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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--大肠杆菌无细胞合成体系的构建及表达多种蛋白质的研究
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大肠杆菌无细胞合成体系的构建及表达多种蛋白质的研究
 
     论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-29页
   ·无细胞蛋白质表达体系的研究进展第11-25页
     ·引言第11页
     ·无细胞蛋白表达体系的种类第11-12页
     ·无细胞蛋白表达的机理第12-15页
     ·常用无细胞表达体系抽提物的制备过程第15-17页
       ·大肠杆菌无细胞抽提物的制备过程第15-16页
       ·兔网织红细胞裂解物制备第16页
       ·家蚕丝腺抽提物的制备第16页
       ·麦胚抽提物的制备第16-17页
     ·无细胞表达体系应用的能量体系第17-20页
     ·无细胞体系的反应器类型第20-23页
     ·无细胞反应体系的优缺点第23-24页
     ·无细胞蛋白质表达体系的应用和前景第24-25页
   ·腺苷酸转运体(ANT)第25-28页
     ·腺苷酸转运体第25-27页
     ·腺苷酸转运体的应用第27页
     ·腺苷酸转运体异源表达的解决方法第27-28页
   ·本课题研究的方向第28-29页
第二章 表达载体的构建第29-34页
   ·实验材料第29-30页
     ·质粒第29页
     ·大肠杆菌菌株第29页
     ·试剂第29-30页
     ·培养基第30页
     ·主要仪器第30页
   ·实验及分析方法第30-31页
     ·分子克隆相关实验第30-31页
       ·质粒抽提第30页
       ·感受态细胞的制备和质粒转化第30页
       ·胶回收纯化DNA第30-31页
   ·表达载体构建第31-34页
     ·eGFP表达载体的构建第31页
     ·sjANT表达载体的构建第31-32页
     ·pIVEX2.4c-eGFP和pSJ-sjANT载体的酶切鉴定第32-34页
第三章 E.coli无细胞表达体系的构建和优化第34-50页
   ·引言第34页
   ·实验材料与方法第34-35页
     ·大肠杆菌菌株第34页
     ·试剂第34页
     ·培养基第34页
     ·菌体浓度测定第34页
     ·蛋白浓度测定第34-35页
     ·SDS-PAGE电泳第35页
     ·Western Blotting分析第35页
     ·绿色荧光蛋白eGFP荧光强度测定第35页
   ·无细胞表达体系的构建第35-39页
     ·E.coli BL21(DE3)和E.coli K12 A19生长曲线的测定第35-37页
     ·大肠杆菌抽提物的制备第37-38页
     ·无细胞体系试剂的配制第38-39页
   ·自制无细胞体系表达蛋白质第39-40页
     ·能量体系和系统组成第39-40页
     ·蛋白质的测定第40页
   ·结果与讨论第40-50页
     ·大肠杆菌抽提物S12效果的检测第40-41页
     ·20种氨基酸效果的检测第41-42页
     ·无细胞能量体系的确定和实验检测第42-44页
     ·NTP浓度和二次能源物质浓度的优化第44-49页
     ·相关试剂的混合配制第49-50页
第四章 不同能量体系的比较第50-58页
   ·引言第50页
   ·材料与方法第50页
   ·结果与讨论第50-58页
     ·不同能量体系的比较第50-53页
     ·膜蛋白AqpZ在以cAMP/CP/CK为二次能源系统中的表达和优化第53-56页
     ·以cAMP/CP/CK为二次能源物质表达多种蛋白第56-58页
第五章 ANT蛋白的无细胞表达第58-65页
   ·引言第58页
   ·材料与方法第58页
   ·结果与讨论第58-65页
     ·无细胞表达ANT第58-59页
     ·反应后在体系中加入表面活性剂第59-61页
     ·反应过程中加入表面活性剂第61-65页
第六章 总结和展望第65-67页
   ·总结第65页
   ·展望第65-67页
参考文献第67-72页
致谢第72-73页

 
 
论文编号BS360154,这篇论文共73
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