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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--通过定点突变提高米曲霉乳糖酶的热稳定性的研究
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通过定点突变提高米曲霉乳糖酶的热稳定性的研究
 
     论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 引言第11-22页
   ·乳糖酶的简介第11-14页
     ·研究背景第11页
     ·乳糖酶的来源与性质第11-13页
     ·乳糖酶国内外研究现状第13-14页
   ·酶的热稳定机制和分子改造策略研究进展第14-21页
     ·酶热稳定性的概念第15页
     ·影响酶热稳定性的因素第15-18页
     ·提高蛋白质热稳定性的策略第18-21页
 本研究的目的和意义第21-22页
第二章 提高乳糖酶热稳定性突变位点的预测与设计第22-51页
   ·材料第22-25页
     ·菌种与载体第22页
     ·工具酶第22页
     ·试剂第22页
     ·培养基及有关溶液的配制第22-24页
     ·寡核苷酸引物第24页
     ·主要仪器第24-25页
   ·研究方法第25-36页
     ·乳糖酶LACH 的同源建模第25页
     ·乳糖酶LACH 的分子动力学曲线模拟第25页
     ·突变位点以及突变氨基酸的确定第25页
     ·突变方法第25-27页
     ·pPIC9-H’表达载体(H’指任意突变酶基因)的构建第27-28页
     ·含 pPIC9-H’表达载体克隆子的筛选第28-29页
     ·重组乳糖酶的表达及纯化第29-31页
     ·乳糖酶活性的测定第31-33页
     ·酶学性质的分析与比较第33-36页
   ·结果第36-48页
     ·乳糖酶的同源建模第36页
     ·乳糖酶LACH 分子动力学曲线的测定及突变位点的确定第36-38页
     ·单点突变第38-44页
     ·组合突变第44-48页
       ·定点突变第44页
       ·重组表达质粒的构建第44页
       ·突变酶的表达纯化第44-45页
       ·突变酶酶学性质的分析与比较第45-48页
       ·乳糖酶 K_m 和 K_(cat) 值的测定第48页
   ·讨论第48-51页
     ·T211P,G246P,G248P,G207P 定点突变第48-49页
     ·L117P,S162P 定点突变第49-50页
     ·组合突变第50-51页
第三章 第211 位氨基酸对乳糖酶LACH 热稳定性的影响第51-57页
   ·材料第51页
     ·寡核苷酸引物第51页
   ·方法第51-52页
   ·结果第52-55页
     ·定点突变第52页
     ·重组表达质粒的构建第52页
     ·八个突变体的表达和纯化第52-53页
     ·八种重组乳糖酶酶学性质的分析与比较第53-55页
   ·讨论第55-57页
第四章 全文结论第57-59页
参考文献第59-64页
致谢第64-65页
作者简历第65页

 
 
论文编号BS525392,这篇论文共65
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