| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-51页 |
| ·概述 | 第21-24页 |
| ·昆虫的色素代谢调控及其相关体色变异的研究进展 | 第24-30页 |
| ·昆虫体色的多样性及分类 | 第24-25页 |
| ·昆虫中主要的色素代谢途径 | 第25页 |
| ·昆虫体色变异研究及其对体色形成和调控机理的解析 | 第25-30页 |
| ·参与昆虫体型模式决定的基因及体型突变体的研究进展 | 第30-38页 |
| ·昆虫的体型模式概述 | 第30-31页 |
| ·昆虫附肢发育的主要调控基因及相关突变体研究进展 | 第31-34页 |
| ·影响昆虫身体尺寸及形态的基因类型及相关突变体研究 | 第34-35页 |
| ·其他影响昆虫体型模式的基因及其相关突变体研究 | 第35-38页 |
| ·家蚕突变体分子机制研究进展 | 第38-51页 |
| ·非定位克隆技术解析的家蚕突变体 | 第39-40页 |
| ·定位克隆技术解析的家蚕突变体 | 第40-51页 |
| 第二章 引言 | 第51-55页 |
| ·研究背景及目的意义 | 第51-52页 |
| ·主要研究内容 | 第52-53页 |
| ·技术路线 | 第53-55页 |
| 第三章 家蚕暗化型(mln)和石蚕(st)突变的分子标记定位以及候选基因筛查分析 | 第55-77页 |
| ·材料与方法 | 第55-66页 |
| ·实验用家蚕品系 | 第55页 |
| ·mln及st突变分子定位所需的标记引物 | 第55-56页 |
| ·连锁图谱构建软件及图谱绘制插件 | 第56页 |
| ·候选基因的预测及生物信息学分析时所用的工具软件 | 第56页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第56-57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| ·主要培养基及溶液配制 | 第57-58页 |
| ·连锁分析及基因定位材料组配 | 第58-59页 |
| ·基因组提取 | 第59页 |
| ·RNA的提取、检测和cDNA的制备 | 第59-62页 |
| ·SSR-PCR扩增及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第62页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第62-64页 |
| ·多态性标记P3C在野生型与mln突变中的克隆 | 第64-65页 |
| ·目的片段的连接 | 第65页 |
| ·转化 | 第65页 |
| ·阳性克隆的筛选和验证 | 第65页 |
| ·测序 | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-74页 |
| ·mln与st突变体表型观察 | 第66-67页 |
| ·mln和st位点的初步定位分析以及与经典连锁图、物理图谱的对应 | 第67-69页 |
| ·mln位点的精细定位及候选基因的筛查分析 | 第69-71页 |
| ·st位点的精细定位及候选基因的筛查分析 | 第71-74页 |
| ·讨论 | 第74-77页 |
| 第四章 mln突变候选基因Bm-iAANAT的克隆、表达及功能研究 | 第77-95页 |
| ·材料与方法 | 第77-80页 |
| ·实验材料 | 第77-78页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第78页 |
| ·mln突变候选基因扩增、表达模式分析及定量分析的引物设计、序列分析、蛋白结构分析、系统进化分析、多序列比对 | 第78页 |
| ·RNA的提取、检测和cDNA的制备 | 第78页 |
| ·Bm-iAANAT基因的半定量分析 | 第78页 |
| ·荧光定量PCR分析 | 第78-79页 |
| ·高效液相色谱分析 | 第79页 |
| ·RNAi注射 | 第79页 |
| ·主要仪器设备 | 第79-80页 |
| ·结果与分析 | 第80-91页 |
| ·mln突变候选基因的克隆与序列分析 | 第80-83页 |
| ·野生型中Bm-iAANAT基因的表达模式分析 | 第83-85页 |
