| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 第一章 DsCystatin蛋白在革蜱中的表达及其对宿主组织蛋白酶的作用研究 | 第15-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第15页 |
| 1.2 实验方法 | 第15-25页 |
| 1.2.1 感受态细菌的制备 | 第15-16页 |
| 1.2.2 RNA的提取 | 第16页 |
| 1.2.3 RNA样品逆转录 | 第16-17页 |
| 1.2.4 PCR | 第17页 |
| 1.2.5 DNA电泳 | 第17页 |
| 1.2.6 DNA胶回收 | 第17-18页 |
| 1.2.7 质粒的转化 | 第18页 |
| 1.2.8 质粒DNA小量抽提 | 第18-19页 |
| 1.2.9 克隆构建 | 第19页 |
| 1.2.10 GST标签原核蛋白表达纯化 | 第19-21页 |
| 1.2.11 蛋白浓度测定 | 第21页 |
| 1.2.12 细胞的培养 | 第21-22页 |
| 1.2.13 免疫印迹 | 第22-23页 |
| 1.2.14 DsCystatin在蜱虫不同组织中的表达 | 第23-24页 |
| 1.2.15 DsCystatin抑制组织蛋白酶Cathepsin L， B的活性测试 | 第24页 |
| 1.2.16 DsCystatin抑制哺乳动物细胞蛋白酶活性测试 | 第24页 |
| 1.2.17 DsCystatin与组织蛋白酶Cathepsin L， B相互作用实验 | 第24-25页 |
| 1.2.18 统计学分析 | 第25页 |
| 1.3 实验结果 | 第25-27页 |
| 1.3.1 DsCystatin克隆构建和原核表达纯化 | 第25-26页 |
| 1.3.2 DsCystatin在蜱虫中表达鉴定 | 第26页 |
| 1.3.3 DsCystatin对宿主Cathepsins作用及机制 | 第26-27页 |
| 1.4 本章小结 | 第27-28页 |
| 第二章 DsCystatin蛋白对免疫细胞的作用研究 | 第28-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞提取 | 第28-29页 |
| 2.2.2 小鼠骨髓细胞提取及分化 | 第29-30页 |
| 2.2.3 酶联免疫反应 | 第30页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
| 2.2.5 DsCystatin蛋白对免疫细胞炎性细胞因子的表达的影响 | 第31页 |
| 2.2.6 DsCystatin蛋白对外来抗原的加工递呈的影响 | 第31-32页 |
| 2.2.7 DsCystatin蛋白对免疫细胞活化的影响 | 第32页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-37页 |
| 2.3.1 DsCystatin抑制炎症因子的表达 | 第32-35页 |
| 2.3.2 DsCystatin抑制抗原的降解 | 第35页 |
| 2.3.3 DsCystatin抑制免疫细胞的活化 | 第35-37页 |
| 2.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 DsCystatin蛋白的作用机制探讨 | 第38-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-41页 |
| 3.2.1 转染 | 第38-39页 |
| 3.2.2 稳转细胞系筛选 | 第39页 |
| 3.2.3 DsCystatin蛋白对NFκB的表达影响实验 | 第39页 |
| 3.2.4 双荧光素报告基因检测 | 第39-40页 |
| 3.2.5 DsCystatin蛋白在TLR4通路分子激活的NFκB中的作用 | 第40页 |
| 3.2.6 DsCystatin在LPS激活的TLR4通路中的作用 | 第40页 |
| 3.2.7 小鼠骨髓巨噬细胞的获得 | 第40页 |
| 3.2.8 核质蛋白的分离 | 第40页 |
| 3.2.9 统计学分析 | 第40-41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-43页 |
| 3.3.1 DsCystatin抑制NFκB的活化 | 第41页 |
| 3.3.2 DsCystatin蛋白在TLR4通路中的作用 | 第41-42页 |
| 3.3.3 DsCystatin抑制TLR4通路的信号分子表达 | 第42-43页 |
| 3.4 本章小结 | 第43-45页 |
| 第四章 DsCystatin蛋白在抗炎症疾病中的作用研究 | 第45-55页 |
| 4.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.2.1 DsCystatin对CFA诱导的关节炎治疗作用研究 | 第45页 |
| 4.2.2 DsCystatin在预防CFA诱导的关节炎中的作用 | 第45-46页 |
| 4.2.3 DsCystatin在细菌感染导致的关节炎中的作用 | 第46页 |
| 4.2.4 踝关节组织病理学观察 | 第46页 |
| 4.2.5 小鼠血清中Borrelia burgdorferi特异性抗体检测 | 第46-47页 |
| 4.2.6 统计学分析 | 第47页 |
| 4.3 实验结果 | 第47-54页 |
| 4.3.1 DsCystatin在CFA诱导的关节炎中的作用 | 第47-51页 |
| 4.3.2 DsCystatin在细菌性关节炎中的作用 | 第51-54页 |
| 4.4 本章小结 | 第54-55页 |
| 第五章 讨论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 综述 | 第64-79页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
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