| 缩略词 | 第1-13页 |
| 中文摘要 | 第13-15页 |
| 英文摘要 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-39页 |
| 1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其分子生物学研究 | 第17-37页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的研究概况 | 第17-21页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的发现及其命名 | 第17-18页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的形态结构 | 第18页 |
| ·对虾白斑综合症的症状与病理变化 | 第18-19页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的感染宿主、传播途径及感染动物模型 | 第19-20页 |
| ·对虾白斑综合症病毒在对虾体内的感染增殖 | 第20-21页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的分离及主要的检测技术 | 第21-23页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的分离纯化 | 第21-22页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的检测 | 第22-23页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的基因组学研究 | 第23-25页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的蛋白质组学研究 | 第25-37页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的结构蛋白 | 第26-32页 |
| ·对虾白斑综合症病毒复制关键酶 | 第32-34页 |
| ·对虾白斑病毒的其他功能基因 | 第34-35页 |
| ·对虾白斑综合症病毒蛋白质组的研究意义 | 第35-37页 |
| 2 本论文研究的内容、目的和意义 | 第37-39页 |
| 第一部分 对虾白斑综合症病毒膜蛋白VP26与核衣壳蛋白之间的相互作用 | 第39-53页 |
| 1 前言 | 第39-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-46页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-46页 |
| ·WSSV完整病毒粒子以及膜蛋白和核衣壳蛋白的制备 | 第41-42页 |
| ·VP51基因的克隆表达和蛋白质的纯化 | 第42-43页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第43-44页 |
| ·Sulfo-SBED生物素标记纯化的VP51-MBP和VP26 | 第44页 |
| ·Western blotting分析 | 第44-45页 |
| ·生物素标记转移实验 | 第45页 |
| ·Far-Western分析 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-51页 |
| ·VP51基因的克隆表达和可溶蛋白纯化 | 第46-47页 |
| ·标记转移实验鉴定VP51与VP26的相互作用 | 第47-49页 |
| ·Far-Western进一步分析VP51与VP26的相互作用 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第二部分 VP26长双链RNA的合成及对病毒的增殖及其包装的干扰 | 第53-60页 |
| 1 前言 | 第53页 |
| 2 材料与方法 | 第53-56页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·DNA模板的制备 | 第54页 |
| ·dsRNA的体外合成 | 第54-55页 |
| ·dsRNA的注射与病虾的取样 | 第55页 |
| ·荧光定量PCR(Real-time PCR)分析dsRNA对病毒增殖的影响 | 第55页 |
| ·低温树脂包埋病虾肠胃组织,切片观察dsRNA对病毒包装的影响 | 第55-56页 |
| 3 结果 | 第56-59页 |
| ·dsRNA的体外合成 | 第56页 |
| ·实时荧光定量PCR分析dsRNA对病毒在虾体内增殖的影响 | 第56-57页 |
| ·病毒肠胃切片观察dsRNA对病毒在虾体内包装的影响 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-60页 |
| 第三部分 对虾白斑综合症病毒核衣壳包装机制的初步研究 | 第60-70页 |
| 1 前言 | 第60页 |
| 2 材料和方法 | 第60-61页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·方法 | 第60-61页 |
| ·电镜观察高盐和TE buffer处理的病毒核衣壳 | 第61页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第61页 |
| ·PEG8000对病毒核衣壳内外渗透压的调节 | 第61页 |
| ·电镜观察VP95-dsRNA对病毒包装形态的影响 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-68页 |
| ·电镜观察DNA纤维从核衣壳的顶端释放出来 | 第61-62页 |
| ·经高盐与TE buffer处理离心后上清和沉淀的SDS-PAGE分析 | 第62-63页 |
| ·PEG8000对病毒DNA释放的影响 | 第63-65页 |
| ·电镜观察VP95-dsRNA对病毒包装形态的影响 | 第65-68页 |
| 4 讨论 | 第68-70页 |
| 第四部分 VP26突变体的表达 | 第70-75页 |
| 1 前言 | 第70页 |
| 2 材料与方法 | 第70-72页 |
| ·材料 | 第70-71页 |
| ·方法 | 第71-72页 |
| ·模板的碱变性 | 第71页 |
| ·突变体载体的扩增 | 第71页 |
| ·VP26蛋白质突变体的表达 | 第71-72页 |
| 3 结果 | 第72-74页 |
| ·VP26突变体蛋白的设计 | 第72-73页 |
| ·突变体蛋白的重组载体的扩增 | 第73页 |
| ·VP26蛋白突变体的转化和表达 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-75页 |
| 第五部分 论文总结 | 第75-78页 |
| 参考文献 | 第78-91页 |
| 附录 | 第91-100页 |
| 1 主要仪器设备 | 第91-92页 |
| 2 常用溶液及培养基的配制 | 第92-96页 |
| 3 常规实验方法 | 第96-100页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
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