中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-30页 |
1 家蚕天然有色茧研究进展 | 第13-21页 |
·家蚕天然有色茧概述 | 第13-14页 |
·家蚕的茧色遗传 | 第14-16页 |
·家蚕黄茧色决定基因 | 第16-19页 |
·绿茧及其它茧色相关基因 | 第19-21页 |
2 家蚕功能基因组学研究概述 | 第21-30页 |
·功能基因组学研究的主要技术方法 | 第21-27页 |
·基因差异表达技术在家蚕功能基因组学研究中的应用 | 第27-30页 |
第二章 研究目的内容与技术路线 | 第30-32页 |
1 目的与意义 | 第30页 |
2 研究内容 | 第30-31页 |
3 研究路线 | 第31-32页 |
第三章 主要试剂与常用实验方法 | 第32-44页 |
1 常用试剂 | 第32-38页 |
·主要生化试剂 | 第32-33页 |
·主要试剂盒 | 第33页 |
·酶类 | 第33页 |
·Marker | 第33-34页 |
·菌株 | 第34页 |
·培养基 | 第34页 |
·缓冲液和常用试剂的配制 | 第34-38页 |
2 主要仪器设备 | 第38-39页 |
3 常用实验方法 | 第39-44页 |
·总RNA 的抽提 | 第39页 |
·RNA 反转录 | 第39-40页 |
·PCR 扩增反应程序及加样体系 | 第40-41页 |
·PCR 产物的回收 | 第41页 |
·连接反应 | 第41页 |
·CaCl_2 法制备E. coli 感受态细胞 | 第41页 |
·重组DNA 的转化 | 第41-42页 |
·重组质粒的筛选 | 第42页 |
·碱裂解法少量制备质粒DNA | 第42-43页 |
·限制性内切酶反应 | 第43-44页 |
第四章 家蚕限性黄茧Ys 品种SSH cDNA 文库的构建及分析 | 第44-70页 |
1 材料与方法 | 第44-58页 |
·实验动物及其处理 | 第44页 |
·引物与接头 | 第44-45页 |
·总RNA 提取 | 第45页 |
·家蚕总RNA 的质量检验 | 第45-46页 |
·mRNA 的分离纯化 | 第46-48页 |
·抑制性消减杂交 | 第48-54页 |
·连接效率检验 | 第54页 |
·消减效率检测 | 第54-55页 |
·PCR 产物纯化 | 第55-56页 |
·消减文库的构建 | 第56-58页 |
2 结果与分析 | 第58-67页 |
·总RNA 的制备 | 第58-59页 |
·抑制性消减杂交 | 第59-62页 |
·消减效率分析 | 第62-63页 |
·消减文库的构建 | 第63页 |
·消减cDNA 文库插入片段的鉴定 | 第63-64页 |
·测序结果分析 | 第64-67页 |
3 讨论 | 第67-70页 |
·抑制性消减杂交的优缺点及质量检测 | 第67-68页 |
·基于家蚕限性黄茧Ys 品种SSH cDNA 文库的注释基因分类 | 第68-69页 |
·家蚕限性黄茧Ys 品种SSH 文库筛选的结果分析 | 第69-70页 |
第五章 家蚕Ctlp 基因的克隆鉴定和序列分析 | 第70-89页 |
1 材料与方法 | 第70-77页 |
·实验材料 | 第70页 |
·引物设计 | 第70页 |
·家蚕中肠总RNA 的准备 | 第70-71页 |
·3′-RACE 反应 | 第71-73页 |
·5′-RACE 反应 | 第73-76页 |
·RACE 测序结果序列分析 | 第76-77页 |
2 结果与分析 | 第77-87页 |
·RACE PCR 结果 | 第77-78页 |
·家蚕Ctlp 基因的序列分析 | 第78-79页 |
·家蚕 Ctlp 基因的染色体定位 | 第79页 |
·家蚕 CTLP 蛋白序列分析 | 第79-87页 |
3 讨论 | 第87-89页 |
·序列克隆 | 第88页 |
·序列分析 | 第88页 |
·分子进化 | 第88-89页 |
第六章 家蚕Ctlp 基因的表达谱分析及原核表达研究 | 第89-101页 |
1 材料与方法 | 第89-93页 |
·实验材料 | 第89页 |
·引物设计 | 第89-90页 |
·家蚕Ctlp 基因的EST 表达谱分析 | 第90页 |
·家蚕Ctlp 基因的芯片表达谱分析 | 第90页 |
·家蚕Ctlp 基因的组织表达谱分析 | 第90页 |
·家蚕Ctlp 基因的Real-Time PCR 分析 | 第90-91页 |
·家蚕Ctlp 基因的原核表达 | 第91-93页 |
2 结果与分析 | 第93-99页 |
·家蚕Ctlp 基因的EST 表达谱分析 | 第93-94页 |
·家蚕Ctlp 基因的芯片表达谱分析 | 第94-95页 |
·家蚕Ctlp 基因的组织表达分析 | 第95页 |
·家蚕Ctlp 基因的Real-Time PCR 结果分析 | 第95-96页 |
·家蚕基因的原核表达 | 第96-99页 |
3 讨论 | 第99-101页 |
·家蚕Ctlp 基因具有中肠表达特异性 | 第99页 |
·家蚕Ctlp 基因在Ys 品种中的表达研究 | 第99页 |
·家蚕Ctlp 基因可能不是原核高表达基因 | 第99-101页 |
第七章 结论与讨论 | 第101-104页 |
1 主要结论 | 第101-102页 |
·成功构建家蚕限性黄茧Ys 品种雌特异表达基因SSH cDNA 文库 | 第101页 |
·克隆鉴定和序列分析了基因Ctlp | 第101-102页 |
·调查和分析了家蚕Ctlp 基因的表达谱 | 第102页 |
·构建了Ctlp 基因原核表达系统 | 第102页 |
2 进一步研究方向 | 第102-104页 |
参考文献 | 第104-111页 |
研究生期间发表文章及成果 | 第111-112页 |
论文资助项目 | 第112-113页 |
附录 | 第113-116页 |
致谢 | 第116-117页 |