中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 转基因作物种植情况 | 第11-13页 |
1.2 转基因水稻 | 第13页 |
1.3 转基因作物的安全评价 | 第13-15页 |
1.4 转基因作物对水生生态系统的影响 | 第15-18页 |
1.4.1 Bt蛋白杀虫机理 | 第15-16页 |
1.4.2 转Bt基因作物种植对水生生态系统的影响 | 第16-18页 |
1.5 两栖类动物(非洲爪蟾)在毒理学中的应用 | 第18-21页 |
1.5.1 污染物对两栖类动物的影响 | 第18-19页 |
1.5.2 非洲爪蟾在环境毒理学中的应用 | 第19-21页 |
本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
第二章 Cry1Ab/Ac纯蛋白对爪蟾胚胎生长发育的影响(FETAX试验) | 第22-34页 |
2.1 材料与方法 | 第22-23页 |
2.1.1 试验动物及饲养 | 第22页 |
2.1.2 供试试剂 | 第22-23页 |
2.1.3 主要仪器 | 第23页 |
2.2 试验内容 | 第23-25页 |
2.2.1 爪蟾胚胎的获取 | 第23页 |
2.2.2 胚胎暴露方法 | 第23页 |
2.2.3 FETAX试验处理 | 第23-24页 |
2.2.4 爪蟾胚胎生长发育情况 | 第24-25页 |
2.2.4.1 胚胎培养液内Bt蛋白浓度 | 第24页 |
2.2.4.2 生命参数观察 | 第24页 |
2.2.4.3 蝌蚪体内Bt蛋白浓度和酶活性检测 | 第24-25页 |
2.3 数据处理 | 第25页 |
2.4 结果与分析 | 第25-32页 |
2.4.1 培养液内Bt蛋白浓度 | 第25-27页 |
2.4.2 生命参数观察 | 第27-29页 |
2.4.2.1 胚胎存活率、畸形率 | 第27-28页 |
2.4.2.2 蝌蚪体长、体重 | 第28-29页 |
2.4.3 蝌蚪体内Bt蛋白浓度和酶活性检测 | 第29-32页 |
2.5 讨论 | 第32-33页 |
2.6 小结 | 第33-34页 |
第三章 Cry1Ab/Ac纯蛋白对爪蟾蝌蚪生长发育的影响 | 第34-87页 |
3.1 材料与方法 | 第35-36页 |
3.1.1 试验动物及饲养 | 第35页 |
3.1.2 供试试剂 | 第35-36页 |
3.1.3 主要仪器 | 第36页 |
3.2 试验内容 | 第36-40页 |
3.2.1 爪蟾蝌蚪的获取 | 第36页 |
3.2.2 爪蟾蝌蚪的人工饲养方法 | 第36-37页 |
3.2.3 爪蟾蝌蚪的试验处理 | 第37页 |
3.2.4 爪蟾蝌蚪的生长发育情况 | 第37-39页 |
3.2.4.1 生存环境内Bt蛋白含量 | 第37页 |
3.2.4.2 生命参数观察 | 第37页 |
3.2.4.3 各脏器重量和组织切片观察 | 第37-38页 |
3.2.4.4 酶活性检测 | 第38-39页 |
3.2.5 爪蟾肠道微生物宏基因组测序 | 第39-40页 |
3.2.5.1 肠道样本微生物DNA提取 | 第39-40页 |
3.2.5.2 肠道样本DNA的16S rDNA V4可变区扩增,文库构建以及测序 | 第40页 |
3.3 数据处理 | 第40-43页 |
3.3.1 爪蟾蝌蚪生长情况 | 第40页 |
3.3.2 宏基因组测序 | 第40-43页 |
3.4 结果与分析 | 第43-83页 |
3.4.1 爪蟾蝌蚪的生长发育情况 | 第43-60页 |
3.4.1.1 生命参数观察 | 第43-46页 |
3.4.1.2 生长环境内Bt蛋白含量 | 第46页 |
3.4.1.3 各脏器重量和组织切片观察 | 第46-57页 |
3.4.1.4 肝脏和肾脏功能酶活性检测 | 第57-60页 |
3.4.2 爪蟾肠道微生物宏基因组测序 | 第60-83页 |
3.4.2.1 肠道微生物宏基因组DNA的提取和质量检测 | 第60-61页 |
3.4.2.2 测序序列数据统计和质量控制 | 第61-67页 |
3.4.2.3 基于OTU (Operation Taxonomic Unit)的初步分析 | 第67页 |
3.4.2.4 稀释度曲线 | 第67-68页 |
3.4.2.5 菌群结构组成 | 第68-70页 |
3.4.2.6 Alpha diversity分析结果 | 第70-75页 |
3.4.2.7 Beta diversity分析结果 | 第75-83页 |
3.5 讨论 | 第83-86页 |
3.5.1 Cry1Ab/Ac蛋白对爪蟾蝌蚪变态期的生长发育的影响 | 第83-84页 |
3.5.2 Cry1Ab/Ac蛋白对爪蟾幼蛙肠道微生物的影响 | 第84-86页 |
3.6 小结 | 第86-87页 |
第四章 转cry1Ab/Ac基因水稻对爪蟾幼蛙生长发育的影响 | 第87-115页 |
4.1 材料与方法 | 第87-88页 |
4.1.1 试验动物及饲养 | 第87页 |
4.1.2 供试试剂 | 第87页 |
4.1.3 主要仪器 | 第87-88页 |
4.2 试验内容 | 第88-92页 |
4.2.1 爪蟾幼蛙的获取 | 第88页 |
4.2.2 试验用颗粒饲料的配置 | 第88-89页 |
4.2.3 爪蟾幼蛙的人工饲养方法 | 第89页 |
4.2.4 爪蟾幼蛙的试验处理 | 第89页 |
4.2.5 爪蟾幼蛙的生长发育情况 | 第89-90页 |
4.2.5.1 生命参数观察 | 第89-90页 |
4.2.5.2 Bt蛋白含量 | 第90页 |
4.2.5.3 各脏器重量和组织切片观察 | 第90页 |
4.2.5.4 肝脏和肾脏功能酶活性检测 | 第90页 |
4.2.6 爪蟾肠道微生物多样性PCR-DGGE检测 | 第90-92页 |
4.2.6.1 肠道样本微生物DNA提取 | 第90-91页 |
4.2.6.2 PCR扩增 | 第91页 |
4.2.6.3 DGGE图谱条件 | 第91-92页 |
4.3 数据处理 | 第92-93页 |
4.4 结果与分析 | 第93-113页 |
4.4.0 稻谷粉以及幼蛙日粮营养成分 | 第93页 |
4.4.1 爪蟾幼蛙的生长发育情况 | 第93-109页 |
4.4.1.1 生命参数观察 | 第93-95页 |
4.4.1.2 生长环境以及肠道内Bt蛋白含量 | 第95页 |
4.4.1.3 各脏器重量和组织切片观察 | 第95-109页 |
4.4.2 爪蟾肠道微生物多样性PCR-DGGE检测 | 第109-113页 |
4.4.2.1 DNA提取结果和PCR扩增结果 | 第109-111页 |
4.4.2.1 DGGE图谱分析结果 | 第111-113页 |
4.5 讨论 | 第113-114页 |
4.6 小结 | 第114-115页 |
第五章 全文结论 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-129页 |
附录1 非洲爪蟾各发育阶段图谱 | 第129-133页 |
致谢 | 第133-135页 |
作者简历 | 第135-137页 |