| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语(Abbreviations) | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| ·弗氏链霉菌 | 第12-19页 |
| ·简介 | 第12-13页 |
| ·Tylosin生物合成 | 第13-19页 |
| ·泰乐内酯的生物合成 | 第13-15页 |
| ·泰乐内酯的后修饰(Post-PKS tailoring) | 第15-17页 |
| ·tylE和tylF甲基转移酶 | 第17页 |
| ·tlrA、tlrB、tlrD和tlrC泰乐菌素抗性基因 | 第17-18页 |
| ·泰乐菌素的生物调控 | 第18-19页 |
| ·metF和metK辅助基因 | 第19页 |
| ·泰乐菌素的衍生物 | 第19-22页 |
| ·替米考星 | 第20-22页 |
| ·替米考星概述 | 第20-21页 |
| ·替米考星的抗菌活性 | 第21页 |
| ·替米考星的毒性 | 第21页 |
| ·替米考星的化学合成 | 第21-22页 |
| ·乙酰异戊酰泰乐菌素(AIV) | 第22页 |
| ·耐热链霉菌 | 第22-24页 |
| ·本课题研究依据、目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-37页 |
| ·材料 | 第26-30页 |
| ·菌株 | 第26-27页 |
| ·质粒 | 第27-28页 |
| ·PCR引物 | 第28页 |
| ·培养基和生化试剂 | 第28-30页 |
| ·仪器设备 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-37页 |
| ·菌种培养及保藏 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的小量提取 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及质粒的化学转化 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的少量快速提取及检测 | 第32页 |
| ·链霉菌基因组DNA的少量快速提取 | 第32页 |
| ·PCR反应体系 | 第32-33页 |
| ·DNA片段的回收 | 第33-34页 |
| ·载体的去磷酸化 | 第34页 |
| ·DNA连接 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌与链霉菌之间的属间接合转移 | 第35页 |
| ·发酵培养 | 第35-36页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第36页 |
| ·AIV的测定 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-49页 |
| ·摇瓶发酵工艺优化 | 第37-39页 |
| ·转种量对转化率的影响 | 第37页 |
| ·摇瓶装量对转化率的影响 | 第37-38页 |
| ·种龄对转化率影响 | 第38-39页 |
| ·发酵培养周期对转化率影响 | 第39页 |
| ·acyB1-B2基因的整合表达 | 第39-42页 |
| ·构建acyB1-B2基因重组质粒 | 第39-40页 |
| ·PCR克隆acyB1-B2基因 | 第39页 |
| ·构建acyB1-B2基因表达载体 | 第39-40页 |
| ·acyB1-B2基因重组质粒通过接合转移导入耐热链霉菌 | 第40页 |
| ·阳性菌株的筛选和PCR验证 | 第40-41页 |
| ·acyB1-B2基因整合表达对耐热链霉菌转化泰乐菌素的影响 | 第41-42页 |
| ·红霉素抗性基因ermE的整合表达 | 第42-45页 |
| ·构建ermE基因罩组质粒 | 第42-43页 |
| ·ermE基因整合表达及验证 | 第43页 |
| ·ermE基因整合表达对耐热链霉菌转化泰乐菌素的影响 | 第43-45页 |
| ·ermE基因对生物转化泰乐菌素的影响 | 第43-44页 |
| ·泰乐菌素耐受性影响 | 第44-45页 |
| ·nsdA基因中断对耐热链霉菌转化泰乐菌素的影响 | 第45-49页 |
| ·nsdA基因中断及其PCR验证 | 第45-47页 |
| ·nsdA基因中断菌株形态变化和发酵产物的HPLC分析 | 第47-49页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第49-52页 |
| ·总结 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
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