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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--普鲁兰酶基因挖掘、酶学性质及结构域进化研究
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普鲁兰酶基因挖掘、酶学性质及结构域进化研究
 
     论文目录
 
摘要第5-6页
Abstract第6页
第1章 前言第10-21页
    1.1 淀粉概述第10-12页
        1.1.1 淀粉酶介绍第10-11页
        1.1.2 淀粉糖化过程中酶的作用第11-12页
    1.2 普鲁兰酶第12-16页
        1.2.1 普鲁兰酶分类和来源第12-14页
        1.2.2 普鲁兰酶的异源表达第14-15页
        1.2.3 普鲁兰酶的相关应用第15-16页
    1.3 枯草芽孢杆菌表达系统介绍第16-17页
    1.4 普鲁兰酶结构分析及进化研究第17-19页
        1.4.1 Ⅰ型普鲁兰酶分析第17-18页
        1.4.2 普鲁兰酶进化研究第18-19页
    1.5 课题主要内容及意义第19-21页
第2章 普鲁兰酶基因分析及克隆第21-42页
    2.1 引言第21页
    2.2 材料与方法第21-25页
        2.2.1 菌株第21页
        2.2.2 培养基第21-22页
        2.2.3 试剂和酶第22-23页
        2.2.4 试剂盒和仪器第23-24页
        2.2.5 基因克隆PCR引物第24-25页
    2.3 实验方法及原理第25-28页
        2.3.1 原始菌株普鲁兰酶酶活验证第25页
        2.3.2 原始菌株在其最适温度下的生长曲线第25页
        2.3.3 引物设计及基因分析第25页
        2.3.4 基因组DNA提取及PCR第25-26页
        2.3.5 琼脂糖凝胶电泳第26-27页
        2.3.6 目的产物胶回收第27页
        2.3.7 TA克隆第27-28页
    2.4 实验结果与讨论第28-41页
        2.4.1 原始菌普鲁兰酶酶活验证第28-29页
        2.4.2 原始菌生长曲线第29-30页
        2.4.3 普鲁兰酶基因克隆及分析第30-41页
    2.5 本章小结第41-42页
第3章 普鲁兰酶的异源表达第42-68页
    3.1 引言第42页
    3.2 材料与方法第42-48页
        3.2.1 菌株与质粒第42-44页
        3.2.2 培养基与各种溶液第44-46页
        3.2.3 试剂第46-47页
        3.2.4 耗材和仪器第47页
        3.2.5 PCR引物第47-48页
    3.3 实验方法和步骤第48-55页
        3.3.1 目的基因胶回收第48页
        3.3.2 目的基因纯化第48页
        3.3.3 质粒DNA小量提取第48-49页
        3.3.4 酶切连接体系第49页
        3.3.5 大肠杆菌感受态转化第49-50页
        3.3.6 枯草芽孢杆菌感受态制备及其转化第50页
        3.3.7 菌落PCR和双酶切验证第50-51页
        3.3.8 SDS-PAGE凝胶第51页
        3.3.9 重组蛋白诱导表达第51-52页
        3.3.10 普鲁兰酶酶活测定方法第52页
        3.3.11 葡萄糖标准曲线第52-53页
        3.3.12 重组蛋白纯化第53页
        3.3.13 重组普鲁兰酶酶学性质第53-55页
    3.4 结果与讨论第55-67页
        3.4.1 重组质粒酶切验证第55页
        3.4.2 目的蛋白诱导表达与纯化第55-60页
        3.4.3 温度和pH对酶活的影响第60-63页
        3.4.4 化学试剂和金属离子对酶活的影响第63-65页
        3.4.5 重组普鲁兰酶的底物谱及终产物分析第65-67页
    3.5 本章小结第67-68页
第4章 普鲁兰酶结构域拼接对耐热性的提高第68-74页
    4.1 引言第68页
    4.2 材料与方法第68-69页
        4.2.1 菌株与质粒第68页
        4.2.2 PCR引物第68页
        4.2.3 结构域拼接过程第68页
        4.2.4 重组菌诱导及重组蛋白的酶学性质第68-69页
        4.2.5 海藻酸钠包埋法固定化第69页
    4.3 结果与讨论第69-73页
        4.3.1 拼接结构域重组质粒酶切验证第69页
        4.3.2 重组拼接酶的诱导表达与纯化第69-71页
        4.3.3 酶学性质比较第71-73页
        4.3.4 固定化后耐热性改变第73页
    4.4 本章小结第73-74页
第5章 总结与展望第74-76页
    5.1 总结第74-75页
    5.2 展望第75-76页
参考文献第76-83页
致谢第83-84页
附录一第84-85页
附录二第85-91页

 
 
论文编号BS3382385,这篇论文共91
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