摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 微孢子虫 | 第12-13页 |
1.2 微孢子虫生物学特性与寄生机制 | 第13-15页 |
1.2.1 微孢子虫的结构与发芽的关系 | 第13-15页 |
1.2.2 微孢子虫的生活史特征 | 第15页 |
1.3 家蚕微孢子虫概述 | 第15-17页 |
1.4 SERPIN概述 | 第17-22页 |
1.4.1 serpin的简介 | 第17-18页 |
1.4.2 serpin作用方式的简介 | 第18-22页 |
第二章 引言 | 第22-26页 |
2.1 研究背景 | 第22页 |
2.2 研究目的及意义 | 第22-23页 |
2.3 研究内容 | 第23页 |
2.4 技术路线 | 第23-26页 |
第三章 家蚕微孢子虫serpin基因NbSPN13的序列与转录情况分析 | 第26-38页 |
3.1 材料与方法 | 第26-28页 |
3.1.1 实验材料及相关软件 | 第26页 |
3.1.2 方法 | 第26-28页 |
3.2 结果与分析 | 第28-35页 |
3.2.1 家蚕微孢子虫serpin基因研究进展及NbSPN13基因序列的进化分析 | 第28-31页 |
3.2.2 家蚕微孢子虫NbSPN13蛋白亚细胞定位预测 | 第31-33页 |
3.2.3 NbSPN13基因转录结果 | 第33-35页 |
3.3 结论与讨论 | 第35-38页 |
第四章 NbSPN13基因的原核表达及抗体制备 | 第38-50页 |
4.1 材料与方法 | 第38-44页 |
4.1.1 菌株及实验动物 | 第38页 |
4.1.2 所需试剂及配制方法 | 第38-40页 |
4.1.3 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第40-41页 |
4.1.4 家蚕微孢子虫基因组的提取 | 第41页 |
4.1.5 家蚕微孢子虫总蛋白提取 | 第41-42页 |
4.1.6 引物设计及⊿NbSPN13基因的PCR扩增 | 第42页 |
4.1.7 pGEX-⊿NbSPN13表达载体的构建 | 第42-43页 |
4.1.8 pGEX-⊿NbSPN13原核表达及抗体制备 | 第43-44页 |
4.2 结果与分析 | 第44-48页 |
4.2.1 pGEX-ΔNbSPN13原核表达载体的构建 | 第44-45页 |
4.2.2 ⊿NbSPN13的原核表达 | 第45-46页 |
4.2.3 ANbSPN13蛋白的纯化及小鼠多克隆抗体制备及检测 | 第46-48页 |
4.3 结论与讨论 | 第48-50页 |
第五章 NbSPN13蛋白在酿酒酵母和家蚕微孢子虫中的定位分析 | 第50-62页 |
5.1 材料与方法 | 第50-56页 |
5.1.1 所需菌株 | 第50页 |
5.1.2 所需仪器 | 第50页 |
5.1.3 所需试剂及培养基配制方法 | 第50-52页 |
5.1.4 NbSPN13蛋白在酿酒酵母中的定位 | 第52-55页 |
5.1.5 NbSPN13蛋白在家蚕微孢子虫的间接免疫荧光定位(IFA) | 第55-56页 |
5.2 结果与分析 | 第56-60页 |
5.2.1 pUG35-NbSPN13,pUG35-⊿NbSPN13酵母定位载体的构建 | 第56页 |
5.2.2 pUG35-NbSPN13,pUG35-⊿NbSPN13重组酵母基因组检测 | 第56-57页 |
5.2.3 pUG35-NbSPN13,pUG35-⊿NbSPN13酵母定位载体转化酵母及荧光观察 | 第57-59页 |
5.2.4 NbSPN13蛋白在家蚕微孢子虫中的间接免疫荧光定位(IFA) | 第59-60页 |
5.3 结论与讨论 | 第60-62页 |
第六章 总结 | 第62-64页 |
6.1 NbSPN13基因序列及转录分析结果 | 第62页 |
6.2 NbSPN13基因原核表达及小鼠多克隆抗体制备 | 第62页 |
6.3 NbSPN13蛋白的定位研究 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录 | 第71-74页 |
发表的论文和参研的研究课题 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |