| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第12-29页 |
| 1.1 烟粉虱的概况 | 第12-14页 |
| 1.1.1 烟粉虱的形态与分类地位 | 第12页 |
| 1.1.2 烟粉虱的入侵历史与生物型取代 | 第12-13页 |
| 1.1.3 烟粉虱的危害 | 第13页 |
| 1.1.4 烟粉虱内共生菌 | 第13-14页 |
| 1.2 Wolbachia研究进展 | 第14-20页 |
| 1.2.1 Wolbachia的形态学与分布 | 第14页 |
| 1.2.2 Wolbachia的多样性与系统发育 | 第14-15页 |
| 1.2.3 Wolbachia的传播规律 | 第15-16页 |
| 1.2.4 Wolbachia对寄主的生殖调控 | 第16-19页 |
| 1.2.5 Wolbachia对宿主的其他影响 | 第19页 |
| 1 .2.6 Wolbachia基因组学研究 | 第19-20页 |
| 1.3 Cardinium研究进展 | 第20-24页 |
| 1.3.1 Cardinium的形态与分布 | 第20-21页 |
| 1.3.2 Cardinium的检测与系统发育 | 第21页 |
| 1.3.3 Cardinium对宿主的调控作用 | 第21-23页 |
| 1.3.4 Cardinium VS.Wolbachia | 第23-24页 |
| 1.4 次共生菌的生殖调控作用与生物防治 | 第24-25页 |
| 1.4.1 Wolbachia人工转染技术的应用 | 第24-25页 |
| 1.4.2 共生菌诱导的CI在生物防治中的应用 | 第25页 |
| 1.5 实时荧光定量技术在共生菌研究领域的应用 | 第25-26页 |
| 1.6 转录组学在害虫防治上的应用 | 第26页 |
| 1.7 论文设计 | 第26-29页 |
| 1.7.1 本论文的主要研究内容和方法 | 第27页 |
| 1.7.2 本论文的研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 1.7.3 本论文的研究路线图 | 第28-29页 |
| 第二章 外源Wolbachia的人工转染 | 第29-43页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-38页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第29页 |
| 2.1.2 寄主植物 | 第29页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第29-32页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.5 黑腹果蝇人工饲养 | 第33页 |
| 2.1.6 果蝇基因组DNA的提取 | 第33页 |
| 2.1.7 Wolbachia基于wsp基因的序列的分子鉴定 | 第33-35页 |
| 2.1.8 基于多位点序列对Wolbachia的分子鉴定 | 第35-36页 |
| 2.1.9 Wolbachia的提取 | 第36-37页 |
| 2.1.10 纯化Wolbachia的鉴定 | 第37页 |
| 2.1.11 受体Wolbachia的显微注射和单雌系构建 | 第37-38页 |
| 2.1.12 外源Wolbachia在新宿主烟粉虱体内的检测 | 第38页 |
| 2.2 结果与分析 | 第38-41页 |
| 2.2.1 黑腹果蝇Wolbachia wsp基因检测和序列鉴定 | 第38-39页 |
| 2.2.2 Wolbachia MLST 5个持家基因扩增 | 第39页 |
| 2.2.3 纯化后Wolbachia重悬液的鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.4 人工转染烟粉虱种群Wolbachia检测 | 第40-41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 wMel菌株在新宿主烟粉虱种群中的传递动态 | 第43-59页 |
| 3.1 材料与方法 | 第43-49页 |
| 3.1.1 供试昆虫 | 第43页 |
| 3.1.2 寄主植物 | 第43页 |
| 3.1.3 主要试剂及缓冲液配置 | 第43-45页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第45页 |
| 3.1.5 外源Wolbachia在烟粉虱种群中感染率的世代演变 | 第45-46页 |
| 3.1.6 荧光原位杂交FISH | 第46页 |
| 3.1.7 实时荧光定量qPCR | 第46-49页 |
| 3.2 结果与分析 | 第49-56页 |
| 3.2.1 引物的筛选及条件优化 | 第49页 |
| 3.2.2 标准曲线的制定 | 第49-50页 |
| 3.2.3 外源Wolbachia在烟粉虱种群中感染率的世代演变 | 第50页 |
| 3.2.4 荧光原位杂交定位分析 | 第50-54页 |
| 3.2.5 转染后不同世代及不同虫态烟粉虱体内Wolbachia密度变化 | 第54-56页 |
| 3.2.6 转染后烟粉虱成虫体内Wolbachia日龄密度变化 | 第56页 |
| 3.2.7 Wolbachia滴度与感染率之间的关系 | 第56页 |
| 3.3 讨论 | 第56-59页 |
| 第四章 Wolbachia和Cardinium对烟粉虱生殖的影响 | 第59-68页 |
| 4.1 材料与方法 | 第59-62页 |
| 4.1.1 供试昆虫 | 第59页 |
| 4.1.2 寄主植物 | 第59页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第59-60页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第60页 |
| 4.1.5 烟粉虱体内Cardinum检测 | 第60-61页 |
| 4.1.6 PCR产物纯化 | 第61页 |
| 4.1.7 Cardinium基于16S rDNA序列的系统发育分析 | 第61页 |
| 4.1.8 筛选100%不感染和100%感染Cardinium的品系 | 第61页 |
| 4.1.9 Cardinium在烟粉虱体内的荧光原位杂交定位 | 第61-62页 |
| 4.1.10 Cardinium对烟粉虱生殖的影响 | 第62页 |
| 4.1.11 wMel Wolbachia对烟粉虱生殖的影响 | 第62页 |
| 4.1.12 数据分析 | 第62页 |
| 4.2 结果与分析 | 第62-66页 |
| 4.2.1 Cardinium感染率及系统发育分析 | 第62-64页 |
| 4.2.2 Cardinium感染在Q型烟粉虱中的分布 | 第64页 |
| 4.2.3 Cardinium对烟粉虱生殖的影响 | 第64-66页 |
| 4.2.4 Wolbachia对烟粉虱生殖的影响 | 第66页 |
| 4.3 讨论 | 第66-68页 |
| 第五章 Wolbachia转染对烟粉虱种群的影响 | 第68-73页 |
| 5.1 材料与方法 | 第68-70页 |
| 5.1.1 供试昆虫 | 第68页 |
| 5.1.2 寄主植物 | 第68页 |
| 5.1.3 主要试剂及仪器 | 第68页 |
| 5.1.4 笼罩种群控制实验 | 第68-69页 |
| 5.1.5 数据分析 | 第69-70页 |
| 5.2 结果与分析 | 第70页 |
| 5.3 讨论 | 第70-73页 |
| 第六章 烟粉虱对外源Wolbachia转染的转录组响应 | 第73-91页 |
| 6.1 材料与方法 | 第73-76页 |
| 6.1.1 样品采集与处理 | 第73页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第73页 |
| 6.1.3 主要仪器 | 第73-74页 |
| 6.1.4 总RNA的提取 | 第74页 |
| 6.1.5 RNA量化和鉴定 | 第74页 |
| 6.1.6 文库构建与测序 | 第74-75页 |
| 6.1.7 数据分析 | 第75-76页 |
| 6.1.8 差异基因qRT-PCR验证 | 第76页 |
| 6.2 结果与分析 | 第76-86页 |
| 6.2.1 烟粉虱总RNA提取质量 | 第76-77页 |
| 6.2.2 转录组测序数据质控与对比分析 | 第77-78页 |
| 6.2.3 差异基因表达水平分析 | 第78-79页 |
| 6.2.4 差异表达基因的GO富集分析 | 第79页 |
| 6.2.5 差异表达基因的KEGG富集分析 | 第79-81页 |
| 6.2.6 免疫相关信号通路 | 第81-82页 |
| 6.2.7 参与宿主免疫反应的相关基因 | 第82-86页 |
| 6.2.8 感染后的应激反应相关基因 | 第86页 |
| 6.2.9 实时荧光qPCR验证 | 第86页 |
| 6.3 讨论 | 第86-91页 |
| 第七章 结论、创新点与展望 | 第91-92页 |
| 7.1 主要结论 | 第91页 |
| 7.2 创新点 | 第91页 |
| 7.3 展望 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 作者简介 | 第114页 |
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