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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--产乳糖酶基因工程菌的构建及发酵条件优化
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产乳糖酶基因工程菌的构建及发酵条件优化
 
     论文目录
 
摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第一章 引言第13-21页
    1.1 乳糖酶的分子结构与作用机制第13-14页
    1.2 乳糖酶的来源第14-15页
        1.2.1 霉菌来源的乳糖酶第14页
        1.2.2 细菌来源的乳糖酶第14-15页
        1.2.3 酵母菌来源的乳糖酶第15页
    1.3 乳糖酶的应用第15-17页
        1.3.1 治疗乳糖不耐受症第15-16页
        1.3.2 在乳制品加工工业上的应用第16-17页
        1.3.3 应用于生产低聚半乳糖第17页
    1.4 基因工程技术在乳糖酶生产中的应用第17-18页
    1.5 乳酸克鲁维酵母表达系统第18-19页
    1.6 本研究的主要内容及意义第19-21页
        1.6.1 本研究的主要内容第19-20页
        1.6.2 本研究的意义第20-21页
第二章 米曲霉乳糖酶基因的合成及其在乳酸克鲁维酵母GG799中的高效表达第21-41页
    2.1 实验材料第21-24页
        2.1.1 菌株与表达载体第21-22页
        2.1.2 主要工具酶与试剂第22页
        2.1.3 主要仪器与设备第22页
        2.1.4 主要培养基及配方第22-23页
        2.1.5 主要缓冲液及其组成第23页
        2.1.6 蛋白质电泳试剂第23-24页
        2.1.7 薄层层析试剂第24页
    2.2 实验方法第24-31页
        2.2.1 米曲霉乳糖酶基因的合成及优化第24页
        2.2.2 重组质粒pKLAC1-lacA的构建第24页
        2.2.3 线性化重组质粒的制备第24-25页
        2.2.4 K.lactis GG799 感受态细胞的制备第25-26页
        2.2.5 重组菌株的构建第26页
        2.2.6 重组菌株初筛、复筛及验证第26-29页
        2.2.7 乳糖酶活性的测定第29-31页
    2.3 结果与分析第31-39页
        2.3.1 米曲霉乳糖酶基因的合成第31-33页
        2.3.2 表达载体pKLAC1-lacA的构建及SacⅡ酶切鉴定第33-34页
        2.3.3 制备乳酸克鲁维酵母感受态细胞第34-35页
        2.3.4 重组菌株的构建第35页
        2.3.5 重组菌株的初筛第35-36页
        2.3.6 重组菌株的复筛第36-37页
        2.3.7 重组菌株生物量及产酶活性测定第37页
        2.3.8 重组菌株的PCR鉴定第37-38页
        2.3.9 重组菌株表达产物的SDS-PAGE电泳分析第38-39页
        2.3.10 乳糖水解产物的TCL分析第39页
    2.4 本章小结第39-41页
第三章 乳酸克鲁维酵母工程菌株产乳糖酶发酵条件的优化第41-54页
    3.1 实验材料第41-42页
        3.1.1 菌株第41页
        3.1.2 试剂第41页
        3.1.3 培养基第41-42页
        3.1.4 仪器第42页
    3.2 实验方法第42-44页
        3.2.1 乳糖酶活力的测定第42页
        3.2.2 菌株的活化与初筛第42页
        3.2.3 碳源对乳糖酶发酵的影响试验第42页
        3.2.4 碳源浓度对乳糖酶发酵的影响试验第42-43页
        3.2.5 氮源对乳糖酶发酵的影响试验第43页
        3.2.6 氮源浓度对乳糖酶发酵的影响试验第43页
        3.2.7 生长因子及无机盐离子对乳糖酶发酵的影响试验第43-44页
        3.2.8 正交试验设计第44页
        3.2.9 pH对乳糖酶发酵的影响试验第44页
        3.2.10 温度对乳糖酶发酵的影响试验第44页
    3.3 结果与讨论第44-53页
        3.3.1 碳源对乳糖酶发酵的影响第44-45页
        3.3.2 碳源浓度对乳糖酶发酵的影响第45-46页
        3.3.3 氮源对乳糖酶发酵的影响第46-47页
        3.3.4 氮源浓度对乳糖酶发酵的影响第47页
        3.3.5 生长因子及无机盐离子对乳糖酶发酵的影响第47-49页
        3.3.6 正交试验结果第49-51页
        3.3.7 pH对乳糖酶发酵的影响实验第51-52页
        3.3.8 温度对乳糖酶发酵的影响实验第52-53页
    3.4 本章小结第53-54页
第四章 重组乳糖酶基本酶学性质的研究第54-59页
    4.1 实验材料第54-55页
        4.1.1 菌株第54页
        4.1.2 试剂第54页
        4.1.3 培养基第54页
        4.1.4 仪器第54页
        4.1.5 缓冲液第54-55页
    4.2 实验方法第55页
        4.2.1 乳糖酶活力的测定第55页
        4.2.2 重组乳糖酶最适反应温度的测定第55页
        4.2.3 重组乳糖酶最适反应pH的测定第55页
        4.2.4 重组乳糖酶的低温保存稳定性第55页
    4.3 结论与讨论第55-57页
        4.3.1 重组乳糖酶最适反应温度的测定第55-56页
        4.3.2 重组乳糖酶最适反应pH的测定第56-57页
        4.3.3 重组乳糖酶的低温保存稳定性第57页
    4.4 本章小结第57-59页
总结与展望第59-61页
    总结第59-60页
    展望第60-61页
参考文献第61-67页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第67-69页
致谢第69页

 
 
论文编号BS4143329,这篇论文共69
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