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通过定点突变提高米曲霉乳糖酶的热稳定性的研究 |
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| 论文目录 |
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| 摘要 | 第1-7页 | | Abstract | 第7-11页 | | 第一章 引言 | 第11-22页 | | ·乳糖酶的简介 | 第11-14页 | | ·研究背景 | 第11页 | | ·乳糖酶的来源与性质 | 第11-13页 | | ·乳糖酶国内外研究现状 | 第13-14页 | | ·酶的热稳定机制和分子改造策略研究进展 | 第14-21页 | | ·酶热稳定性的概念 | 第15页 | | ·影响酶热稳定性的因素 | 第15-18页 | | ·提高蛋白质热稳定性的策略 | 第18-21页 | | 本研究的目的和意义 | 第21-22页 | | 第二章 提高乳糖酶热稳定性突变位点的预测与设计 | 第22-51页 | | ·材料 | 第22-25页 | | ·菌种与载体 | 第22页 | | ·工具酶 | 第22页 | | ·试剂 | 第22页 | | ·培养基及有关溶液的配制 | 第22-24页 | | ·寡核苷酸引物 | 第24页 | | ·主要仪器 | 第24-25页 | | ·研究方法 | 第25-36页 | | ·乳糖酶LACH 的同源建模 | 第25页 | | ·乳糖酶LACH 的分子动力学曲线模拟 | 第25页 | | ·突变位点以及突变氨基酸的确定 | 第25页 | | ·突变方法 | 第25-27页 | | ·pPIC9-H’表达载体（H’指任意突变酶基因）的构建 | 第27-28页 | | ·含 pPIC9-H’表达载体克隆子的筛选 | 第28-29页 | | ·重组乳糖酶的表达及纯化 | 第29-31页 | | ·乳糖酶活性的测定 | 第31-33页 | | ·酶学性质的分析与比较 | 第33-36页 | | ·结果 | 第36-48页 | | ·乳糖酶的同源建模 | 第36页 | | ·乳糖酶LACH 分子动力学曲线的测定及突变位点的确定 | 第36-38页 | | ·单点突变 | 第38-44页 | | ·组合突变 | 第44-48页 | | ·定点突变 | 第44页 | | ·重组表达质粒的构建 | 第44页 | | ·突变酶的表达纯化 | 第44-45页 | | ·突变酶酶学性质的分析与比较 | 第45-48页 | | ·乳糖酶 K_m 和 K_(cat) 值的测定 | 第48页 | | ·讨论 | 第48-51页 | | ·T211P，G246P，G248P，G207P 定点突变 | 第48-49页 | | ·L117P，S162P 定点突变 | 第49-50页 | | ·组合突变 | 第50-51页 | | 第三章 第211 位氨基酸对乳糖酶LACH 热稳定性的影响 | 第51-57页 | | ·材料 | 第51页 | | ·寡核苷酸引物 | 第51页 | | ·方法 | 第51-52页 | | ·结果 | 第52-55页 | | ·定点突变 | 第52页 | | ·重组表达质粒的构建 | 第52页 | | ·八个突变体的表达和纯化 | 第52-53页 | | ·八种重组乳糖酶酶学性质的分析与比较 | 第53-55页 | | ·讨论 | 第55-57页 | | 第四章 全文结论 | 第57-59页 | | 参考文献 | 第59-64页 | | 致谢 | 第64-65页 | | 作者简历 | 第65页 |
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论文编号BS525392，这篇论文共65页
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