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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--耐热乳糖酶基因克隆、表达及酶学性质研究
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耐热乳糖酶基因克隆、表达及酶学性质研究
 
     论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 绪论第12-24页
   ·乳糖酶的性质第13-15页
   ·乳糖酶的高级结构和可能的作用机制第15-16页
   ·乳糖酶的应用第16-17页
     ·在乳制品方面的应用第16页
     ·生产低聚半乳糖第16-17页
     ·乳糖酶基因在基因学中的应用第17页
       ·在构建表达载体中的应用第17页
       ·在转基因研究和基因治疗方面的应用第17页
     ·作为报告基因研究表达系统中增强序列、调控序列等功能第17页
   ·乳糖酶的研究第17-20页
     ·乳糖酶固定化的研究第18页
     ·耐热乳糖酶的研究第18-20页
       ·耐热乳糖酶的特点第19-20页
   ·基因工程技术在乳糖酶中的应用第20-23页
     ·原核表达系统的应用第20页
     ·真核表达系统的应用第20-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
第二章 凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans T242)耐热乳糖酶基因的克隆第24-37页
     ·材料与方法第24-33页
     ·材料第24-25页
       ·菌种与质粒第24页
       ·主要试剂和培养基第24-25页
       ·主要仪器第25页
     ·方法第25-33页
       ·基因组DNA的提取第25-26页
       ·基因组DNA纯度检测第26页
       ·乳糖酶基因的验证实验第26-27页
       ·乳糖酶基因引物的确定第27-28页
       ·乳糖酶基因5'端与3'端引物的验证第28-29页
       ·乳糖酶基因的PCR扩增第29-30页
       ·乳糖酶基因的克隆第30-31页
       ·筛选阳性克隆子第31页
       ·乳糖酶基因突变点PCR修复实验第31-32页
       ·经修复的质粒转化E.coli HST08感受态细胞第32页
       ·乳糖酶基因的亚克隆第32-33页
       ·筛选阳性克隆子第33页
   ·结果与讨论第33-36页
     ·基因组DNA的提取第33页
     ·乳糖酶基因的PCR扩增第33-36页
     ·乳糖酶基因的亚克隆第36页
   ·小结第36-37页
第三章 凝结芽孢杆菌(Bacillus coagu/ans T242)耐热乳糖酶基因的原核表达第37-48页
   ·材料与方法第37-42页
     ·材料第37-39页
       ·菌种与质粒第37页
       ·主要试剂和培养基第37-39页
       ·主要仪器第39页
     ·方法第39-42页
       ·乳糖酶基因在大肠杆菌中的原核表达第39-40页
       ·乳糖酶表达产物SDS-PAGE检测第40页
       ·乳糖酶的可溶性表达第40页
       ·乳糖酶诱导条件优化第40-41页
       ·乳糖酶活力测定:ONPG法第41页
       ·蛋白含量测定:Folin-酚法第41页
       ·乳糖酶的纯化第41-42页
   ·结果与讨论第42-47页
     ·乳糖酶基因在大肠杆菌中的原核表达第42-44页
       ·乳糖酶表达产物SDS-PAGE检测第42-43页
       ·乳糖酶的可溶性表达第43-44页
     ·乳糖酶活力测定第44页
     ·乳糖酶诱导条件优化第44-46页
     ·乳糖酶的纯化第46-47页
   ·小结第47-48页
第四章 原核表达的耐热乳糖酶酶学性质研究第48-57页
   ·材料与方法第48-51页
     ·材料第48页
       ·实验材料第48页
       ·主要试剂和培养基第48页
     ·方法第48-51页
       ·乳糖酶样品的制备第48页
       ·乳糖酶活力标准曲线绘制第48-49页
       ·蛋白含量标准曲线绘制:Folin-酚法第49页
       ·乳糖酶最适pH的测定第49-50页
       ·乳糖酶最适温度的测定第50页
       ·乳糖酶pH稳定性测定第50页
       ·乳糖酶热稳定性测定第50页
       ·金属离子和相关试剂对乳糖酶活性的影响第50页
       ·乳糖酶的米氏常数Km和最大反应速率Vmax的测定第50-51页
   ·结果与讨论第51-55页
     ·乳糖酶酶活力标准曲线绘制第51页
     ·蛋白含量测定标准曲线绘制第51-52页
     ·乳糖酶最适pH第52页
     ·乳糖酶最适温度第52-53页
     ·乳糖酶的pH稳定性第53页
     ·乳糖酶的热稳定性第53-54页
     ·金属离子和相关试剂对乳糖酶活性的影响第54-55页
     ·乳糖酶的米氏常数Km和最大反应速率Vmax的测定第55页
   ·小结第55-57页
第五章 结论与展望第57-59页
   ·结论第57-58页
   ·展望第58-59页
参考文献第59-63页
致谢第63页

 
 
论文编号BS2221503,这篇论文共63
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