中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
第一章 前言 | 第13-22页 |
1. 新城疫及新城疫病毒概述 | 第13-14页 |
2. 新城疫病毒分子生物学研究进展 | 第14-16页 |
2. 1 新城疫病毒基因组的结构特点 | 第14页 |
2. 2 新城疫病毒编码蛋白的研究进展 | 第14-16页 |
3. 新城疫病毒疫苗研究进展 | 第16-20页 |
4. 新城疫病毒反向遗传系统研究进展 | 第20-22页 |
第二章 疫苗接种对我国新城疫病毒进化的影响 | 第22-28页 |
1. 材料和方法 | 第22-23页 |
2. 结果 | 第23-26页 |
3 .分析与讨论 | 第26-28页 |
第三章 新城疫病毒 LASOTA 疫苗株全基因组克隆和序列分析 | 第28-44页 |
1 材料 | 第29-33页 |
1. 1 新城疫病毒疫苗株、鸡胚、菌株、质粒 | 第29页 |
1. 2 主要仪器 | 第29-30页 |
1. 3 药品及试剂盒 | 第30页 |
1. 4 溶液配方 | 第30-33页 |
2. 方法 | 第33-42页 |
2. 1 SPF 鸡胚培养病毒 | 第33-34页 |
2. 2 病毒的分离鉴定:血凝抑制实验和血凝实验 | 第34-35页 |
2. 3 引物设计 | 第35-36页 |
2. 4 病毒总 RNA 的提取及 RT-PCR | 第36-38页 |
2. 5 PCR 产物的电泳及目的条带的回收 | 第38-39页 |
2. 6 感受态细胞的制备与保存 | 第39页 |
2. 7 目的片段与 pMD18-T 载体的连接及转化 | 第39-40页 |
2. 8 菌落 PCR 及阳性质粒的提取 | 第40-42页 |
2. 9 pMD18-T-Ln 质粒测序及序列比对 | 第42页 |
3. 结果 | 第42-43页 |
4. 讨论与分析 | 第43-44页 |
第四章 新城疫病毒 LASOTA 疫苗株全长 CDNA 的构建 | 第44-62页 |
1. 材料 | 第44-45页 |
1. 1 菌株、质粒 | 第44页 |
1. 2 主要仪器(见第二部分) | 第44页 |
1. 3 药品及试剂盒 | 第44-45页 |
2. 方法 | 第45-48页 |
2. 1 目的片段在 pMD18-T 上的方向 | 第45页 |
2. 2 所用的酶切位点是否发生突变 | 第45-46页 |
2. 3 具体的质粒酶切连接方案 | 第46-47页 |
2. 4 酶切连接的实验步骤 | 第47-48页 |
3. 结果 | 第48-59页 |
3. 1 重组质粒 T-L1-2 的鉴定 | 第48页 |
3. 2 重组质粒 T-L1-3 的鉴定 | 第48-49页 |
3. 3 重组质粒 pMC18-L1-3 的鉴定 | 第49-50页 |
3. 4 重组质粒 pMC18-L1-4 的鉴定 | 第50-51页 |
3. 5 重组质粒 pMC18-L11 的鉴定 | 第51-52页 |
3. 6 重组质粒 pMC18-L10-11 的鉴定 | 第52页 |
3. 7 重组质粒 pMC18-L10-12 的鉴定 | 第52-53页 |
3. 8 重组质粒 pMC18-L10-12-HDT 的鉴定 | 第53-54页 |
3. 9 重组质粒 T-L8-9 的鉴定 | 第54页 |
3. 10 重组质粒 T-L7-9 的鉴定 | 第54-55页 |
3. 11 重组质粒 pMC18-L6-9 的鉴定 | 第55-56页 |
3. 12 重组质粒 pMC18-L6-12-HDT 的鉴定 | 第56-57页 |
3. 13 重组质粒 pMC18-L5-12-HDT 的鉴定 | 第57-58页 |
3. 14 重组质粒 pMC18-LaSota 的鉴定 | 第58-59页 |
4. 分析和讨论 | 第59-62页 |
第五章 结论 | 第62-63页 |
第六章 附录 | 第63-78页 |
附录6-1:质粒图谱 | 第63-64页 |
附录6-2:论文中的相关表格 | 第64-70页 |
附录6-3:论文中的测序结果 | 第70-78页 |
参考文献 | 第78-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读硕士学位期间发表文章 | 第84页 |