| ·Bm-iAANAT的表达量在mln突变体与野生型中的比较 | 第85-87页 |
| ·黑色素代谢关键基因在野生型大造与突变体大造-mln中的表达差异 | 第87-88页 |
| ·mln突变体与野生型中多巴胺含量的检测分析 | 第88-90页 |
| ·Bm-iAANAT基因的RNAi | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-95页 |
| 第五章 mln突变体中儿茶酚胺与相关基因的相互作用对其鞣化部位着色和物理性能的影响 | 第95-123页 |
| ·材料及方法 | 第95-98页 |
| ·实验用家蚕品系 | 第95-96页 |
| ·mln突变中β-丙氨酸、多巴胺、NBAD和NADA的注射 | 第96页 |
| ·家蚕组织或整体儿茶酚胺提取 | 第96页 |
| ·儿茶酚胺类物质的测定 | 第96页 |
| ·黑色素代谢关键基因表达量的分析 | 第96-97页 |
| ·扫描电镜观察材料及操作 | 第97页 |
| ·翅膀机械性能分析材料及操作 | 第97页 |
| ·所用主要试剂及耗材 | 第97-98页 |
| ·主要仪器 | 第98页 |
| ·结果与分析 | 第98-114页 |
| ·4种儿茶酚胺类物质标准品的HPLC峰图 | 第98页 |
| ·mln突变体注射β-丙氨酸后的表型变化及相关儿茶酚胺和黑色素基因的检测 | 第98-101页 |
| ·mln与野生型蛹早期相似表型的分析 | 第101-103页 |
| ·5龄着色发生时野生型与mln突变中的儿茶酚胺代谢差异分析 | 第103-106页 |
| ·mln突变与野生型成虫期儿茶酚胺代谢的差异分析 | 第106-108页 |
| ·蛹到蛾期间mln突变与野生型表型及相关黑色素基因的动态变化分析 | 第108-109页 |
| ·mln成虫与野生型大造成虫背板截面的扫描电镜观察分析 | 第109-111页 |
| ·mln突变与野生型成虫翅膀机械性能的分析 | 第111-114页 |
| ·讨论 | 第114-123页 |
| 第六章 石蚕突变(st)候选基因的克隆、表达模式及功能分析 | 第123-151页 |
| ·材料与方法 | 第124-133页 |
| ·实验材料 | 第124页 |
| ·实验用引物 | 第124页 |
| ·原核表达载体 | 第124页 |
| ·原核表达菌株 | 第124页 |
| ·主要试剂、耗材及溶液配制 | 第124-125页 |
| ·主要溶液配制 | 第125-127页 |
| ·主要仪器 | 第127页 |
| ·研究方法 | 第127页 |
| ·RNA的提取、检测和cDNA的制备 | 第127-128页 |
| ·Bm-st基因的表达分析 | 第128页 |
| ·20E注射实验 | 第128页 |
| ·荧光定量PCR | 第128页 |
| ·几丁质的去乙酰化的产物葡萄糖胺的测定 | 第128页 |
| ·RNAi注射 | 第128页 |
| ·重组蛋白表达质粒的构建 | 第128-133页 |
| ·主要仪器设备 | 第133页 |
| ·结果与分析 | 第133-148页 |
| ·st突变候选基因的克隆、序列分析及其在野生型与st突变中的序列及表达差异分析 | 第133-136页 |
| ·Bm-st基因的表达模式分析 | 第136-139页 |
| ·st突变与野生型幼虫斑纹及相关基因的差异分析 | 第139-141页 |
| ·蜕皮激素对Bm-st表达量的影响 | 第141-142页 |
| ·野生型与st突变中葡萄糖胺含量的差异分析 | 第142-144页 |
| ·Bm-st基因的RNAi | 第144-145页 |
| ·野生型与突变体中Bm-st基因CDS的序列重组质粒的构建及重组蛋白的原核表达 | 第145-148页 |
| ·讨论 | 第148-151页 |
| 第七章 综合与结论 | 第151-155页 |
| 论文的创新点 | 第155-157页 |
| 参考文献 | 第157-169页 |
| 附录 | 第169-171页 |
| 博士在读期间发表文章及参研课题情况 | 第171-173页 |
| 致谢 | 第173-174页 |
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