页
            3.2.4.1 提取细胞总蛋白第58-59页
            3.2.4.2 测定细胞总蛋白量第59页
            3.2.4.3 配制10%的PAGE凝胶第59-60页
            3.2.4.4 配制4%浓缩胶第60页
            3.2.4.5 样本处理第60页
            3.2.4.6 电泳第60-61页
            3.2.4.7 转膜第61页
            3.2.4.8 封闭、孵育抗体第61-62页
            3.2.4.9 显色曝光、结果分析第62页
        3.2.5 miRNA-539慢病毒稳定表达载体(pre-miR-539)的构建第62页
        3.2.6 荧光素酶报告实验第62-63页
            3.2.6.1 荧光素酶报告基因载体的构建第62-63页
            3.2.6.2 细胞转染第63页
            3.2.6.3 Dual-Luciferase报告基因检测系统操作步骤第63页
                3.2.6.3.1 试剂准备第63页
                3.2.6.3.2 细胞裂解第63页
                3.2.6.3.3 检测样品第63页
                3.2.6.3.4 数据分析第63页
        3.2.7 WesternBlot测定转染后DLx2调控的蛋白水平第63-64页
        3.2.8 RT-PCR测定转染后miRNA-539和DLx2调控的mRNA水平第64页
        3.2.9 碱性磷酸酶染色第64-65页
            3.2.9.1 原理第64页
            3.2.9.2 步骤第64-65页
        3.2.10 茜素红染色第65页
            3.2.10.1 工作原理第65页
            3.2.10.2 配制工作液第65页
            3.2.10.3 操作步骤第65页
        3.2.11 定量和统计学分析第65页
    3.3 结果第65-73页
        3.3.1 miRNA-539在成骨细胞分化和矿化过程中是下调的第65-66页
        3.3.2 DLx2基因在成骨细胞分化和矿化过程中是上调的第66-68页
        3.3.3 miRNA-539的高表达抑制DLx2的表达第68-71页
        3.3.4 miRNA-539的高表达抑制成骨细胞矿化过程第71-72页
        3.3.5 DLx2可能是miRNA-539的直接靶目标第72-73页
    3.4 讨论第73-74页
    3.5 小结第74-75页
全文结论第75-76页
论文创新点第76-77页
参考文献第77-86页
发表论文和参加科研情况说明第86-87页
综述 儿童颅骨缺损早期修复的可行性及临床研究第87-94页
    综述参考文献第92-94页
致谢第94-95页
个人简历第95页

 
 
论文编号BS3989627,这篇论文共95
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