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PCUGNA-PMI载体的构建及利用GNA改良水稻抗虫性 |
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| 论文目录 |
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| 中文摘要 | 第1-7页 | | 英文摘要 | 第7-9页 | | Ⅰ 文献综述 | 第9-32页 | | 1 水稻转基因的主要方法及原理 | 第9-13页 | | ·直接转化法 | 第9-12页 | | ·间接转化法 | 第12-13页 | | 2 常用水稻遗传转化的基因元件 | 第13-23页 | | ·目的基因 | 第13-14页 | | ·基因调控元件 | 第14-15页 | | ·启动子 | 第14-15页 | | ·终止子 | 第15页 | | ·工具基因 | 第15-23页 | | ·报告基因 | 第15-16页 | | ·选择标记基因 | 第16-23页 | | ·常用选择标记基因 | 第16页 | | ·去选择标记基因系统 | 第16-20页 | | ·共转化 | 第17-18页 | | ·位点特异重组系统 | 第18-19页 | | ·染色体内同源重组系统 | 第19-20页 | | ·转座子系统 | 第20页 | | ·MAT载体系统 | 第20页 | | ·安全选择标记基因 | 第20-23页 | | ·木糖异构酶基因 | 第20-21页 | | ·磷酸甘露糖异构酶基因 | 第21-22页 | | ·核糖醇操纵子 | 第22页 | | ·化合物解毒酶基因 | 第22-23页 | | 3 植物凝集素基因研究进展 | 第23-25页 | | ·植物凝集素对病源微生物的拮抗作用 | 第23页 | | ·植物凝集素的杀虫机理 | 第23-24页 | | ·植物凝集素在基因工程中的应用 | 第24-25页 | | 4 基因工程在水稻育种中的应用 | 第25-28页 | | ·水稻品质改良 | 第25页 | | ·提高水稻抗病性 | 第25-26页 | | ·抗虫基因工程 | 第26-27页 | | ·抗除草剂基因工程 | 第27页 | | ·提高抗逆能力基因工程 | 第27-28页 | | ·创造新的不育系、保持系和恢复系 | 第28页 | | ·植物生物反应器 | 第28页 | | 5 水稻基因工程面临的主要问题和对策 | 第28-31页 | | ·转化率低 | 第28页 | | ·转基因沉默 | 第28-29页 | | ·外源基因的低效表达 | 第29-30页 | | ·转基因的安全性 | 第30-31页 | | 6 开题设想 | 第31-32页 | | Ⅱ 材料与方法 | 第32-46页 | | 1 实验材料 | 第32-35页 | | ·供试品种 | 第32页 | | ·质粒及菌种 | 第32页 | | ·培养基成分 | 第32-33页 | | ·重要试剂及溶液 | 第33-35页 | | ·重要仪器及设备 | 第35页 | | 2 实验方法 | 第35-46页 | | ·载体构建 | 第35-39页 | | ·质粒的少量提取与鉴定(碱法) | 第35-36页 | | ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第36页 | | ·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第36-37页 | | ·限制性内切酶典型的酶切反应 | 第37页 | | ·琼脂糖凝胶电泳的DNA片段的回收 | 第37-38页 | | ·T_4连接酶典型连接反应 | 第38页 | | ·重组质粒的鉴定 | 第38页 | | ·pCUGNA-PMI质粒载体构建方案 | 第38-39页 | | ·受体材料的准备 | 第39页 | | ·愈伤组织的诱导 | 第39页 | | ·培养基试验 | 第39页 | | ·低温预处理 | 第39页 | | ·继代 | 第39页 | | ·第一次继代时间对防止褐化的影响 | 第39页 | | ·筛选压的确定 | 第39-40页 | | ·愈伤组织对潮霉素(HygB)的敏感性实验 | 第39-40页 | | ·愈伤组织对甘露糖(Mannose)的敏感性实验 | 第40页 | | ·水稻愈伤组织转化 | 第40-41页 | | ·农杆菌介导法 | 第40-41页 | | ·基因枪介导法 | 第41页 | | ·转基因植株的分子生物学检测 | 第41-45页 | | ·转基因植株的PCR检测 | 第41-43页 | | ·转基因植株GUS活性检测(组织化学染色法) | 第43页 | | ·Southern blot分析 | 第43-45页 | | ·子代抗性遗传分析 | 第45-46页 | | Ⅲ 结果与分析 | 第46-62页 | | 1 载体构建 | 第46-48页 | | ·pCUGNA-PMI质粒载体的构建 | 第46页 | | ·阳性克隆的筛选及鉴定 | 第46页 | | ·质粒酶切鉴定 | 第46-48页 | | ·质粒PCR鉴定 | 第48页 | | 2 受体材料的获得 | 第48-53页 | | ·培养基试验 | 第48-50页 | | ·低温预处理 | 第50-52页 | | ·第一次继代时间对褐化的影响 | 第52-53页 | | 3 筛选压的确定 | 第53-54页 | | 4 转化 | 第54-57页 | | ·农杆菌转化法 | 第54-56页 | | ·基因枪转化法 | 第56-57页 | | 5 转基因植物的分子生物学检测 | 第57-60页 | | ·转基因水稻植株的PCR检测 | 第58-59页 | | ·转基因水稻植株的Southern Blotting检测分析 | 第59-60页 | | ·转基因植株的GUS检测(组织化学染色法) | 第60页 | | 6 转基因植株后代的遗传性分析 | 第60-62页 | | Ⅳ 讨论 | 第62-70页 | | 1 水稻遗传转化体系的完善 | 第62-67页 | | ·受体系统的完善 | 第62-63页 | | ·外植体的选择 | 第62页 | | ·受体材料的选择 | 第62-63页 | | ·褐化问题 | 第63页 | | ·转化系统遗传参数的优化 | 第63-67页 | | ·根癌农杆菌介导法各参数的优化 | 第63-65页 | | ·基因枪介导法各参数的优化 | 第65-67页 | | 2 甘露糖的筛选 | 第67页 | | 3 多个抗虫基因的聚合 | 第67-68页 | | 4 PMI选择标记的利用前景 | 第68页 | | 5 GNA基因的利用前景 | 第68-69页 | | 6 后续研究设想 | 第69-70页 | | Ⅴ 参考文献 | 第70-74页 | | Ⅵ 附图 | 第74-77页 | | Ⅶ 致谢 | 第77页 |
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论文编号BS944188，这篇论文共77页
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