| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| 1.1 糖基磷脂酰肌醇（GPI）及GPI锚定蛋白（GPI-APs）简介 | 第7-8页 |
| 1.2 糖基磷脂酰肌醇肌醇脱酰酶（GPI inositol-deacylase）PGAP1简介 | 第8-10页 |
| 1.3 利用哺乳动物单倍体细胞和基因诱捕技术进行全基因组筛选的可行性 | 第10-12页 |
| 1.3.1 人类单倍体HAP1细胞系 | 第10-11页 |
| 1.3.2 基因诱捕技术 | 第11-12页 |
| 1.4 本论文研究意义和主要内容 | 第12-13页 |
| 1.4.1 本论文的研究意义 | 第12页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-18页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第13-14页 |
| 2.1.2 抗体、酶及试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.3 培养基、溶液的配制 | 第15-17页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-25页 |
| 2.2.1 大肠杆菌XL-10 Gold感受态细胞制备 | 第18页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.3 CRISPR/Cas9基因敲除质粒的构建 | 第20页 |
| 2.2.4 基因定点突变 | 第20-22页 |
| 2.2.5 细胞的培养和转染 | 第22页 |
| 2.2.6 电转化 | 第22页 |
| 2.2.7 逆转录病毒的包装和转染 | 第22-23页 |
| 2.2.8 基因诱捕HAP1突变细胞群的构建 | 第23页 |
| 2.2.9 PI-PLC处理及流式细胞分析 | 第23-24页 |
| 2.2.10 蛋白质免疫印迹 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-39页 |
| 3.1 利用基因诱捕技术全基因组筛选GPI肌醇脱酰化相关基因 | 第25-29页 |
| 3.1.1 基因诱捕HAP1突变体细胞群的构建 | 第25-26页 |
| 3.1.2 基因测序分析基因诱捕的GPI肌醇脱酰化相关候选基因 | 第26-29页 |
| 3.2 GPI肌醇脱酰化相关基因的鉴定 | 第29-33页 |
| 3.2.1 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除GPI肌醇脱酰化相关基因 | 第29-32页 |
| 3.2.2 过表达hPGAP1单克隆基因敲除细胞的表面蛋白对PI-PLC的敏感性研究 | 第32-33页 |
| 3.3 GPI肌醇脱酰化相关基因的功能研究 | 第33-39页 |
| 3.3.1 钙联蛋白CANX的凝集素活性对GPI肌醇脱酰化的影响 | 第33-35页 |
| 3.3.2 α-葡萄糖苷酶Ⅰ的酶活对GPI肌醇脱酰化的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.3 N-聚糖依赖途径中相关基因调控GPI肌醇脱酰化的假想模型 | 第36-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 附录 | 第45-49页 |
| 作者在硕士期间发表的文章 | 第49页 |
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