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脑心肌炎病毒衣壳蛋白与HuvEc相互作用蛋白的初步筛选 |
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论文目录 |
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项目资金来源 | 第4-5页 | 摘要 | 第5-6页 | ABSTRACT | 第6页 | 缩略词表 | 第7-11页 | 第一章 文献综述 | 第11-21页 | 1 脑心肌炎病毒研究概述 | 第11-14页 | 1.1 EMCV的病原学 | 第11页 | 1.2 EMCV分子生物学特征 | 第11-13页 | 1.3 EMCV诊断和检测方法 | 第13-14页 | 2 酵母双杂交系统研究进展 | 第14-20页 | 2.1 酵母双杂交系统的原理 | 第15页 | 2.2 酵母双杂交技术的新发展 | 第15-20页 | 3 本论文研究的目的和意义 | 第20-21页 | 第二章 诱饵质粒的构建及验证 | 第21-32页 | 1 材料及仪器设备 | 第21-22页 | 1.1 材料及试剂 | 第21页 | 1.2 试剂配制 | 第21-22页 | 1.3 仪器设备 | 第22页 | 2 试验步骤及方法 | 第22-29页 | 2.1 引物设计及合成 | 第22-23页 | 2.2 EMCV总RNA提取 | 第23页 | 2.3 反转录 | 第23-24页 | 2.4 构建诱饵质粒 | 第24-27页 | 2.5 诱饵质粒pDHB1-Bait的验证 | 第27-28页 | 2.6 大量提取诱饵质粒 | 第28页 | 2.7 诱饵质粒浓度测定 | 第28-29页 | 2.7.1 质粒浓度测定方法 | 第28-29页 | 3 结果 | 第29-30页 | 3.1 诱饵基因PCR扩增 | 第29页 | 3.2 诱饵质粒pDHB1-Bait酶切验证及测序 | 第29页 | 3.3 诱饵质粒浓度测定 | 第29-30页 | 4 小结 | 第30-32页 | 第三章 诱饵蛋白的自激活检测 | 第32-41页 | 1 材料及仪器设备 | 第32-33页 | 1.1 材料及试剂 | 第32页 | 1.2 试剂配制 | 第32-33页 | 1.3 仪器设备 | 第33页 | 2 试验步骤及方法 | 第33-37页 | 2.1 诱饵质粒转化酵母报告株NMY51 | 第33-35页 | 2.2 酵母双杂交诱饵质粒功能性验证 | 第35-37页 | 2.2.1 诱饵质粒功能性验证方法 | 第36-37页 | 3 结果 | 第37-39页 | 3.1 诱饵质粒转化酵母报告株NMY51 | 第37页 | 3.2 酵母双杂交诱饵质粒功能性验证 | 第37-39页 | 4 小结 | 第39-41页 | 第四章 酵母双杂交筛选与BAIT相互作用的HUVEC细胞蛋白 | 第41-61页 | 1 材料及仪器设备 | 第41-42页 | 1.1 材料及试剂 | 第41页 | 1.2 仪器设备 | 第41-42页 | 2 试验步骤及方法 | 第42-48页 | 2.1 HuvEc细胞cDNA文库的构建 | 第42页 | 2.2 引物合成 | 第42页 | 2.3 酵母双杂交筛选压力的确定 | 第42-44页 | 2.4 酵母双杂交筛选HuvEc细胞cDNA文库 | 第44-46页 | 2.5 阳性克隆的确认及捕获质粒的提取 | 第46-48页 | 2.6 酵母回返实验 | 第48页 | 2.7 捕获质粒的测序和序列分析 | 第48页 | 2.8 Bait与HuvEc细胞蛋白有相互作用蛋白的生物信息学分析 | 第48页 | 3 结果 | 第48-58页 | 3.1 HuvEc细胞cDNA文库 | 第48-49页 | 3.2 3-AT筛选压力的确定 | 第49-51页 | 3.3 酵母双杂交筛选与Bait相互作用的HuvEc细胞文库 | 第51-52页 | 3.4 阳性克隆β-半乳糖苷酶分析 | 第52页 | 3.5 酵母质粒转化大肠杆菌后菌落PCR验证 | 第52-53页 | 3.6 酵母回返实验 | 第53-56页 | 3.7 捕获蛋白亚细胞定位 | 第56页 | 3.8 筛选到的互作蛋白功能富集聚类分析 | 第56-58页 | 4 小结 | 第58-61页 | 第五章 全文结论 | 第61-62页 | 参考文献 | 第62-71页 | 致谢 | 第71-72页 | 作者简介 | 第72页 | 硕士期间已发表论文 | 第72页 |
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