中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第11-20页 |
1.1 甲型肝炎病毒 | 第11-14页 |
1.1.1 甲型病毒肝炎 | 第11页 |
1.1.2 甲肝病毒特征 | 第11页 |
1.1.3 甲肝病毒的致病性 | 第11-12页 |
1.1.4 甲肝病毒的基因型 | 第12页 |
1.1.5 甲肝病毒的流行情况 | 第12-13页 |
1.1.6 甲肝病毒基因组结构 | 第13页 |
1.1.7 甲肝病毒的预防 | 第13-14页 |
1.2 甲肝病毒 3C 蛋白酶 | 第14-15页 |
1.2.1 3C 蛋白酶的结构 | 第14页 |
1.2.2 3C 蛋白酶的功能 | 第14页 |
1.2.3 3C 蛋白酶酶切位点 | 第14-15页 |
1.2.4 蛋白酶酶切位点的检测方法 | 第15页 |
1.3 Pro-Interleukin-1B-Gaussia luciferase(ProIL1B-Gluc) | 第15-18页 |
1.3.1 Gaussia 荧光素酶简介 | 第15-16页 |
1.3.2 Gaussia 荧光素酶的应用 | 第16页 |
1.3.3 ProIL1B-Gluc 融合蛋白荧光素酶报告基因的应用 | 第16-18页 |
1.4 本课题研究目的与立题依据 | 第18页 |
1.4.1 研究目的 | 第18页 |
1.4.2 立题依据 | 第18页 |
1.5 实验设计 | 第18-20页 |
1.5.1 质粒的构建 | 第18-19页 |
1.5.2 融合蛋白表达的鉴定 | 第19页 |
1.5.3 ProIL1B-Gluc 转染 293T 细胞荧光值的检测 | 第19页 |
1.5.4 3C 蛋白酶体外切割 ProIL1B-Gluc 报告基因 | 第19页 |
1.5.5 实验设计图 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-32页 |
2.1 实验器材 | 第20-23页 |
2.1.1 实验仪器 | 第20-21页 |
2.1.2 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.3 常用试剂配制 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-32页 |
2.2.1 质粒构建 PCR 及引物设计 | 第23-28页 |
2.2.2 质粒构建筛选与扩增 | 第28-30页 |
2.2.3 质粒转染细胞及融合蛋白表达的鉴定 | 第30-31页 |
2.2.4 报告基因荧光值的检测 | 第31-32页 |
第三章 实验结果 | 第32-47页 |
3.1 质粒的构建 | 第32-37页 |
3.1.1 Pro(9)IL1B-Gluc 质粒的构建 | 第32-33页 |
3.1.2 Pro(8-5A)IL1B-Gluc 质粒的构建 | 第33-35页 |
3.1.3 IL1B-Gluc 质粒的构建 | 第35-36页 |
3.1.4 P3C 质粒的构建 | 第36-37页 |
3.2 荧光值的检测和融合蛋白表达的鉴定与分析 | 第37-45页 |
3.2.1 ProIL1B-Gluc 报告基因可行性检测 | 第37-38页 |
3.2.2 P9-P5A 单转染 293T 细胞荧光值随时间的变化及其相应的 Western blot | 第38-40页 |
3.2.3 P9-P5A 单转染 293T 细胞荧光值随质粒浓度的变化及相应的 Western blot | 第40-41页 |
3.2.4 P9-P5A 六个不同酶切位点长度报告基因的可行性 | 第41-42页 |
3.2.5 ProIL1B-Gluc 荧光值与 P3C 转染质粒浓度的关系 | 第42-44页 |
3.2.6 ProIL1B-Gluc 与 P3C 共转染 293T 细胞荧光值随时间的变化 | 第44-45页 |
3.3 ProIL1B-Gluc 与 P3C 体外切割实验 | 第45-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
结论 | 第50-51页 |
文献 | 第51-54页 |
作者简介 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |