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球孢白僵菌甘露糖转移酶、组蛋白乙酰转移酶、叉头转录因子及6-磷酸海藻糖合成酶的功能解析及其同生物防治潜能的关联
 
     论文目录
 
致谢第6-10页
摘要第10-14页
1 真菌甘露糖转移酶、组蛋白乙酰转移酶、叉头转录因子及6-磷酸海藻糖合成酶的研究概况第14-24页
    1.1 PMT家族甘露糖转移酶第14-18页
    1.2 Ktr家族甘露糖转移酶第18-19页
    1.3 组蛋白乙酰转移酶Mst2第19-20页
    1.4 叉头转录因子FKH第20-21页
    1.5 6-磷酸海藻糖合成酶第21-22页
    1.6 展望第22-24页
2 球孢白僵菌PMT家族甘露糖转移酶的功能解析第24-44页
    2.1 材料第24-25页
        2.1.1 菌株及培养条件第24-25页
        2.1.2 试剂第25页
    2.2 方法第25-32页
        2.2.1 真菌核酸提取第25-26页
        2.2.2 PMT家族的基因克隆与分析第26页
        2.2.3 PMT成员的转录动态分析第26-27页
        2.2.4 单基因敲除/回补及干扰突变株的构建与鉴定第27-29页
        2.2.5 甘露糖转移酶的酶活检测第29-30页
        2.2.6 表型实验第30-31页
        2.2.7 细胞壁的观察与成分变化测定第31-32页
        2.2.8 数据统计与分析第32页
    2.3 结果与分析第32-41页
        2.3.1 球孢白僵菌PMT家族的结构、分类与转录表达特征第32-34页
        2.3.2 Pmt突变株的鉴定第34-35页
        2.3.3 Pmt单基因敲除或干扰降低甘露糖转移酶活性第35页
        2.3.4 Pmt单基因敲除或干扰影响营养生长、产孢及孢子萌发第35-38页
        2.3.5 Pmt单基因敲除或干扰菌株对化学胁迫更敏感第38-39页
        2.3.6 Pmt单基因敲除或干扰削弱生物防治潜能第39-41页
        2.3.7 Pmt单基因敲除或干扰使细胞壁完整性受损第41页
    2.4 讨论第41-44页
3 球孢白僵菌KTR家族α-1,2甘露糖转移酶的功能比较第44-57页
    3.1 材料和方法第44-46页
        3.1.1 菌株、培养基和试剂第44-45页
        3.1.2 不同营养条件下菌株生长速率的测定第45页
        3.1.3 正常生长、产孢和孢子性状的测定第45页
        3.1.4 不同化学胁迫下菌落生长速率和孢子萌发率测定第45页
        3.1.5 细胞壁受损程度观察与测定第45-46页
        3.1.6 毒力测定第46页
    3.2 结果与分析第46-55页
        3.2.1 Ktr家族蛋白的结构特征第46-47页
        3.2.2 Ktr家族基因缺失对球孢白僵菌营养生长的影响第47-49页
        3.2.3 ktr缺失对无性发育和分生孢子性状的影响第49-51页
        3.2.4 ktr缺失影响孢壁完整性第51-53页
        3.2.5 ktr缺失影响多胁迫应答和毒力第53-55页
    3.3 讨论第55-57页
4 球孢白僵菌组蛋白乙酰转移酶Mst2的功能解析第57-73页
    4.1 材料第57-58页
        4.1.1 菌株及其培养条件第57-58页
        4.1.2 试剂及试剂盒第58页
    4.2 方法第58-63页
        4.2.1 球孢白僵菌Mst2的鉴定与序列分析第58页
        4.2.2 Mst2敲除和回补菌株的构建与鉴定第58-59页
        4.2.3 Western杂交第59页
        4.2.4 表型分析第59-63页
    4.3 结果与分析第63-70页
        4.3.1 球孢白僵菌Mst2的基本特征及其突变菌株第63页
        4.3.2 Mst2缺失削弱组蛋白H3K14的乙酰化第63-64页
        4.3.3 Mst2缺失改变芽生孢子产量、大小、复杂度、细胞周期及DNA损伤修复第64-66页
        4.3.4 Mst2缺失降低分生孢子产量及活力第66页
        4.3.5 Mst2缺失影响营养生长和抗逆性状第66-68页
        4.3.6 Mst2缺失削弱球孢白僵菌的生物防治潜能第68-69页
        4.3.7 Mst2缺失降低抗逆蛋白活性、胞内海藻糖及露醇积累含量及孢子疏水性第69页
        4.3.8 Mst2缺失影响表型相关基因的转录表达第69-70页
    4.4 讨论第70-73页
5 球孢白僵菌叉头转录因子Fkh2的转录调控与生物防治潜能的关系第73-88页
    5.1 材料第74页
        5.1.1 菌株及其培养条件第74页
        5.1.2 试剂及试剂盒第74页
    5.2 方法第74-78页
        5.2.1 球孢白僵菌Fkh2基因的克隆与序列分析第74页
        5.2.2 Fkh2敲除/回补菌株的构建和鉴定第74-75页
        5.2.3 表型分析第75-78页
    5.3 结果与分析第78-84页
        5.3.1 球孢白僵菌中Fkah2的基本特征及敲除、回补菌株的构建第78页
        5.3.2 Fkh2缺失改变芽生孢子的细胞周期、产量、大小及复杂度第78-79页
        5.3.3 Fkh2缺失改变菌丝分隔模式和相关基因的转录第79-80页
        5.3.4 Fkh2缺失影响对不同碳氮源的利用率及营养胁迫的耐受力第80-82页
        5.3.5 Fkh2缺失促进产孢但降低孢子活力第82-83页
        5.3.6 Fkh2缺失影响球孢白僵菌的抗逆性状及毒力第83-84页
        5.3.7 Fkh2缺失改变表型相关基因的转录水平及其蛋白活性第84页
    5.4 讨论第84-88页
6 球孢白僵菌两个6磷酸海藻糖合成酶的功能比较第88-103页
    6.1 材料第89页
        6.1.1 菌株及其培养条件第89页
        6.1.2 试剂及试剂盒第89页
    6.2 方法第89-91页
        6.2.1 球孢白僵菌TpsA和TpsB的鉴定与序列分析第89页
        6.2.2 tpsA和tpsB敲除和回补菌株的构建第89-90页
        6.2.3 6-磷酸海藻糖合成酶的酶活检测第90-91页
        6.2.4 表型分析第91页
    6.3 结果与分析第91-98页
        6.3.1 球孢白僵菌中TpsA和TpsB的特征第91页
        6.3.2 tpsA和tpsB的缺失降低或消除细胞内TPS酶活、海藻糖及甘露醇积累第91-93页
        6.3.3 tpsA和tpsB缺失影响碳氮源的利用和营养生长第93-94页
        6.3.4 tpsA和tpsB缺失影响分生孢子产量和质量第94-95页
        6.3.5 tpsA和tpsB缺失影响胞壁结构和完整性第95-96页
        6.3.6 tpsA和tpsB缺失株对多种胁迫更敏感第96-98页
        6.3.7 tpsA和tpsB缺失削弱球孢白僵菌的生物防治潜能第98页
    6.4 讨论第98-103页
7 结语第103-105页
参考文献第105-118页
Summary第118-121页
附录:博士期间的主要成果第122页

 
 
论文编号BS3309286,这篇论文共122
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