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葡萄卷叶相关病毒2中国分离物外壳蛋白基因的克隆与原核表达 |
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论文目录 |
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摘要 | 第1-7页 | Abstract | 第7-8页 | 缩略词表 | 第8-9页 | 1 文献综述 | 第9-15页 | ·葡萄卷叶相关病毒研究进展 | 第9-13页 | ·发现史 | 第9页 | ·症状 | 第9页 | ·传播 | 第9-10页 | ·分类 | 第10-11页 | ·检测技术 | 第11-12页 | ·防治措施 | 第12-13页 | ·葡萄卷叶相关病毒2研究进展 | 第13-15页 | 2 研究目的和意义 | 第15-16页 | 3 GLRaV-2的血清学检测 | 第16-19页 | ·试验材料与试剂 | 第16-17页 | ·植物材料 | 第16页 | ·试剂 | 第16页 | ·反应溶液 | 第16-17页 | ·试验方法 | 第17页 | ·试验结果 | 第17-18页 | ·讨论 | 第18-19页 | 4 GLRaV-2外壳蛋白基因的克隆与序列分析 | 第19-30页 | ·试验材料与试剂 | 第19-20页 | ·植物材料 | 第19页 | ·质粒与菌株 | 第19页 | ·试剂 | 第19页 | ·dsRNA提取溶液的配制 | 第19页 | ·抗生素及培养基的配制 | 第19-20页 | ·PAGE相关试剂的配制 | 第20页 | ·试验方法 | 第20-25页 | ·dsRNA的提取 | 第20-21页 | ·GLRaV-2外壳蛋白基因的RT-PCR扩增 | 第21-23页 | ·RT-PCR引物的设计及合成 | 第21页 | ·反转录合成第一链cDNA | 第21页 | ·PCR扩增 | 第21-23页 | ·DNA片段的回收与纯化 | 第23页 | ·克隆载体的构建 | 第23页 | ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第23-24页 | ·连接产物与转化 | 第24页 | ·重组质粒DNA的鉴定 | 第24-25页 | ·质粒DNA小样制备与纯化 | 第24页 | ·重组质粒DNA的PCR鉴定 | 第24-25页 | ·重组质粒DNA的酶切鉴定 | 第25页 | ·试验结果 | 第25-29页 | ·RT-PCR扩增结果 | 第25页 | ·重组质粒鉴定结果 | 第25页 | ·序列分析结果 | 第25-28页 | ·系统进化树分析 | 第28-29页 | ·讨论 | 第29-30页 | 5 GLRaV-2-sh外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达 | 第30-39页 | ·试验材料与试剂 | 第30页 | ·质粒与菌株 | 第30页 | ·试剂 | 第30页 | ·所需溶液 | 第30页 | ·试验方法 | 第30-34页 | ·大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)感受态的制备 | 第30-31页 | ·原核表达载体的构建 | 第31-32页 | ·转化表达菌株BL21(DE3) | 第32页 | ·诱导表达外壳蛋白 | 第32-33页 | ·菌体裂解物SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第33-34页 | ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第33页 | ·上样电泳 | 第33页 | ·染色脱色 | 第33-34页 | ·表达产物抗原性分析 | 第34页 | ·试验结果 | 第34-37页 | ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第34页 | ·葡萄糖对原核表达的影响 | 第34-35页 | ·表达产物抗原性分析 | 第35-37页 | ·讨论 | 第37-39页 | 参考文献 | 第39-45页 | 致谢 | 第45页 |
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