中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第15-21页 |
1.1 昆虫表皮结构 | 第15-16页 |
1.2 蜕皮激素信号通路 | 第16-18页 |
1.2.1 HR3在昆虫蜕皮中的作用 | 第16-17页 |
1.2.2 FTZ-F1的功能研究进展 | 第17-18页 |
1.3 研究目的及意义 | 第18-19页 |
技术路线 | 第19-21页 |
第二章 飞蝗核受体因子HR3和βFTZ-F1的克隆与表达分析 | 第21-35页 |
2.1 所用材料和试剂 | 第21-22页 |
2.1.1 实验昆虫 | 第21页 |
2.1.2 所用试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 相关设备和仪器 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-28页 |
2.2.1 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1基因的获取和分子特性 | 第22-23页 |
2.2.2 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1基因结构和聚类分析 | 第23页 |
2.2.3 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1引物设计和模板制备 | 第23-25页 |
2.2.4 L_(m)HR3和L_(m)FTZ-F1的PCR扩增和胶回收 | 第25页 |
2.2.5 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1载体构建 | 第25-26页 |
2.2.6 L_(m)HR3和L_(m)FTZ-F1的菌液检测和测序、提取质粒 | 第26-27页 |
2.2.7 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1时期和组织的RT-qPCR | 第27-28页 |
2.2.8 20 E诱导实验 | 第28页 |
2.3 结果分析 | 第28-34页 |
2.3.1 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1的分子特性 | 第28-31页 |
2.3.2 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1的组织和时期表达模式 | 第31-33页 |
2.3.3 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1响应20E诱导表达 | 第33-34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
第三章 L_(m)HR3在飞蝗蜕皮中的功能分析 | 第35-47页 |
3.1 所用材料和试剂 | 第35-36页 |
3.1.1 实验昆虫 | 第35页 |
3.1.2 所用试剂 | 第35-36页 |
3.1.3 所用仪器 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-40页 |
3.2.1 L_(m)HR3的RNAi实验及取样 | 第36-38页 |
3.2.2 H&E和几丁质染色 | 第38-39页 |
3.2.3 透射电镜观察 | 第39页 |
3.2.4 L_(m)HR3对几丁质代谢相关基因的表达影响 | 第39-40页 |
3.3 结果分析 | 第40-44页 |
3.3.1 L_(m)HR3RNAi后表型观察及沉默效率检测 | 第40页 |
3.3.2 L_(m)HR3对表皮发育及结构的影响 | 第40-41页 |
3.3.3 L_(m)HR3对几丁质合成和降解相关基因表达的影响 | 第41-42页 |
3.3.4 L_(m)HR3对若虫之间转变的影响 | 第42-44页 |
3.4 讨论 | 第44-47页 |
第四章 βFTZ-F1在飞蝗翅发育中的功能分析 | 第47-55页 |
4.1 所用材料和试剂 | 第47-48页 |
4.1.1 实验昆虫 | 第47页 |
4.1.2 实验试剂 | 第47-48页 |
4.1.3 所用仪器 | 第48页 |
4.2 实验方法 | 第48-49页 |
4.2.1 RNAi和表型观察 | 第48页 |
4.2.2 H&E染色 | 第48-49页 |
4.2.3 成虫前翅电镜观察 | 第49页 |
4.3 结果分析 | 第49-52页 |
4.3.1 βFTZ-F1的沉默效率检测和表型观察 | 第49-50页 |
4.3.2 5龄若虫翅芽的H&E染色 | 第50页 |
4.3.3 成虫的透射电镜观察 | 第50-51页 |
4.3.4 βFTZ-F1对若虫到若虫转变的影响 | 第51-52页 |
4.4 讨论 | 第52-55页 |
第五章 5龄飞蝗翅芽转录组分析 | 第55-69页 |
5.1 所用材料和试剂 | 第55-56页 |
5.1.1 实验昆虫 | 第55页 |
5.1.2 实验试剂 | 第55-56页 |
5.1.3 所用仪器 | 第56页 |
5.2 实验方法 | 第56-60页 |
5.2.1 5龄翅芽的RNA样品提取和检测 | 第56-57页 |
5.2.2 对测序结果质量评估 | 第57页 |
5.2.3 Unigene的装配、功能注释和相关性评估 | 第57-58页 |
5.2.4 差异表达基因的筛选和分析 | 第58-59页 |
5.2.5 荧光定量PCR验证差异表达基因 | 第59-60页 |
5.3 结果分析 | 第60-68页 |
5.3.1 RNAi干扰和总RNA的提取及质量检测 | 第60-61页 |
5.3.2 测序结果质量评估分析 | 第61页 |
5.3.3 Unigene组装和注释结果统计和相关分析 | 第61-64页 |
5.3.4 数据库中差异表达基因筛查 | 第64-67页 |
5.3.5 RT-qPCR结果验证 | 第67-68页 |
5.4 讨论 | 第68-69页 |
全文总结 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
个人简况及联系方式 | 第78-81页 |